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1、专题19 生物技术实践1（2020年山东省高考生物试卷（新高考)20）野生型大肠杆菌可以在基本培养基上生长，发生基因突变产生的氨基酸依赖型菌株需要在基本培养基上补充相应氨基酸才能生长。将甲硫氨酸依赖型菌株M和苏氨酸依赖型菌株N单独接种在基本培养基上时，均不会产生菌落。某同学实验过程中发现，将M、N菌株混合培养一段时间，充分稀释后再涂布到基本培养基上，培养后出现许多由单个细菌形成的菌落，将这些菌落分别接种到基本培养基上，培养后均有菌落出现。该同学对这些菌落出现原因的分析，不合理的是（ ）A操作过程中出现杂菌污染BM、N菌株互为对方提供所缺失的氨基酸C混合培养过程中，菌株获得了对方的遗传物质D混合
2、培养过程中，菌株中已突变的基因再次发生突变【答案】B【解析】【分析】本题以大肠杆菌营养缺陷型为材料进行相关实验探究为情境，考查考生综合运用所学知识分析实验结果的能力。【详解】A.操作过程当中出现杂菌污染，基本培养基上生长的为杂菌，A合理；B.若M、N菌株互为对方提供所缺失的氨基酸形成的菌落，需要MN混合在一起才能生存，而该菌落来自于单个细菌形成的菌落，单个细菌不可能混合培养的细菌。B项不合理。C.M、N菌株混合培养后在基本培养基上可以生存。推测可能是混合培养过程当中，菌株间发生了基因交流，获得了对方的遗传物质，C合理；D.基因突变是不定向的，在混合培养过程中，菌株当中已突变的基因也可能再次发生
3、突变得到可在基本培养基上生存的野生型大肠杆菌，D合理。故选B。【点睛】两种营养缺陷型的大肠杆菌混合培养细菌可以通过相互“接合”（即有性生殖）而实现基因交流。2（2020年浙江省高考生物试卷（7月选考)19）下列关于微生物培养及利用的叙述，错误的是（ ）A利用尿素固体培养基可迅速杀死其他微生物，而保留利用尿素的微生物B配制培养基时应根据微生物的种类调整培养基的pHC酵母菌不能直接利用糯米淀粉发酵得到糯米酒D适宜浓度的酒精可使醋化醋杆菌活化【答案】A【解析】【分析】1、微生物培养的关键是防止杂菌污染；培养基制作完成后需要进行灭菌处理，培养基通常可以进行高压蒸汽灭菌；2、接种方法主要有平板划线法和稀
4、释涂布平板法。【详解】A、利用尿素固体培养基，由于不能利用尿素做氮源的微生物不能生长繁殖，而保留利用尿素的微生物，并非杀死，A错误；B、不同的微生物所需的pH不同，所以配置培养基时应根据微生物的种类调整培养基的pH，B正确；C、酵母菌不能直接利用淀粉，应用酒曲中的根霉和米曲霉等微生物把淀粉糖化，再用酵母菌发酵得到糯米酒，C正确；D、醋化醋杆菌在有氧条件下利用酒精产生醋酸，D正确。故选A。3（2020年江苏省高考生物试卷16）甲、乙两个实验小组分别进行了“酵母细胞固定化技术”的实验，结果如下图所示。出现乙组实验结果的原因可能为（ ）ACaCl2溶液浓度过高B海藻酸钠溶液浓度过高C注射器滴加速度过
5、慢D滴加时注射器出口浸入到CaCl2溶液中【答案】B【解析】【分析】一、海藻酸钠溶液固定酵母细胞的步骤：1、酵母细胞的活化 2、配制005mol/L的CaCl2溶液 3、配制海藻酸钠溶液 （该实验成败的关键步骤） 4、海藻酸钠溶液与酵母细胞混合 5、固定化酵母细胞二、固定化细胞制作过程中的注意事项：（1）酵母细胞的活化；（2）配置氯化钙溶液：要用蒸馏水配置；（3）配制海藻酸钠溶液：小火、间断加热、定容，如果加热太快，海藻酸钠会发生焦糊；（4）海藻酸钠溶液与酶母细胞混合：冷却后再混合，注意混合均匀，不要进入气泡；（5）制备固定化酵母细胞：注射器高度适宜，并匀速滴入；（6）刚溶化的海藻酸钠应冷却后
