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1.转染前一天，4-5x10*4细胞接种在24孔板上，0.5mL含FBS和抗生素的DMEM（或Opti-MEM，其他培养基）细胞培养基。2. 选择用于初期接种的细胞数量，应能在24小时内使细胞汇合达到70-90%。3. 在50卩1的DMEM（或Opti-MEM,或其他无血清培养基）无血清培养基加入20pmolsiRNA（或0.8ygDNA），柔和混匀；4. 混匀lipofectamin试剂，用50卩1无血清的DMEM或Opti-MEM,或其他无血清培养基）稀释1卩llipofectamin试剂（DNA转染时，则加入2gllipofectamin试剂），轻轻混匀，室温放置5分钟；5. 将稀释好的siRNA和Lipofectamin试剂混合；轻柔混匀，室温放置20分钟,以便形成siRNA/lipofectamin（或DNA/lipofectamin）复合物。6. 将100卩IsiRNA/lipofectamin（或DNA/lipofectamin）复合物加到含有细胞和培养基的培养板的孔中，来回轻柔摇晃细胞培养板板。7.细胞在CO2培养箱中37C温育24h-48h后，进行转染后的其它检测步骤。如果细胞株比较敏感，孵育4-6小时后，除去复合物，更换培养基。
