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1、蕙兰组织培养操作技术作者：高山觉来源：花木盆景花卉园艺2008年第03期利用植物组织培养大量繁殖种苗，在兰花中的应用最早。种子繁殖时，从种子萌发到开花需要6 7年。如果从亲本植株获得相同的材料，进行分 株等无性繁殖，就会缩短开花期。随着植物组织培养技术的开发，从茎尖取出到开花株只要4年左右时间，并且在短期内得 到大量繁殖。下面介绍蕙兰组培培养大量繁殖的操作顺序。1、母株的选择选择花和叶片的形态、颜色、株形、生长发育状态良好的植株。2、采芽使用茎尖作为组织培养外植体时，取新叶尚未展开、正在伸长的新芽。这是因为随着蕙兰苗生长，生长点附近的分裂组织的活性会慢慢减弱。另外，随着叶片的 展开，杂菌容易进
2、入新芽内部，从而造成接种后污染严重。3、茎尖的摘出(1) 蕙兰的叶片包住茎部分，且茎比较短。叶片基部的柔软部分，尽量不要留在茎上，一 边用解剖刀的先端切开叶片基部，一边小心地从外向里一片一片地剥去叶片。(2) 茎尖外植体的大小为了获得脱病毒植株，取茎尖0.5mm以下为好：从脱毒植株进行大 量繁殖时，取茎尖1mm2mm为好。4、培养基(1) 从茎尖获得原球茎(PLB)的初代培养基可采用京都培养基(Hyponex). Knudson C(KC)、1 /2MS培养基，不添加6-苄基嘌吟(BA)、激动素(KT)、萘乙酸(NAA)、吲哚丁酸(1BA)等植物 生长调节剂。(2) 原球茎(PLB)增殖培养基
3、中，添加NAA1mg / L。5、培养(1) 摘出的茎尖接种后放置在培养室中，温度23C光照强度1500lxz，每天光照时间为12 一16小时，1个月左右开始形成原球茎(PLB)。(2) 形成的原球茎(PLB)继代培养在液体增殖培养基中，进行振荡培养，在液体培养基中的 原球茎(PLB)不断地增殖。(3) 最初培养时的增殖率较低，培养1个月左右后再添加新鲜的液体增殖培养基，这样培养 1个月可增殖6-7倍。原球茎(PLB)增殖培养也可以采用固体培养基。(4) 在培养基更新时，充分生长的原球茎(PLB)可转入茎叶分化的培养基中；幼嫩的原球茎 (PLB)继续返回到增殖培养基中。(5) 培养不久原球茎(PLB)的绿色会不断加深，变成全部浓绿时，毛根发生，也从底部开始 分化出根。(6) 当苗长大后，可进行驯化移栽。6、病毒检测侵染蕙兰的病毒有建兰花叶病毒(Cymbium mosaic virus： CyMV)、齿兰环斑病毒(Odom toglossum Hng spot virua： ORSV)、兰花斑点病毒(Orchidfleck virus： OFV)、建兰温和斑驳病毒 (Cymbidium mild mottIe virus CyMMV)。