6、再与酵母菌混合，否则温度过高会导致酵母菌死亡。【详解】A、CaCl2溶液浓度过大，会导致凝胶珠硬度大，易开裂；A错误；B、海藻酸钠溶液浓度过高会导致凝胶珠呈蝌蚪状，B正确；C、注射器滴加速度过快会导致凝胶珠呈蝌蚪状，C错误；D、注射器离液面过近会导致凝胶珠呈蝌蚪状，而非注射器口侵入到CaCl2溶液中，D错误故选B。4（2020年江苏省高考生物试卷18）某同学在线提交了在家用带盖玻璃瓶制作果酒和果醋的实验报告，他的做法错误的是（ ）A选择新鲜的葡萄略泇冲洗，除去枝梗后榨汁B将玻璃瓶用酒精消毒后，装满葡萄汁C酒精发酵期间，根据发酵进程适时拧松瓶盖放气D酒精发酵后去除瓶盖，盖一层纱布，再进行醋酸发酵
7、【答案】B【解析】【分析】果酒与果醋制作原理与发酵条件的比较：果酒制作果醋制作菌种酵母菌醋酸菌菌种来源附着在葡萄皮上的野生型酵母菌变酸酒表面的菌膜发酵过程有氧条件下，酵母菌通过有氧呼吸大量繁殖：C6H12O66O26CO26H2O；无氧条件下，酵母菌通过无氧呼吸产生酒精：C6H12O62C2H5OH2CO2氧气、糖源充足时：C6H12O62O22CH3COOH2CO22H2O；缺少糖源、氧气充足时：C2H5OHO2CH3COOHH2O温度一般酒精发酵1825，繁殖最适为20左右最适为3035气体前期：需氧，后期：无氧需要充足的氧气时间1012天78天【详解】A、选择新鲜的葡萄洗1到2次，除去枝
8、梗后榨汁，A正确；B、葡萄汁不能装满，需装至玻璃瓶的2/3空间，B错误；C、酒精发酵期间会产生二氧化碳，故需适时拧松瓶盖，防止发酵瓶爆裂，C正确；D、醋酸菌是好氧菌，故醋酸发酵时应去除瓶盖，加一层纱布，D正确。故选B。5（2020年江苏省高考生物试卷19）为纯化菌种，在鉴别培养基上划线接种纤维素降解细菌，培养结果如图所示。下列叙述正确的是（ ）A倒平板后需间歇晃动，以保证表面平整B图中、区的细菌数量均太多，应从区挑取单菌落C该实验结果因单菌落太多，不能达到菌种纯化的目的D菌落周围的纤维素被降解后，可被刚果红染成红色【答案】B【解析】【分析】分析平板结果可知，采用的接种方法为平板划线法，且划线顺
9、序是区、区、区，可以看到区中出现了单菌落。【详解】A、倒平板后无需晃动，A错误；B、区、区没有出现单菌落，说明细菌数量太多，故应从区挑取单菌落，B正确；C、出现单菌落即达到了菌种纯化的目的，C错误；D、刚果红是一种染料，它可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物，但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应，D错误。故选B。6（2020年全国统一高考生物试卷（新课标)37）某种物质S（一种含有C、H、N的有机物）难以降解，会对环境造成污染，只有某些细菌能降解S。研究人员按照下图所示流程从淤泥中分离得到能高效降解S的细菌菌株。实验过程中需要甲、乙两种培养基，甲的组分为无机盐、水和S，乙的组分为
10、无机盐、水、S和Y。回答下列问题：（1）实验时，盛有水或培养基的摇瓶通常采用_的方法进行灭菌。乙培养基中的Y物质是_。甲、乙培养基均属于_培养基。（2）实验中初步估测摇瓶M中细菌细胞数为2107 个/mL，若要在每个平板上涂布100L稀释后的菌液，且保证每个平板上长出的菌落数不超过200个，则至少应将摇瓶M中的菌液稀释_倍。（3）在步骤的筛选过程中，发现当培养基中的S超过某一浓度时，某菌株对S的降解量反而下降，其原因可能是_（答出1点即可）。（4）若要测定淤泥中能降解S的细菌细胞数，请写出主要实验步骤_。（5）上述实验中，甲、乙两种培养基所含有的组分虽然不同，但都能为细菌的生长提供4类营养物质
