单克隆抗体应用

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1、作为检验医学实验室的诊断试剂，单克隆抗体以其特异性强、纯度高、均一性好等优点，广泛应用于鉴别淋巴细胞、鉴定病原体、肿瘤的诊断和分型和体内激素含量的测定等技术。并且单克隆抗体的应用，很大程度上促进了商品化试剂盒的发展。但是单克隆抗体对抗原的识别，与多克隆抗体有很大的不同。不同试剂盒因使用的单克隆抗体不同，识别抗原的位点不同，导致检测结果有一定差异。因此，标准化问题还需要进一步研究。(1)诊断各类病原体这是单抗应用最多的领域，已有大量诊断试剂商品供选择。如用于诊断乙肝病毒、丙肝病毒、疱疹病毒、巨细胞病毒、EB病毒和各种微生物、寄生虫感染的试剂等。单抗所具有的灵敏度高、特异性好的特点，使其在鉴别菌种

2、的型及亚型、病毒变异株，以及寄生虫不同生活周期的抗原性等方面更具独特优势。(2)肿瘤特异性抗原和肿瘤相关抗原的检测用于肿瘤的诊断、分型及定位。尽管目前尚未制备出肿瘤特异性抗原的单抗，但对肿瘤相关抗原(如甲胎蛋白、肿瘤碱性蛋白和癌胚抗原)的单抗早就用于临床检验。随着淋巴细胞杂交瘤技术的应用，许多抗人肿瘤标记物的杂交瘤细胞株已经建立，这为肿瘤的早期诊断及其阐明肿瘤的发生、发展，了解肿瘤细胞的生物学活性及其定量研究奠定了基础。用抗肿瘤单抗检查病理标本，可协助确定转移肿瘤的原发部位。以放射性核素标记单抗可用于体内诊断，再结合X-线断层扫描技术，可对肿瘤的大小及其转移灶作出定量诊断。(3)检测淋巴细胞表

3、面标志用于区分细胞亚群和细胞的分化阶段。例如检测CD系列标志，有利于了解细胞的分化和T细胞亚群的数量和质量变化，这对多种疾病诊断具有参考意义。细胞表面抗原的检测，将对白血病患者的疾病分期、治疗效果、预后判断等方面有指导作用。组织相容性抗原检测是移植免疫学的重要内容，应用单抗对其进行位点检测可得到更可信的结果。(4)机体微量成分的测定应用单抗结合其它技术，可对机体的多种微量成分进行测定。如放射免疫分析，即是利用了同位素的灵敏性和抗原-抗体反应的特异性而建立起来的方法，它可以测至10-910-12g，使原来难以测定的激素能够进行定量分析。除了激素，还可检测诸多酶类、维生素、药物和其它生化物质。这对

4、受检者健康状态判断、疾病检出、指导诊断和临床治疗均具有实际意义。)纯化抗原是利用各种蛋白间的相似性来除去非蛋白物质的污染，利用各蛋白质的差异将目的蛋白从其他蛋白中纯化出来。而单克隆抗体在这一领域的应用主要是利用单克隆抗体能与其相应的抗原特异性结合，因而能够从复杂系统中识别出单个成分。只要得到针对某一成分的单克隆抗体，利用它作为配体，固定在层析柱上，当样品流经层析柱时，待分离的抗原可与固相的单克隆抗体发生特异性结合，其余成分不能与之结合。将层析柱充分洗脱后，改变洗脱液的离子强度或pH，欲分离的抗原与抗体解离，收集洗脱液便可得到欲纯化的抗原。如用抗人绒毛膜促性腺激素(hCG)亲合层析柱，就可从孕妇

5、尿中提取到纯的hCG。与其它提取方法(沉淀法、高效疏水色谱法等)相比，具有简便、快速、经济、产品活性高等优点。因为单克隆抗体具有高度的特异性和敏感性，所以它好像分子刀一样，能够剖析任何一种抗原物质的微细结构，加之，它又具有均质纯的特点，故可利用单抗能更深刻、更全面地分析抗原构造，特别是对细胞表面的小分子抗原的分析更有意义。目前国外已有几个系列的产品，例如最常用的OKT和抗Leu系列，分析白细胞的表面抗原OKT是英文缩写，指美国Ortho公司，K指研制者的姓（Kung、龚氏，美籍华人）、T指T细胞，根据T细胞膜抗原的特异性编为不同数字的号码，如OTK1、OTK3、OTK4等。抗Leu系列是美国BeetonDickinson公司生产的抗人白细胞单克隆抗体，其中抗Leu1Leu6可检测T细胞表面不同的膜抗原。临床上使用这类T细胞单克隆抗体来测定血液、渗出液和组织切片中T细胞及其亚群的数量、比值以及是否处于激活等状态。单克隆抗体只与抗原分子上某一个表位（即抗原决定簇）相结合，利用这一特性就可把它作为研究工作中的探针。此时，可以从分子、细胞和器官的不同水平上，研究抗原物质的结构与功能的关系，进而并可从理论上阐明其机理。