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ELISPOT实验指南及常见问题大汇总酶联免疫斑点法(enzyme linked immunospot assay, ELISPOT)，作为一项新型的免疫酶技术，是从单细胞水平 检测分泌抗体细胞(ASC)或分泌细胞因子(CK)细胞的一项 细胞免疫学检测技术。由于该方法敏感性高，易操作，成本 相对流式细胞分析术也较低，已被广泛用于分泌CK细胞检 测或ASC测定中。原理：细胞受到刺激后局部产生细胞因子，此细胞因子被特 异单克隆抗体捕获，被捕获的细胞因子与生物素标记的二抗 结合，其后再与碱性磷酸酶标记的亲和素结合。BCIP/NBT 底物孵育后，PVDF孔板出现“紫色”的斑点表明细胞产生了 细胞因子，通过ELISPOT酶联斑点分析系统对斑点的分析 后得出结果。从字面上来说，可以分解成两部分：“酶联免疫”与“斑点”。 ELISAELISPOT酶联免疫抗体捕获的抗原来自样品溶液中 的已经存在的、均匀分布的抗原分子抗体捕获的抗原来自样 品细胞在检测的当时新鲜分泌的抗原分子酶联免疫斑点显 色出来的是或深或浅的有色溶液显色出来的是沉积在固体 基板上或多或少的有色斑点
