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1、分类号 密级 注1 学 位 论 文类芽孢杆菌ZC0胞外多糖的制备和生物活性的研究（题名和副题名）陈金苹（作者姓名）指导教师姓名 张建法 教授 申请学位级别 硕士 专业名称 生物化工 论文提交日期 204. 论文答辩日期 2014 学位授予单位和日期 南 京 理 工 大 学 答辩委员会主席 评阅人 2014年 月 日注1:注明国际十进分类法DC的类号。硕士学位论文类芽孢杆菌ZC01胞外多糖的制备和生物活性的研究作 者：陈金苹指导教师：张建法 教 授南京理工大学201年月 / Master Dgree DisertaionPrepation and biologiltiity tuyfr an e
2、xcellular psacchrieroduc by Pnibaclu sp。C0 ByJpingheuevised by Pro. anfa ZhgNanjingUniverity f cience & ThnoyMrch, 214声 明本学位论文是我在导师的指导下取得的研究成果,尽我所知，在本学位论文中,除了加以标注和致谢的部分外,不包含其他人已经发表或公布过的研究成果，也不包含我为获得任何教育机构的学位或学历而使用过的材料。与我一同工作的同事对本学位论文做出的贡献均已在论文中作了明确的说明。研究生签名： 年 月 日 学位论文使用授权声明南京理工大学有权保存本学位论文的电子和纸质文档,可
3、以借阅或上网公布本学位论文的部分或全部内容，可以向有关部门或机构送交并授权其保存、借阅或上网公布本学位论文的部分或全部内容。对于保密论文,按保密的有关规定和程序处理.研究生签名： 年 月 日摘 要近些年来，微生物保胞外多糖作为一种新的发酵产品，因为其具有独特的物理化学性质,易于获得，成本相对较低，而被广泛应用于各个行业。本实验室从河南某农田的土样中分离培养出一株产胞外多糖的新菌株C01。该菌能够在无机盐培养基上生长,通过初步鉴定和1SrDNA同源性分析，确定该菌是一种类芽孢杆菌(aibacls s.ZC01)。采用乙醇沉淀法，将C01菌的发酵液中的代谢产物沉淀析出并烘干,即可得到胞外多糖的粗品
4、。通过单因素法优化发酵条件,得到产胞外多糖最高时的发酵条件为：可溶性淀粉30g/L,蛋白胨 g/L,磷酸氢二钠 1.2 g/L，磷酸二氢钾0.6/L，氯化钙 0。 /L,氯化镁0.3 ,硫酸亚铁002gL，硫酸锰0.0 g/L, 氯化锌001 g/，水1L，8。0，28。发酵液最高产量可达到1.5g/L。该菌所产的胞外多糖,各化学组分含量分别为水分65、蛋白16.4%、灰分109、总糖641。通过分离纯化,气相色谱、红外光谱、核磁共振以及糖残基测定，确定该胞外多糖由四种单糖组成，是一种杂多糖。四种单糖成分分别为葡萄糖、甘露糖、半乳糖、鼠李糖，这四种单糖的摩尔比为1。21.20.71。并且发现多
5、糖中含有一定量的糖醛酸，是一种酸性杂多糖.本实验还研究了多糖的吸水保湿效果和抗氧化性能,发现了该多糖具有与透明质酸相似的吸水保湿性能，具有良好的清除自由基的能力。因此，研究证明该多糖有广泛的应用前景，能大量应用于化妆品行业。关键词:类芽孢杆菌ZC01，多糖，抗氧化，吸水，保湿，分离纯化AstratIn reen yer, microrganisms tracella plyacchrie, a aknd o eferetatin proct，becaue ofts unque ysl and eic opetie, such as easily aaiable, reively low cst
6、， s wiey ppled in varis dtries newstrC01 was solated froma sol smple romHanfamland our laboratoyThe bactri d use inorgancmeum to roucxtracellulr plysccharide. Acordingt pelinay dnification ad 16S DNA homoogalyis， tberia a identfied as th ens Paenibailus (Paeniilus pZ01）。thaoprecipitaton， the fernted
7、 iquid wa adde more than tiesoethao， heetblc prodc aprcipitated ot an dd, ude podcts o te xtracelllr plysaccrdewoudbeobtained。 Thefermetation cnditns wreotimizd thrug singlefacto， the best femntatin conins to prodemor Extallular polysacride ws stud in tspape。Is meia coponent was Solubl sarc 30 g/L,
8、petone 4/L,dsodium hrogphsphat 12 g/L， poassidihydrgen phsphate 6 gL，lmclide 0. L, meium clrie 03 g/L， errous sulfte， 0。125 gL， maganesesulfate， 0.00 g/, zi cloid 0。1 g/， 1 Lte, p。, 28 .thmaxmu yield coudreac 5 g/L.hemicalomosition of xoplyacarid ae isure 8.6%， potei16.24,totalsugar 4。01%， sh 1。9%.
9、Through separanad prification， gs hromtorapy，infrared spctru, nucler magt resance （NMR） and suar rese deterintin， the xtrellur polyscharide was fud is ain o heeroolyschardecopsed fur insf onosaccaride. Fur kids of mnoscchade mposiion were gucose, annse， galactose， amn，themoar ratio wa1。：1：.7：1. And
10、the oolysacarie found to oai crtain amt ofuronic ai， i a id of acii hetropoyaccade. e studie msterttion capcii and anioxidant of th exosaccharefon hthe poyscchaide hs mistureaboption nd -rtenton capties and the wll capable of scavenig freeadicas comaewith hyuroni aid。 Terre, lltheresl frm this aper
11、hav shown ta he olysahidehas a wdey plicatioprosect andcolbe used to i cometiceywos： Paeniaclus sZC01， plyccaride,antoxian, Moisturebsoion,Mosure eentio, searaton and puifation 目 录摘 要IbstctI目 录III1 绪论1.1 多糖的研究111 植物多糖.12 动物多糖1。1。3海藻多糖21。1。4 微生物多糖2微生物胞外多糖的生物活性31.21 免疫调节活性31。2.2抗肿瘤活性1。2.3 降血糖和降血脂作用41。
12、2.4 抗氧化活性。 微生物胞外多糖的应用43。1 胞外多糖在医疗方面的应用532胞外多糖在食品行业的应用.3胞外多糖在化妆品方面的应用3。4胞外多糖在环境方面的应用71.4 本课题的目的、意义及主要研究内容714.1 课题的目的和意义.4.2主要研究内容2类芽孢杆菌ZC1胞外多糖的初步鉴定82。材料与方法8。11主要试剂82.主要仪器92.3菌种筛选来源12。4C01 菌的初步鉴定方法1025菌种的保藏12。.胞外产物性质的确定1322 结果与讨论132.1菌种的培养12.菌株的初步鉴定2。2.ZC1菌的D提取和PC实验142。4 C01菌的1s rDN系统发育分析16。 本章小结163 类芽孢杆菌ZC发酵产胞外多糖条件的优化1831 材料与方法8。11 实验材料与试剂183。1。2主要仪器183.13实验方法193.1。
