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1、精品文档组织培养模拟试卷A 卷（理论部分）一、填空题：（每空1.5 分，共 33 分）1、植物组织培养根据培养方式不同可以分为_和 _ 。2、愈伤组织的器官发生顺序有四种情况，分别为无芽的根或无根的芽_、_ 、_ 、_ 。3、对植物组织培养的培养基灭菌时，一般情况采用的条件是_温度，保持时间是_ 。4、在培养基中，蔗糖的主要作用是_ 、_ 和 _ 。5、原生质体融合中，_的原理是利用交变电场，脉冲电压来促进细胞融合的。6、 _是指用一块活跃生长的愈伤组织块来看护单个细胞，并使其生长和增殖的方法。7、动物细胞体外培养主要包括_ 、 _和 _ 三大类。8、动物细胞培养时生长曲线分为、_ 、_ 、
2、_和_ 四个时期。9、植物花粉培养时，处于_ 时期的花粉比较容易成功。10、细胞同步化的方法主要有_ 和 _ 。二、名词解释：（每题4 分，共 20 分）1、 细胞全能性：2、 原生质体：3、 callus：4、 人工种子：5、 褐变：三、判断题：（判断改正，请把错误的改正过来；本题共6 小题，每题2 分，共 12 分；只判断不改正，本小题得 0.5 分）1、 玻璃化现象的产生主要是细胞生长过程中环境因素的变化引起的。2、 植物生长素主要促进侧芽萌发生长，细胞分裂素则重要促进生根，有保鲜效果。3、 组织培养植株再生途径有两条：一是体细胞胚胎发生，另一个是愈伤组织发生。4、 动物细胞体外培养的基
3、本过程是：从有机体取得材料 切碎或酶解 原代培养 传代培养。5、 植物脱毒技术就是把植物体内所有病毒都杀死，形成不含任何病毒的植株的技术。6、 冷冻保存种质资源时，慢速冷冻法适用于含水量较高，细胞中含有大液泡的材料。四、简答题：（本题共 3 小题，共 20 分）1、简述细胞融合的基本过程。（5 分）2、概述无菌操作基本过程。（7 分）3、简述人工种皮的特点和使用人工种子的意义。（8 分）五、分析题：（ 15 分）举例试述杂交瘤技术生产单克隆抗体的原理和技术过程（必要时，可以附带图示）。组织培养模拟试卷 B 卷（实验操作部分）一、填空题：1、培养基母液配制时，植物激素一般配制成浓度为_ mg/m
4、l 的溶液，贮存在 _下备用。2、分装好的培养基置于高压蒸汽灭菌锅中灭菌，灭菌条件为温度_ ，压力 _。3、不同培养基有不同的特点。MS 培养基的特点是 _；White 培养基特点是 _；N6 培养基的特点是 _ 。4、外植体的选择是组织培养培养的关键环节之一，一般选择的原则是优良的种质_ 、_ 。5、培养基中使用的糖源一般是蔗糖，其浓度为_ 左右。叶片组织接种后于_条件下培养，每天光照 1214h，光照度约为 _ 。二、简述题：.精品文档1、外植体灭菌消毒步骤。2、无菌操作过程。3、以 MS 培养基为例，简述配制过程。一、填空题：1、固体培养、液体培养2、先芽后根、先根后芽，根芽同时生长3、
5、 121， 15 30min4、调节渗透压、提供碳源、提供能源5、电融合6、看护培养7、细胞培养、组织培养、器官培养8、潜伏期、指数生长期、平台期、衰退期9、单核期10、分离同步化、诱导同步化二、名词解释：1、细胞全能性：生物体的每一个细胞都携带有一套完整的基因组，并具有在一定条件下能够发育成完整个体的潜在能力。2、原生质体：指用特殊的方法脱去植物细胞壁的、裸露的、有生活力的原生质团。3、 callus：即愈伤组织，指脱分化后的细胞，经过细胞分裂形成一团无特定结构和功能的松散的薄壁细胞团。4、人工种子： 指植物离体培养中产生的胚状体或不定芽包裹在含有养分和保护功能的人工胚乳和人工种皮中所形成的
6、能发芽出苗的颗粒体。5、褐变：指外植体在培养过程中体内的多酚氧化酶被激活，使细胞里的酚类物质氧化成棕褐色的醌类物质，这种致死性的褐化物向外扩散使培养基变色，同时抑制其他酶的活性，严重影响外植体的脱分化和器官分化，最后褐变死亡的现象。三、判断题：1、对。2、错前者促进生根，后者促进侧芽生长和保鲜效果。3、错器官发生。4、对。5、错不含主要病毒的苗木称为无毒苗。6、对四、简答题：1、细胞融合过程：答：基本过程是：a、细胞在诱融剂或正弦电场作用下凝集，彼此靠近；b、两个相邻细胞之间的质膜相互融合，随后两个亲本细胞质膜上的受体、糖蛋白、糖脂等质膜成分也在融合后的质膜上重新分布；c、细胞质发生融合；d、
7、细胞核的融合，形成单核融合细胞。2、无菌操作a、用水和肥皂洗净双手，穿上灭菌过的专用实验服、帽子鞋子，进入接种室；b、打开超净工作台和无菌操作室的紫外灯，照射20min ；c、操作前 10min 使超净工作台处于工作状态，让过滤室空气吹拂工作台面和四周台壁；d、照射 20min 后，关闭紫外灯，用 70%的酒精擦拭工作台和双手；e、用蘸有70%酒精的纱布擦拭有培养基的培养器皿，放进工作台；f 、把解剖刀、剪刀、镊子等浸泡在95%酒精中，在火焰上灭菌后，放在器械架上；.精品文档g、灭菌材料；，打开培养瓶，火烧瓶口，接种；h、接种结束后，清理和关闭超净工作台。3、人工种皮特点： 1、对胚状体或芽无
