《紫外可见分光光度法实验》由会员分享，可在线阅读，更多相关《紫外可见分光光度法实验（2页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、1.实验目的1.1 了解紫外可见分光光度计的食用方法及基本结构1.2 掌握用紫外可见分光光光度法进行定性分析和定量分析的方法2. 实验原理2.1 定性分析 不同物质的分子结构不同，因此各种物质各有其特征的紫外可见光吸收光谱。以波长为 横坐标，吸光度为纵坐标作图，得到的曲线称为吸收光谱曲线，他能清楚的描述该物质对不 同波长光的吸收情况。光吸收程度最大处叫做最大吸收波长，用入max表示。浓度不同时， 光吸收曲线的形状相同，最大吸收波长不变，只是相应的吸光度大小不同。说明吸收曲线的 形状只与物质的本性有关，而与物质的浓度无关。因此，我们可以利用吸收曲线对物质进行 定性分析。2.2 定量分析根据朗伯-
2、比尔定律：A= be,式中A吸光度，& 摩尔吸光系数，b液层厚度cm, c浓度，mol/L当液层厚度b固定时，吸光度正比于浓度，因此可采用标准曲线法对物质进行定量分析。 通常选择最大吸收波长进行定量分析，以提高分析灵敏度和消除干扰影响。3.仪器及试剂3.1 仪器及配件UV1800PC型紫外可见分光光度计，1cm石英比色池3.2 试剂3.2.1 虾青素标准溶液3.2.1.1标准储备液（浓度为1.0mg/mL）称取10mg虾青素标准品溶于二甲基亚砜（DMSO）,定容至10mL，摇匀，避光-20C 保存。3.2.1.2 标准系列溶液的配制用移液管分别量取0.5，1.0，2.0，3.0mL标准储备液，
3、分别用50mL容量瓶定容，稀释 溶剂为无水乙醇，定容之后摇匀，避光放置。3.2.2 未知浓度的虾青素样品溶液。4. 实验内容4.1 不同浓度的虾青素溶液吸收曲线的比较。4.2 标准曲线的制作。4.3 样品溶液的测定。5. 仪器操作步骤5.1 开机，自检，预热20分钟5.2 放置样品 将配好的样品转入比色池，比色池要用蒸馏水和待测溶液润洗，溶液装至比色池的1/22/3 左右。装好后用纸巾吸干比色池表面的液体，将比色池放入样品槽中，注意比色池 透光面要对住样品槽有孔的一边。5.3 全波长扫描 将不同浓度的标准品依次转入比色池中进行全波长扫描，比较其吸收曲线和最大吸收峰 对应的波长。5.4 制作标准曲线 取不同浓度的标准品最大吸收波长处的吸光值绘制标曲。5.5 样品浓度的测定6. 注意事项6.1 拿比色池要拿毛玻璃面，放置比色池要使毛玻璃面向下，以免影响透光面的透光性。6.2 比色皿按材质分为几种，使用时需根据样品的性质选择不同材质的，石英比色池价格昂 贵，要小心使用。7.实验报告内容：1）目的2）原理3）简单操作步骤4）实验结果（全波长扫描图、标准曲线、样品浓度的计算，定性定量依据）5）注意事项（就自己的学习和体会写几点）