11、，即_。【答案】（1）高压蒸汽灭菌 琼脂 选择 （2）104 （3）S的浓度超过某一值时会抑制菌株的生长 （4）取淤泥加入无菌水，涂布（或稀释涂布）到乙培养基上，培养后计数 （5）水、碳源、氮源和无机盐 【解析】【分析】培养基一般含有水、碳源、氮源、无机盐等。常用的接种方法：平板划线法和稀释涂布平板法。常用的灭菌方法：干热灭菌法、灼烧灭菌法、高压蒸汽灭菌法。【详解】（1）常用高压蒸汽灭菌法处理盛有水或培养基的摇瓶，乙为固体培养基，故需要加入Y琼脂；甲和乙培养基可以用于筛选能降解S的菌株，故均属于选择培养基。（2）若要在每个平板上涂布100L稀释液后的菌液，且每个平板上长出的菌落数不超过200个
12、，则摇瓶M中的菌液稀释的倍数至少为21071000100200=1104倍。（3）当培养基中的S超过某一浓度后，可能会抑制菌株的生长，从而造成其对S的降解量下降。（4）要测定淤泥中能降解S的细菌的细胞数，可以取淤泥加无菌水制成菌悬液，稀释涂布到乙培养基上，培养后进行计数。（5）甲和乙培养基均含有水、无机盐、碳源、氮源。【点睛】培养基常用高压蒸汽灭菌法进行灭菌，接种工具应该进行灼烧灭菌，玻璃器皿等耐高温的、需要干燥的物品，常采用干热灭菌。7（2020年全国统一高考生物试卷（新课标)37）研究人员从海底微生物中分离到一种在低温下有催化活性的-淀粉酶A3，并对其进行了研究。回答下列问题：（1）在以淀
13、粉为底物测定A3酶活性时，既可检测淀粉的减少，检测应采用的试剂是_，也可采用斐林试剂检测_的增加。（2）在A3的分离过程中可采用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测其纯度，通常会在凝胶中添加SDS，SDS的作用是_和_。（3）本实验中，研究人员在确定A3的最适pH时使用了三种组分不同的缓冲系统，结果如图所示。某同学据图判断，缓冲系统的组分对酶活性有影响，其判断依据是_。（4）在制备A3的固定化酶时，一般不宜采用包埋法，原因是_ （答出1 点即可）。【答案】（1）碘液 还原糖（或答：葡萄糖） （2）消除蛋白质所带净电荷对迁移率的影响 使蛋白质发生变性 （3）在pH相同时，不同缓冲系统条件下所测得的相对酶活性不
14、同 （4）酶分子体积小，容易从包埋材料中漏出 【解析】【分析】SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳原理：在离子强度低时，主要以单体形式存在的SDS可以与蛋白质结合，生成蛋白质-SDS复合物。由于SDS带有大量负电荷，复合物所带的负电荷远远超过蛋白质原有的负电荷，这使得不同蛋白质间电荷的差异被掩盖。而SDS-蛋白质复合物形状都呈椭圆棒形，棒的长度与蛋白质亚基分子量有关，所以在SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳中蛋白只存在分子大小的差别，利用这一点可将不同的蛋白质分开 （分子筛效应），因此SDS-PAGE常用于检测蛋白质亚基的分子量及鉴定纯度。【详解】（1）测定酶活性时，可以通过检测反应物的减少或生成物的增加来反映酶活性，所以可以用碘液检测淀粉的减少，也可用斐林试剂检测还原糖（或葡萄糖）的增加。（2）鉴定蛋白质纯度常用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳法，凝胶中加入SDS可以消除蛋白质所带净电荷对迁移率的影响，并使蛋白质发生变性。（3）分析题中曲线可知，在pH相同时，不同缓冲系统条件下所测得的相对酶活性不同，可推测缓冲系统的
