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1、高中生物实验总结实验一 观测NA和RNA在细胞中的分布（必修一P26)一、实验原理：、真核细胞的DNA重要分布在细胞核内，RNA大部分存在于细胞质中。、甲基绿和吡罗红两种染色剂对DA和RNA的亲和力不同，甲基绿对DN亲和力强，使DNA显现出绿色,而吡罗红对N的亲和力强,使RA呈现出红色。运用甲基绿、吡罗红的混合染色剂将细胞染色,可同步显示D和RNA在细胞中的分布。、盐酸的作用 盐酸能变化细胞膜的通透性,加速染色剂进入细胞; 盐酸使染色体中的DNA与蛋白质分离，有助于DNA与染色剂结合 4、09的NaCl溶液作用:保持口腔上皮细胞的正常的形态二、目的规定:初步掌握观测N和N在细胞中分布的措施三、
2、材料用品：人的口腔上皮细胞（也可用其她动物或植物细胞替代，如洋葱鳞片叶表皮细胞)大烧杯、小烧杯、温度计、滴管、消毒牙签、载玻片、盖玻片、铁架台、石棉网、火柴、酒精灯、吸水纸、显微镜 质量分数为0.9%的NCl溶液,质量分数为%的盐酸，吡罗红甲基绿染色剂（取A液L,B液80mL配成染色剂，使用时现配。A液:取吡罗红甲基绿粉1g，加入100m蒸馏水中溶解,放入棕色瓶中备用。B液:取乙酸钠14g，用蒸馏水溶解至1000mL。取乙酸12L，用蒸馏水稀释至10mL。取稀释的乙酸钠溶液30m和乙酸0L，加蒸馏水50mL,配成pH为.的溶液），蒸馏水五、措施环节：1、取口腔上皮细胞制片在干净的载玻片上滴一滴
3、质量分数为09%的NCl溶液。 用消毒牙签在自己漱净的口腔内侧壁上轻轻地刮几下，把牙签上附有碎屑的一端,放在上述载玻片上的液滴中涂抹几下。点燃酒精灯，将涂有口腔上皮细胞的载玻片烘干。(固定细胞）2、水解在小烧杯中加入0mL质量分数为%的盐酸,将烘干的载玻片放入小烧杯中。在大烧杯中加入30温水。将盛有盐酸和载玻片的小烧杯放在大烧杯中保温5in。、冲洗涂片用蒸馏水缓水流冲洗载玻片10s。4、染色用吸水纸吸去载玻片上的水分。将吡罗红甲基绿染色剂滴2滴在载玻片上，染色5n。吸去多余染色剂,盖上盖玻片。5、观测低倍镜观测：选择染色均匀,色泽浅的区域,移至视野中央，将物像调节清晰。换用高倍物镜观测:调节细
4、准焦螺旋，观测细胞核和细胞质的染色状况。六、考点提示：1、取口腔上皮细胞之前,应先漱口，以避免装片中浮现太多的杂质；2、取洋葱表皮细胞时，尽量避免材料上带有叶肉组织细胞；3、冲洗载玻片时水的流速要尽量慢,切忌直接用水龙头冲洗;、用酒精灯烘烤载玻片时，不要只集中于材料处,而应将载玻片在火焰上来回移动，使载玻片均匀受热,以免破裂;5、烘烤后的载玻片不要立即放入盛有稀盐酸的烧杯中,最佳先自然冷却分钟。实验二 检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质(必修一P18)一、实验原理:某些化学试剂能使生物组织中的有关有机化合物产生特定的颜色反映。、生物组织中普遍存在的可溶性糖类较多,有葡萄糖、果糖、麦芽糖和蔗糖。
5、前三种糖的分子内都具有游离的具还原性的半缩醛羟基，因此叫做还原糖;蔗糖分子内没有,为非还原糖。实验中所用的斐林试剂，只能鉴定生物组织中可溶性还原糖，而不能鉴定可溶性非还原糖。糖类中的还原糖（如葡萄糖、果糖、麦芽糖）与斐林试剂发生作用,可生成砖红色的Cu2沉淀。用斐林试剂鉴定还原糖时，溶液变化过程为:浅蓝色棕色砖红色沉淀淀粉遇碘变蓝色（直链）或紫（红）色（支链）。、脂肪和类脂（磷脂、糖脂、固醇脂等)统称为脂类。它是构成人体组织的正常成分，不溶于水而易溶于酒精、乙醚、氯仿等脂溶剂中。在化学构成上,脂类属于脂肪酸的酯或与这些酯有关的物质。脂类的重要功能是氧化供能。 脂肪重要存积于脂肪组织中,并以油滴