8、毒害； 2、柔软且有一定的机械抗压能力； 3、能保持一定水分及营养物质； 4、允许种皮内外气体交换通畅，不影响胚萌发突破，播种后易于化解。意义： 1、人工种子结构完整，体积小，便于贮藏和运输，可直接播种，易于机械化操作；2、不受季节限制，不受环境制约，胚状体数量多、繁殖快、有利于工厂化生产；3、有利于繁殖生育周期长、自交不亲合、 珍贵稀有的一些植物， 也可以大量繁殖无病毒材料； 4、可在人工种子中加入抗生素、 菌肥、农药等成分，提高种子活力和品质； 5、体细胞胚由无性繁殖体系产生，可以固定杂交优势。五、单克隆抗体原理：正常 B 淋巴细胞不能在体外培养条件下长期生存，因而不能在体外持续产生抗体，
9、而骨髓瘤细胞可以在体外快速生长，但不能分泌抗体，但是，若把二者在体外结合，获得杂交瘤细胞，使杂交瘤细胞既具有B 淋巴细胞分泌抗体的能力，又具有骨髓瘤细胞能够在体外长期快速生长的特性。步骤要点： 1、致敏 B 淋巴细胞和骨髓瘤亲本细胞的制备；2、B 淋巴细胞与骨髓瘤细胞的融合（一般5：1）；3、杂交瘤细胞的筛选；4、可分泌特异性单抗的杂交瘤细胞的筛选；5、杂交瘤细胞的克隆化培养； 6、单克隆抗体的生产和纯化。模拟试卷B 卷（实验操作部分）一、填空题1、 0.11.0，2 42、 121， 1.1kg/cm23、无机盐浓度高，无机盐浓度低，KNO3 和（ NH4 ） SO4 含量高，不含钼4、健壮
10、的植株、最适时期，最佳大小5、 3%，2528， 15002000lx二、简述题1、外植题灭菌消毒步骤：先用流水冲洗10 20min 或更长时间，然后在70%酒精中浸泡30s，再立刻放入0.1% 0.2%氯化汞液中浸泡 10min 左右或在 10%的次氯酸钠、饱和飘白粉浸泡30min 左右，然后再用蒸馏水冲洗4 5 次，即可。2、无菌操作过程：(1)实验前，无菌室及无菌操作台用紫外灯照射40min 灭菌，用70%酒精擦拭无菌操作台面，并开启无菌操作台风机运转10min 后，才可开始实验操作。实验结束后，将实验物品带出工作台。如需要继续进行下一个实验， 则用 70% 酒精擦拭无菌操作台面，再让无
11、菌操作台风机运转10min 后，才可进行下一个实验操作。(2)无菌操作工作区域应保持清洁与宽敞，必要物品如试管架、移液器或吸管头等可以暂时放置，其它实验用品用完后应及时移出，以利气体流通。实验用品要用70%酒精擦拭后才能带入无菌操作台内。实验操作应在操作台中央无菌区域内进行，勿在边缘非无菌区域操作。(3)小心取出无菌实验用品，避免造成污染。切勿碰触吸管与吸头头部或容器瓶口，不要在打开的容器正上方操作实验。 容器打开后， 用手夹住瓶盖并握住瓶身倾斜约45角取用， 尽量勿将瓶盖盖口朝上放在台面上。(4)工作人员应注意自身的安全，必须穿戴实验衣与手套后才进行实验。操作过程中，应避免引起气溶胶的产生，
12、小心有毒性试剂，并避免尖锐物品伤人等。(5)定期检查下列项目 :无菌操作台内气流压力是否正常， 定期更换紫外灯管及 HEPA 过滤器滤膜， 预滤网。.精品文档3、培养基配制过程：a、取规定数量的糖源和凝固剂置于烧杯或搪瓷锅内，加蒸馏水或去离子水至培养基最终体积的3/4，在恒温水浴中加热使之溶解，并不断搅拌，防止琼脂凝块儿。配制液体培养基时因不含凝固剂，无须高温加热。b、根据计算所需量依次加入大量元素、微量元素、铁盐、有机物、生长调节物质母液及其他特殊的附加物，搅拌均匀。吸取各种母液的移液器应专用，以免产生交叉感染。对高温高压条件下不稳定或容易分解的植物生长调节物质必须在培养基进行高温高压灭菌后
13、，用过滤的方法加入。c、加水定容至规定体积，搅拌均匀。在标准温度下将培养基定容后进行称量，并以此质量为标准进行较高温度的培养基的定容。d、调整培养基的pH 值。一般采用1mol/LNaOH 与 1mol/LHCl来调整其pH 值。e、分装。已经配制好的培养基应尽快的分装，以防止含琼脂的培养基在较低温度下凝固。分装时应注意到培养基占该容器的 1/31/4 为宜。f 、封口。培养基分装后，应立刻用封口膜将容器口部封严。封口膜应具有透光、透气性，但不通透尘埃、微生物等杂质。植物组织培养复习材料一、名词解释。、植物组织培养：植物的离体器官、组织或细胞在人工制备的培养基上进行无菌培养，并在人工控制的环境条件下，使其发育成完整植株的科学技术。简称组培。、脱分化：指失去分裂能力的细胞回复到分生性状态并进行分裂，形成无分化的
