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1、实验十二消化实验家兔离体小肠平滑肌生理特性 目的要求 1 、学习离体肠段平滑肌的实验方法。2 、了解肠段平滑肌的生理特性。 基本原理 哺乳动物消化管平滑肌与肌肉组织共有的特性， 如兴奋性、 传导性和收缩性 等。但消化管平滑肌又有其特点，即兴奋性较低，收缩缓慢，富有伸展性，具有 紧张性、自动节律性，对化学、温度和机械牵张刺激较敏感等。这些特性可维持 消化管内一定压力， 保持胃肠等一定的形态和位置， 适合于消化管内容物的理化 变化，在体内受中枢神经系统和体液因素的调节。 将离体组织器官置于摸拟体内 环境的溶液中， 可在一定时间内保持其功能。 本实验以台式液作灌流液， 在体外 观察及记录哺乳动物离体
2、肠段的一般生理特性。 动物与器材 兔、恒温平滑肌槽、支架、烧杯、 20ml 注射器、张力传感器、生物机能 实验系统、温度计、台式液、肾上腺素（ 1：10000）、乙酰胆碱（ 1：10000）、 阿托品针剂（ 1 支）。 方法与步骤 1、装好实验装置，平滑肌槽恒温调至 37C。2 、制备离体兔肠段用木槌猛击兔后头延髓部，致其昏迷后立即剖开腹腔，找到胃幽门与十 二指肠交界处。在十二指肠起始端扎一线， 取出十二指肠、空肠 、放入冷台式液 内。先用20ml注射器冲洗内容物，冲洗干净后剪成若干约1.5cm长的小肠段（每 一实验小组一段） 在其两端结扎， 一端做一短线环固定在通气的浴皿内， 另一端 扎线与
3、张力传感器相连。 将肠段完全浸浴在调好温度的平滑肌槽中 ，并调整好台 式液充气量（小气泡接连不断）。3、开启生物机能实验系统，接通与张力传感器相连的通道。固定管并调节扎 线与张力传感器， 使肠段运动自如又能牵动传感器 （注意： 扎线不可贴壁或过紧 过松）。调节增益与扫描速度， 使肠段的运动曲线清晰地显示在显示器上并记录 肠段活动曲线。4、实验观察（ 1 ）记录对照肠段运动曲线后，停止供气 1 分钟并记录曲线变化，同时观察 肠段紧张度变化。当出现明显变化后，立即恢复供气。用新鲜 37C台式液冲洗， 待恢复正常（注意作好标记）(2) 记录对照肠段运动曲线后，加入 25C台式液，并记录曲线变化，同时
4、 观察肠段紧张度变化。同法，当出现明显变化后，立即用 37 C台式液冲洗，待 恢复正常。(3) 同法加入45C台式液并记录曲线变化，同时观察肠段紧张度变化。当出现明显变化后，立即用新鲜 37 r台式液冲洗并待恢复。由于以上流出液中未加入药物，可以回收使用。以下加入药物的流出也 不可再用。(4) 同法，加入 2 滴肾上腺素( 1：10000)，观察并记录曲线变化。(5) 同法加入12滴乙酰胆碱(1: 10000),观察并记录曲线变化。( 6)加入 3 滴阿托品后立即加入于( 5)同样剂量的乙酰胆碱，记录并观察 曲线变化。同( 5)比较曲线有何不同。注意：1加药前必须准备好更换用的37C台式液。上
5、述药物剂量只是参 考，效果不明显可补加， 每次加药出现效果后， 必须立即更换浴槽内的台式液并 冲洗 3 次，待肠肌恢复正常后在观察下一项目。浴槽内台式液要保持一定温度。2 游离及取出肠段时，动作要快，取兔肠及兔肠穿线时尽可能不用金 属及手指触及。为保持离体肠段的活性，可先预冷充氧的营养液，游离肠段 及穿线在预冷的营养液中进行。实验中始终通气。 思考题 1、本实验是否可用麻醉动物的肠段？为什么？麻醉状态影响肠段细胞的反应性以及对药物的敏感度2、进行哺乳动物离体组织器官实验时，需控制哪些条件？ 温度：本实验控制恒定温度 37 度湿度：要时刻记住用相应的润湿液润湿，本次试验用哺乳 动物的台氏液 PH
6、 ：要与哺乳动物体液相似避免不必要的刺激：不要用手或者是金属触碰离 子成分与浓度：要与相关的动物体液相似，本实验是台氏液3、为什么加入各种药物会引起离体肠段活动的变化？其机理是什么？adr对其是抑制作用可见离体肠管活动减弱，描记曲线出现收缩频率变慢，幅度减小以及基线下移 ach 是促进作用， 可见离体肠管活动增强， 描记曲线出现收缩频率变快，幅度增加。出现上述现象的机理， 与消化道平滑肌细胞产生动作电位的离子基础是Ca2的内流有关。阿托品是 ach 的阻断剂。所以两者加入个观察到曲线无明显变化。 阻断乙酰胆碱与肌膜上的M受体结合。HCL离体肠管活动减弱，描记曲线出现收缩幅度降低，频率变慢。H+
7、升高能干扰肌肉的代谢和肌丝滑行的生化过程： H+能与Ca2+竞争钙调蛋白的结合位点而使肌球蛋白ATP酶活性降低；使肌原纤维对Ca2+的敏感性和Ca2+从肌质网的释放量减少。加了 NAO肠管活动增强。中和了 H离子改变了细胞 外液的PH值所以恢复正常4、加入阿托品后再加入乙酰胆碱，肠段活动受到抑制，为什么？ 这两种药对肠道平滑肌的作用正好相反， 乙酰胆碱能促进肠道平滑肌蠕动， 阿托 品是胆碱能神经阻断剂， 能抑制肠道平滑肌蠕动。 两药同时使用， 阿托品阻断了 乙酰胆碱的作用，所以表现出肠道活动受到抑制。5 、根据实验结果，说明平滑肌的生理特性消化管平滑肌又有其特点， 即兴奋性较低， 收缩缓慢，富有伸展性，具有紧张性、 自动节律性， 对化学、温度和机械牵张刺激较敏感等。 这些特性可维持消化管内 一定压力， 保持胃肠等一定的形态和位置， 适合于消化管内容物的理化变化， 在 体内受中枢神经系统和体液因素的调节。 将离体组织器官置于摸拟体内环境的溶 液中，可在一定时间内保持其功能。
