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1、呋塞米对大鼠的利尿作用目的:利尿药是一种直接作用于肾脏,增加电解质和水的 排出从而使尿量增加的药。其中呋塞米是这种药代表,也是一种 强效的利尿药。在学习了利尿药的利尿机制之后,以本实验来验 证性的观察呋塞米对麻醉大鼠以及清醒大鼠的利尿作用,从而加 深对利尿药及其机制的理解,并掌握麻醉和清醒动物的利尿方法。原理:呋塞米是一种高效的利尿药,其作用机制为:与肾小 管髓祥升支粗短上皮上的Na+K+2Cl-同向转运体选择性 的结合,从而抑制了其转运能力,因此,Na和Cl在肾小管处的 重吸收就受到抑制,因此尿浓缩功能受到影响,从而排出大量几 乎等渗的尿液。同时,预先用1%NaCl对实验大鼠进行水负荷可以使
2、实验现象 更加明显。对清醒大鼠的利尿实验应采取代谢笼法。一 呋塞米对麻醉小鼠的利尿作用1材料与方法1.1实验动物:雄性大鼠1.2实验药品:乌拉坦麻醉药,1%呋塞米,生理盐水1.3实验器材:手术剪,止血钳,眼科剪,烧杯,刻度试管, 导尿管,丝线,缝针,试验台,灌胃针。2 实验方法:1)取一只正常大白鼠,称重,然后用生理盐水按照20ml/kg 的比例进行灌胃处理。2)腹腔注射乌拉坦1.2g/kg进行麻醉。麻醉好后将大鼠固定 在大白鼠台上,取仰卧位,然后从颈部作一纵切口,分离出一侧 颈外静脉,并做好静脉插管。3)做腹部切口,暴露膀胱,并以荷包蛋缝合的方式对膀胱进 行插管,并排空膀胱。4)于颈静脉插管
3、处注射生理盐水1 ml/kg,并收集20分钟尿 液流出量作为正常值。5)同样方法注射呋塞米1 ml/kg,并收集20分钟尿液。比较 尿量的变化。3实验结果:如下。分别注射生理盐水和呋塞米20分钟收集到的尿量组号生理盐水呋塞米10.452.5201300.28402.1513均数0.291.776标准差0.4421.114p值0.0151匚对照组实验组4结果分析:1)从上表可以看出,每组实验注射生理盐水后收集的尿量明 显比注射呋塞米后的小,说明了呋塞米确有利尿作用。2)每组所得实验结果偏差较大,以致标准差很大。这与实验 动物的生理状态,实验操作过程有关,是由于个体原因造成的。3)可以看到,pV0
4、.05,这说明统计结果具有统计意义,即呋 塞米具有高效的利尿作用。5注意事项1)分离颈总静脉和插管时,应尽量小心,不可大力撕扯,因为 经脉璧薄易被撕裂或者误伤。2)膀胱插管不宜过深。在做腹部手术时应注意不可损伤输尿 管。3)所有插管内的空气均应排干净。二呋塞米对清醒大鼠的利尿作用1材料与方法1.1实验动物:大白鼠1.2实验药品:1%呋塞米,生理盐水。1.3实验器材:称,注射器,灌胃针,烧杯,代谢笼。2实验方法:1)每组取大鼠2只(大小尽量相同),称重,并给大鼠灌胃, 灌胃比列为:生理盐水30ml/kg。2)将两只大鼠分开,其中一只放入代谢笼内做对照组。另一 只肌内注射呋塞米:1ml/kg。放入
5、另一代谢笼。3)观察。没30分钟收集尿液一次,连续观察90分钟。3实验结果:如下表。30min对照30min试验组号组组60min对照60min实验组106.409.8204.907.332.57.5311.4403.224.8均数0.6255.51.258.325标准差1.251.8671.52.893p值0.0050.0054结果讨论:1)每组注射呋塞米的大鼠尿量明显多于注射生理盐水的大鼠,说明呋塞米能使大鼠尿量增多,即具有利尿效果。2)由表可知,30分钟和60分钟均可得pVO.01,即所得结果具有高度统计学意义,说明了呋塞米具有显著的利尿作用。3)各组实验数据差异与大鼠个体差异和操作人员
6、的操作以及实验时间等因素的不同有关,但是不影实验的整体结果。5注意事项:在对对照大鼠处理时,可以肌内注射生理盐水:1ml/kg,以 保证两只老鼠所受刺激等因素的影响一致。并且在实验过程中, 应尽量保证两只老鼠所处环境相同,避免影响实验结果。三总结1)在实验过程中,第二个实验比较简单,都能很好的得出结果,只是对灌胃技术掌握的不是很好,缺少练习,导致灌胃困 难。2)第一个实验相对困难,两处手术对大鼠造成了很大伤害, 在做插管时,主要是对颈静脉插管不熟悉,以及初次接触荷包缝 合方式故使实验时间延长。3)这两个实验一起做,但没有证明呋塞米对清醒和麻醉大 鼠的利尿作用有什么不同之处。可以另作研究。4)固定大鼠时用力过大,麻醉药物使用过多,麻醉药浓度 过高,静脉推注呋塞米过快,实验时间过长等原因均可造成实验 大鼠死亡而使实验失败。为了保证实验成功,应尽量避免以上现 象出现。5)实验需要所有实验成员密切配合才能快速而成功的完成 实验。6)呋塞米利尿作用具有高效,迅速,强大和短暂的特点, 故在临床上可用于严重水肿,急性肺水肿和脑水肿以及肾功衰等 疾病的治疗。但是应注意不良反应。如有侵权请联系告知删除,感谢你们的配合!