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1、医院检验中心嗜酸性粒细胞直接计数操作规程标本EDTA-K2 10ul抗凝静脉血1ml原理手工法 血液中嗜酸性粒细胞在含有伊红的低渗溶液中被染成红色，而红细胞及其他白细胞破裂或溶解。仪器法（VCS原理）试剂手工法嗜酸性粒细胞直接计数的稀释液种类较多，各有一定的 优缺点，尚待大家继续实验，找出最佳配方。下列3种稀释液供参考。1. Hinkelmann 液伊红0. 2g95%石炭酸0. 5m1 40% 甲醛 0. 5ml蒸馏水力口到100m12 .乙醇一伊红稀释液90% 乙醇 30ml 甘油10ml碳酸钾lg枸橼酸钠0.5g20g几伊红液10ml蒸馏水加至100m1本配方背景清晰，嗜酸性粒细胞着色鲜
2、明，缺点是含10%甘油，比较粘稠，细胞不易混匀，故计数前必须充 分振摇。3 .伊红一丙酮稀释液20g/L伊红液5mI丙酮5mI 蒸馏水90ml新鲜配制效果好，每周配1次。仪器法COULTER HMX五分类血细胞仪及专用试剂操作手工法1 .小试管中加稀释液0.38mI。2. 常法取末梢血20p 1，加入管内混匀，待红细胞溶 解后两侧充池。3 .静置35min，用低倍镜(必要时用高倍镜)镜下计 数10个大方格内嗜酸性粒细胞数。仪器法操作同血常规计算10个大方格内嗜酸性粒细胞数X20X 10 =嗜酸性粒细胞/L参考值(50-300)X 106 / L(50-300 / p l)附注l. 血液稀释后应于1h内计数完毕，否则嗜酸性粒细胞会逐渐被破坏，使结果偏低或不易辨认。2. 充池前要充分混匀，但又不宜用力过猛，特别是使用 含甘油的稀释液要适当延长混匀时间。3. 注意与中性粒细胞区别，以免误认，中性粒细胞一般 不着色，但也有着浅红色的，其颗粒较小。4. 住院病人采标本时间力求统一，以免受日间生理变化 的影响。5. 用白细胞总数与分类百分率求得的绝对值不如直接计 数结果准确。临床意义1. 直接计数主要用于观察传染病预后、手术和烧伤病人 的预后及测定肾上腺皮质功能。2. 其他变化的临床意义同白细胞分类计数中嗜酸性粒细胞的增减。
