《液相色谱操作规程》由会员分享，可在线阅读，更多相关《液相色谱操作规程（3页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、液相色谱操作规程一. 开机 按以下次序打开色谱仪各部分电源。泵f检测器f计算机主机f显示器f打印机二. 打开色谱工作站软件用鼠标双击“色谱工作站”图标，然后输入密码“SAGE”，选OK。然后选“ Alltech-426” 图标。三 设定色谱分析条件1. 设定色谱泵流量按箭头输入所需的流速，按RUN/STOP键开始运行。2. 设定检测器条件检测器自检通过后，调整到检测所需波长数。按ZREO键回零四准备分析1.配置流动相，按体积比配置所需的流动相。混合均匀，过滤、在超声波清洗器中超声20 分钟。2将过滤头放入流动相中，打开泵上的旁通阀，按PURG键，冲洗并用注射器抽取一定量的 流动相，直到塑料管中
2、无气泡为止。再按一下则停止。3. 按“RUN/STOP” 键，开泵。五. 进样分析1.在计算机上，选择蓝色的“RUN/SINGLE”图标，在数据文件名的左侧，将chrom后的文 件名改为你设定的名称，如SAM01.001，然后选择OK。将进样阀扳到LOAD位置，用微 量注射器抽取所需量微升的样品，注入到进样阀中，按检测器的调零键“ZERO”，然后将 进样阀扳到INJECT位置，敲键盘上的空格键这时，色谱系统开始工作。2色谱图采集完毕，系统自动停止计时。此时选择“ Analyze”图标，对谱图进行计算，然 后选择“ Reports ”图标，选择“面积”，即可在屏幕上观察分析结果。如需将分析结果
3、打印出来，选择打印机图标，选择“打印报告Pf选择“定制C”，打印机即开始打印分析 结果。3. 分析下一个样品，重复1 步和2步。每个样品之间间隔5分钟左右。六. 关机关机前，用流动相冲洗色谱柱2030分钟，如色谱柱长期不用，再用纯乙腈冲洗2030 分钟，然后，先关闭计算机软件，按以下次序切断各部分电源：计算机主机f显示器f泵f 检测器 注意事项：1. 计算机一定要先退出操作软件后，才能切断电源。2. 色谱泵流量一般情况下不能超过1.5ml/min。3. 当流动相用完后，泵不能启动。操作规程附录当需要修改分析条件时，可按以下步骤操作：一. 修改运行时间：选择“Setup”图标，将采样频率设定为2
4、,运行时间设为实际色谱分析时间，如10或 20分钟，通道状态选为ON，触发选为第二项。选OK,然后选择“文件” f “保存方法S”二. 修改积分参数当计算结果不正常时，需要修改积分参数：选择“方法” f “积分参数表I” f将Minimun Area （最小峰面积）增加或减少，目 的是不计算小的杂质峰，将“Width”（峰宽）增加或减少，平头峰一般设2.2左右，正常 的尖峰一般设为0.5左右。“Threshold”（峰灵敏度）一般设为150。然后选择“Analyze” 重新计算。如结果仍不满意，重复以上步骤，直到结果满意为止。选择“文件” f “保存 方法”。三. 修改报告格式选择“方法”f
5、“定制报告” f用鼠标联击第一个方框，选择File Name, User Name, Acu. Time & Date, Print Time & Date, 在方框中输入注释。用鼠标点击第二个方框， Scaling 左侧选为 Autoscale To Largest Peak 用鼠标点击 Options 后的 Annotation 下的 Retention Time 用鼠标点击第三个方框，选择Unnamed Peaks和Totals, Format 在 Title 下，在与左侧响应的位置敲入 Peak Number, Retention Time ,Area, Area% 在 Column,
6、 Width, Format 下输入响应的数字。注：Column为坐标。Width为宽度，一般为10或14。Format为小数点后的位数，一般为 2或3。四. 调阅以前的图谱或方法用鼠标选择Method图标，然后选择你所需要的方法，选OK即可。用鼠标选择Data 图标，然后选择你所需要的图谱，选OK即可。内标法1.用鼠标单击METHOD图标，选择方法，单击OK。2用鼠标单击蓝色的RUN/SINGLE图标，修改数据名称为标样1.DAT,或别的名称，进一针 标样。3. 标样谱图记录完毕，用鼠标单击ANALYZE图标，对谱图计算。然后鼠标单击任务栏上 的方法菜单，选择图形参数设置，鼠标右移选择确认峰
7、，然后用鼠标在第一个峰的前面点一 下，在最后一个峰的后面点一下，然后选择替代。4. 在谱峰表内的ISTD ID#下的第一行，输入内标物的出峰顺序号（1或2）,在LEVEL 1 下的第一行输入标样的浓度，在第二行输入内标物的浓度。5. 然后用鼠标单击任务栏上的方法菜单，选择校正设置，在校正设置对话栏内，第三行选择 面积，第四行选择AVERAGE RF，第五行输入NONE，第六行不选，第七行输入平均，第 八行选择0,第九行选NONE，第十行为0,第十一行不选，第十二行为内标量输入1,第 十三行输入1，第十四行输入1。6然后用鼠标单击RECALIB图标，选择校正，选择是。7.然后用鼠标单击任务栏上的
8、方法菜单，选择显示校正曲线，记录校正因子RF。8选择Run Calib图标，修改方法名，再进标样，谱图记录完毕，然后用鼠标单击任务栏上 的方法菜单，选择显示校正曲线，记录校正因子RF,计算标准偏差，如果小于0.3%，则用 鼠标单击蓝色的RUN/SIGLE键，进样品，然后选择打印图标打印出结果。9. 打印出的浓度即为内标浓度。外标法1.用鼠标单击METHOD图标，选择所需方法，单击OK。2用鼠标单击蓝色的RUN/SINGLE图标，修改数据名称为标样1.DAT,或别的名称，进一针 标样。3标样谱图记录完毕，用鼠标单击ANALYZE图标，对谱图计算。然后鼠标单击任务栏上的 方法菜单，选择图形参数设置
9、，鼠标右移选择确认峰，然后用鼠标在标准品峰的前面点一下， 后面点一下，然后选择替代。4.在谱峰表内的 LEVEL 1 下的第一行输入标样的浓度。如果标样有多个浓度则在 LEVEL* 下的第一行输入第*个标样的浓度。5.然后用鼠标单击任务栏上的方法菜单，选择校正设置，在校正设置对话栏内，第三行选择 面积，第四行选择AVERAGE RF,第五行输入NONE，第六行不选，第七行输入平均，第 八行选择0第九行选NONE，第十行为0第十一行不选，第十二行为内标量输入0第 十三行输入1，第十四行输入1。6然后用鼠标单击RECALIB图标，选择校正，选择是。7然后用鼠标单击任务栏上的方法菜单，选择显示校正曲线，记录校正因子RF。8选择Run Calib图标，修改方法名，再进标样，谱图记录完毕，然后用鼠标单击任务栏上 的方法菜单，选择显示校正曲线，记录校正因子RF,计算标准偏差，如果小于0.3%，则用 鼠标单击蓝色的RUN/SIGLE键，进样品，在样品量出处输入样品量（如：取2ml样品稀释 到50ml,则样品量应为50/2/1000000*100%=0.0025）然后选择打印图标打印出结果。9.打印出的浓度即为外标含量。
