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1、深低温冷冻异体肌腱移植的组织学和生物力学研究 作者：徐光辉，孙康，徐强，盖鹏宙，孙洪亮【摘要】 目的探讨深低温冷冻同种异体肌腱替代自体肌腱进行移植治疗肌腱缺损的可行性及移植后异体肌腱的形态学和生物力学性能的动态变化。方法采用兔跟腱缺损修复模型，经深低温冷冻的同种异体跟腱为实验组，自体跟腱移植为对照组，分别在术前及术后2、4、8周时对实验组同种异体跟腱及对照组自体跟腱进行大体观察、组织学检查和生物力学测试。结果同种异体跟腱与自体跟腱在移植前和移植后2、4、8周时其大体观察、组织学检查和生物力学测试等各项指标均无明显差异，显示同种异体跟腱和自体跟腱有相类似的结构及愈合过程。另外，同种异体跟腱在移植
2、后其力学性能（除衰竭应变外）均比移植前明显降低。随时间推进有上升的趋势，但8周时仍明显低于移植前水平。结论深低温冷冻同种异体肌腱可替代自体肌腱应用于移植修复肌腱缺损。同时，由于移植后肌腱力学性能明显下降，需给予适当保护，防止过度牵拉而导致衰竭。 【关键词】 肌腱; 同种异体移植; 深低温冷冻; 组织学； 生物力学 Abstract：ObjectiveTo explore the allograft, as a substitute for autograft, whether can be used to repair the defect of the tendon and restore
3、the stability of joint and the dynamic biomechanical changes of allograft after transplantation.MethodDeepfrozen allogeneic achilles tendons of rabbits were used as treatment group, and autogenous ones as control. The achilles tendon defects of back limbs were repaired by allograft and autograft sep
4、arately. The macroscopic, microscopic observation and biomechanical test were performed on both of them before transplantation and in 2, 4 and 8 weeks after transplantation.ResultIt was showed that there were no differences in macroscopy, microscopy and mechanical strength between allograft and auto
5、graft both before and after transplantation. They may have experienced the similar healing course. The mechanical strength of allograft (except failure strain) was reduced significantly after transplantation. But it had a rising trend with time passing, although it was fairly low in 8 weeks compared
6、 with the normal such as maximum load.ConclusionThe results demonstrate that the deepfrozen allograft can substitute for autograft in repairing the tendon defect, and because of the weakness of allograft after transplantation, it needs appropriate protection to prevent failure by excessive strain in
7、 early stage. Key words：tendons; homologous transplantation; deepfrozen; histology; biomechanics 肌腱韧带损伤是骨科常见疾病，治疗中经常需要应用肌腱移植来修复肌腱缺损，重建关节的稳定性等。同种异体肌腱作为自体肌腱的替代，来源广泛，经深低温冷冻处理后其抗原性大大降低，并可长期保存，在此基础之上建立深低温肌腱库，可为临床修复重建提供大量方便实用的移植材料1。本实验对深低温冷冻异体跟腱移植修复跟腱缺损进行组织学和生物力学的研究，以明确异体肌腱替代自体肌腱的可能性和相关的组织学及生物力学变化。 1 材料和方
8、法 1.1 仪器和设备 86深低温冷冻冰箱（美国Forma Scientific） DCS25T电子万能试验机和3033型函数记录仪（烟台大学提供） 1.2 动物分组 由烟台绿叶制药实验动物中心提供健康成年新西兰兔27只，均为雄性，体重1.82.2 kg，平均2 kg。随机分为2组，1组为供腱组，共9只，用于提供移植用异体跟腱；另1组为移植组，共18只，进行移植实验。 1.3 深低温冷冻同种异体肌腱的制备 取供腱组兔9只，用3戊巴比妥钠溶液30 mg/kg体重行耳缘静脉麻醉，严格无菌操作，将双侧跟腱切下（上至腱腹交界处，下至止点上5 mm，长度约34 cm），共取跟腱18条。生理盐水冲洗后放入
9、无菌聚乙烯袋中密封包装，普通冰箱中（20）6 h后置入深低温冰箱（75）冷冻2周即可应用。使用前室温下缓慢复温12 h，30生理盐水5 min即可。 1.4 手术方法 取行移植术的兔共18只，一侧跟腱切下后的缺损采用深低温冷冻异体跟腱移植修复，另一侧缺损由所切下的对侧的新鲜自体跟腱移植修复作为对照。哪侧为异体移植组随机选取，术后做好标记。术后双后肢行40半屈曲位石膏管型固定。取手术切下的新鲜跟腱6根立即行组织学检查和力学测试，另取6根按前法冷冻处理后也行组织学检查和力学测试。 1.5 术后处理 所有动物均在烟台绿叶制药实验动物中心按标准饲养，昼夜正常规律。术后未发现动物不明原因死亡、伤口感染、自残、跖底溃疡及石膏外固定脱落等现象。术后满3周后去除石膏外固定，任其自由活动。在术后2、4、8周时，分别随机取6只移植组动物用于观察实验结果。 1.6 实验观察指标 1.6.1 大体观察 包括兔的行走情况、双后肢的活动幅度、肌力及肌腹肌腱骨的连续性和移植跟腱及其吻合口的形态学的肉眼观察结果。 1.6.2 组织学检查 标本取自新鲜跟腱、未移植的深低温冷冻跟腱和移植后不同时期的自体及异体跟腱，及移植后8周时自体及异体跟腱吻合处组织，行病理切片，HE染色，观察不同时期和不同种类的跟腱及8周时吻合口的组织学变化。 / 文档可自由编辑打印