6、状的微粒存在脂肪细胞浆内。 脂肪可以被苏丹染液染成橘黄色(或被苏丹染液染成红色)。、蛋白质与双缩脲试剂发生作用,产生紫色反映。(蛋白质分子中具有诸多肽键,在碱性NO溶液中能与双缩脲试剂中的C2+作用,产生紫色反映。） 因此,可以根据与某些化学试剂所产生的颜色反映,检测生物组织中糖类,脂肪或蛋白质的存在。二、实验目的： 尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质。三、实验材料:1、做可溶性还原性糖鉴定实验,应选含糖高，颜色为白色的植物组织,如苹果或梨匀浆。(由于组织的颜色较浅,易于观测。)经实验比较,颜色反映的明显限度依次为苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜。、做脂肪的鉴定实验。应选富含脂肪的种子
7、,以花生种子、花生种子匀浆为最佳,实验前一般要浸泡34小时(也可用蓖麻种子)。3、做蛋白质的鉴定实验，可用富含蛋白质的豆浆、鲜肝提取液。4、淀粉的鉴定：马铃薯匀浆。四、实验用品：双面刀片、试管(最佳用刻度试管）、试管夹、试管架、大小烧杯、小量筒、滴管、酒精灯、三脚架、石棉网、火柴、载玻片、盖玻片、毛笔、吸水纸、显微镜五、实验试剂：1.斐林试剂（甲液：质量浓度为.g/ mLNaO溶液，乙液：质量浓度为0.05g/ m CuS4溶液)2.苏丹或苏丹染液3.双缩脲试剂(A液：质量浓度为0.1g/L NaH溶液，液：质量浓度为0.01/ L CuS4溶液)4体积分数为50%的酒精溶液5.碘液蒸馏水六、
8、措施环节:1.实验材料、仪器和试剂的选择 每小组从教师提供的实验材料中选择一两种，预测其中具有哪些化合物,再选择所需要的仪器和试剂。2.设计登记表格,记录预测成果,然后按照实验环节进行检测,用“+”或“-”记录实测成果。3.检测的措施环节(1)可溶性糖的检测和观测1.制备组织样液。（去皮、切块、研磨、过滤）苹果或梨组织液必须临时制备。因苹果多酚氧化酶含量高，组织液很易被氧化成褐色，将产生的颜色掩盖。2.取1支试管，向试管内注入2mL待测组织样液。 向试管内注入mL新制的斐林试剂，振荡。(应将构成斐林试剂的甲液、乙液分别配制、储存，使用前才将甲、乙液等量混合均匀后在注入）。(切勿将甲液、乙液分别
9、加入苹果组织样液中进行检测。斐林试剂很不稳定，甲、乙液混合保存时，生成的Cu ( OH )2在70 900o下分解成黑色Cu和水,甲、乙液分别加入时也许会与组织样液发生反映，无C （OH ）2生成)。4.试管放在盛有0-6温水的大烧杯中,加热约2min。5.观测试管中浮现的颜色变化:浅蓝色 棕色 砖红色（沉淀)。(好用试管夹夹住试管上部,使试管底部不触及烧杯底部,试管口不要朝向实验者。也可用酒精灯对试管直接加热，短实验时间。避免试管内的溶液冲出试管,导致烫伤。）(2)脂肪的检测和观测措施一:向待测组织样液中滴加3滴苏丹III染液,观测样液被染色的状况。措施二：制作子叶临时切片，用显微镜观测子叶
10、细胞的着色状况（以花生为例)。取材 取一粒浸泡过的花生种子，去掉种皮。(干种子要浸泡34小时,新花生的浸泡时间可缩短。由于浸泡时间短,不易切片；浸泡时间过长，组织较软,切片不易成形。切片要尽量薄些，便于观测)切片用刀片在花生子叶的横断面上平行切下若干薄片，放入盛有清水的培养皿中待用。制片从培养皿中选用最薄的切片，用毛笔蘸取放在载玻片中央；在花生子叶薄片上滴23滴苏丹,染色3min(如果用苏丹染液,染色1mi)，(染色时间不适宜过长),薄片周边染液,再滴加1滴体积分数为0%的酒精溶液，洗去浮色,（酒精用于洗去浮色，不洗去浮色,会影响对橘黄色脂肪滴的观测。同步,酒精是脂溶性溶剂,可将花生细胞中的脂
11、肪颗粒溶解成油滴。)用吸水纸吸去花生子叶周边的酒精，滴上一滴蒸馏水(滴上清水可避免盖盖玻片时产气愤泡)，盖上盖玻片,制成临时装片。观测 在低倍显微镜下找到花生子叶的最薄处，移至视野中央，将影像调节清晰;换高倍镜观测,视野中被染成橘黄色的脂肪颗粒清晰可见。（装片不适宜久放,时间一长，油滴会溶解在乙醇中）（3）蛋白质的检测和观测制备组织样液(浸泡、去皮研磨、过滤)。黄豆浸泡1至2天，容易研磨成浆，也可购新鲜豆浆以节省实验时间。可用蛋清替代豆浆，蛋清要先稀释。如果稀释不够,在实验中蛋清粘在试管壁,与双缩脲试剂反映后会粘固在试管内壁上，使反映不容易彻底,并且试管也不易洗干净。向试管内注入2mL待测组织
12、样液。向试管内注入双缩脲试剂液1m，摇匀。向试管内注入双缩脲试剂B液4滴，摇匀。(先加NH溶液,为Cu2与蛋白质反映提供一种碱性的环境。A、B液混装或同步加入，会导致u2+变成Cu (H ) 2沉淀,而失效。CS溶液不能多加,否则CuSO4的蓝色会遮盖反映的真实颜色）观测试管中浮现的颜色变化。(溶液变紫色）（4）淀粉的检测和观测向试管内注入2L待测组织样液。向试管内滴加2滴碘液,观测颜色变化。（碘液不要滴太多,以免影响颜色观测）七、考点提示：1、常用还原性糖与非还原性糖有哪些?答：葡萄糖、果糖、麦芽糖都是还原性糖；淀粉、蔗糖、纤维素都是非还原性糖。 、还原性糖植物组织取材条件?答:含糖量较高、
13、颜色为白色或近于白色，如:苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜等。 3、研磨中为什么要加石英砂？不加石英砂对实验有何影响？ 答:加石英砂是为了使研磨更充足。不加石英砂会使组织样液中还原性糖减少,使鉴定期溶液颜色变化不明显。 、斐林试剂甲、乙两液的使用措施?混合的目的?为什么要现混现用？答：混合后使用;产生氢氧化铜;氢氧化铜不稳定。 5、还原性糖中加入斐林试剂后,溶液颜色变化的顺序为？ 答：浅蓝色棕色 砖红色。、花生种子切片为什么要薄? 答：只有很薄的切片,才干透光,而用于显微镜的观测。 、转动细准焦螺旋时,若花生切片的细胞总有一部分清晰，另一部分模糊,其因素一般是什么？ 答：切片的厚薄不均匀。 8、脂
14、肪鉴定中乙醇作用？ 答：洗去浮色。 9、双缩脲试剂A、B两液与否混合后用?先加A液的目的如何通过对比看颜色变化?答:不能混合;先加液的目的是使溶液呈碱性;先留出某些大豆组织样液做对比。10、在鉴定蛋白质的实验中,若用鸡蛋清作实验材料，必须稀释，以免实验后黏住试管,不易洗刷。11、斐林试剂与双缩脲试剂的区别： （1）溶液浓度不同（斐林试剂乙液：质量浓度为005g/m uSO4溶液，双缩脲试剂液：质量浓度为0.01g/ mLCuSO4溶液) （2)使用原理不同斐林试剂是新配制的Cu(OH)2溶液，它在加热的条件下与醛基反映,被还原成砖红色的Cu2O沉淀，可用于鉴定还原糖的存在，实验中溶液颜色的变化
15、过程为：浅蓝色-棕色-砖红色 鉴定生物组织中与否具有蛋白质时,常用双缩脲法,使用的是双缩脲试剂,发生的是双缩脲反映。双缩脲反映的实质是在碱性条件下，u+与双缩脲发生的紫色反映。而蛋白质分子中有诸多与双缩脲(H2NOC-NH-CH2)构造相似的肽键,因此蛋白质都能与双缩脲发生颜色反映,可以使用双缩脲试剂鉴定蛋白质的存在。(3)使用措施不同：斐林试剂的甲液、乙液分别配制、储存,使用前才将甲、乙液等量混合均匀后在注入；双缩脲试剂先向试管内注入A液1m,摇匀,再向试管内注入液4滴,摇匀。实验三 用显微镜观测多种多样的细胞（必修一P7)一、目的规定:1使用高倍显微镜观测几种细胞，比较不同细胞的异同点.运用制作临时装片的措施二材料用品: 1.建议选用的观测材料：真菌（如酵母菌)
