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1、小鼠白介素ELISA试剂盒说明书，小鼠白介素6 （IL-6 酶联分析检测ELISA试剂盒国内权威的科研试剂供应商，乔羽生物专业经营进分装和原装、国产的Elisa试剂盒，品 质保证，技术严格，无效果退款退货。Elisa kit规格：48孔配置/96孔配置标准品稀释液：1.5ml X 1瓶酶标试剂：3 mix 1 瓶（48） /6 mlxl 瓶（96）本试剂仅供研究使用标本：血清或血浆上海乔羽生物专业供应：使用目的：本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本白介素6 （IL-6 含量。试验原理：IL-6试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知IL-6农度的标准品、未知浓度的样品加入
2、微孔酶标板内进行检 测。先将IL-6和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物， 然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中IL-C的浓度呈比例关系。试剂盒内容及其配制试剂盒成份（2-8C保存）96孔配置48孔配置配制96/48小鼠份酶标板1块板（96T）半块板（48T）即用型塑料膜板盖1块半块即用型标准品：80ng/ml1 瓶（0.6ml）1 瓶（0.3ml）按说明书进行稀稀空白对照1 瓶（1.0ml）1 瓶（0.5ml）即用型标准品稀释缓冲液1 瓶（5ml）1瓶（2.5ml）即用型生物素标记的抗il-6抗体
3、1 瓶（6ml）1 瓶（3.0ml）即用型亲和链酶素-HRP1瓶（10ml）1瓶（5.0ml）即用型洗涤缓冲液1瓶（20ml）1 瓶（10ml）按说明书进行稀释底物A1 瓶（6.0ml）1 瓶（3.0ml）即用型底物B1 瓶（6.0ml）1 瓶（3.0ml）即用型终止液1 瓶（6.0ml）1 瓶（3.0ml）即用型标本稀释液1 瓶（12ml）1 瓶（6.0ml）即用型自备材料1. 蒸馏水。2. 加样器：5u| 10ul 50u| 100u| 200u| 500u| 1000ul。3. 振荡器及磁力搅拌器等。安全性1. 避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。2. 实
4、验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。3. 不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。操作注意事项1. 试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。2. 实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。3. 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。4. 使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。5. 使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。6. 洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。7. 底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间
5、暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立 即读取0D值。8加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。9.按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。样品收集、处理及保存方法1、 血清-操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，lOOOXg离心10分钟将血清 和红细胞迅速小心地分离。2、 血浆-EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000Xg离心30分钟去除颗粒。3、细胞上清液一一-1000Xg离心10分钟去除颗粒和聚合物。4、 组织匀浆-将组织加入适量生理盐水捣碎。1000Xg离心10分钟，取上清液5、 保存如果样品不立即使用，应将其分
6、成小部分-70 C保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂 血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37C或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地 充分解冻。试剂的准备1. 标准品：标准品的系列稀释应在实验时准备，不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行：80 ng/ml（6号标准 品）原倍浓度不用稀释直接加入50ul。40 ng/ml（5号标准 品）100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液20 ng/ml（4号标准 品）100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液10 ng/ml（3号标准 品）100ul的4号标准品加入100ul的
7、标准品稀释液5.0 ng/ml（2号标准100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液品）2.5 ng/ml（1号标准 品）100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液0 ng/ml（空白对照）原始浓度不用稀释直接加入50u|2. 洗涤缓冲液（50x）的稀释：蒸馏水50倍稀释。操作步骤1. 使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。2. 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定, 能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1： 1稀释后加入50ul于反应孔内。3.
8、加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板， 轻轻振荡混匀，37C温育1小时。4. 甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤 次数增加一次。5. 每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37C温育30分钟。6. 甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤 次数增加一次。7. 每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37C温育10分钟。避免光照。8. 取出酶标板，迅速加入50ul终
9、止液，加入终止液后应立即测定结果。9. 在450nm波长处测定各孔的OD值。建议使用的实验方案浓/ml 品ng )fe( /度111!品!品!品!品!品11111!品!品!品!品!品1111111111局限6号标准品以上的结果为非线性的，根据此标准曲线无法得到精确的结果。白介素6 （IL-6） ELISA试剂盒性能1. 灵敏度：最小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。2. 特异性：不与其它细胞因子反应。3. 重复性：板内、板间变异系数均小于10%。结果判断与分析1、仪器值：于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值2、以吸光度OD值为纵坐标（
10、Y），相应的IL-6标准品浓度为横坐标（X），做得相应的曲线，样品的IL-6含量可根据其OD值 由标准曲线换算出相应的浓度。3、检测值范围:0-80ng/ml4、敏感度：0.1 ng/ml上海乔羽生物专业生产供应的试剂盒类产品有：双抗夹心ELISA检测、ELISA试 剂盒、小鼠ELISA试剂盒、酶联检测试剂盒、国产进口试剂、代测elisa试剂盒、 ELISA检测试剂盒、大鼠ELISA试剂盒、小鼠ELISA试剂盒、凋亡相关因子试剂 盒、白介素ELISA试剂盒、VIP ELISA kit等实验室产品，产品品质，质量保证。The performa nee of kit:1 sen si tivity
11、: min imum deteetion concen tra tion is less tha n 1 sta ndard. Lin earity of dilution. Sample linear regression and the expected concentration correlation coefficient R value is 0.990.2: no specific reac tion with other cytok in es.3 repeatability: plate, plate between the coefficients of variation
12、 were less than 10%.Huma n type III procollage n amino term inal pep tide ELISA kit steps:1 before use, all reage nts and mixing. Do not allow liquid to produce a large n umber of bubbles, so as to avoid add ing a large n umber of bubbles, result ing in the additi on of the error.2 accord ing to det
13、erm ine the n umber of sample n umber plus sta ndard strip n umber. Each sta ndard and bla nk hole is recomme nded to do the hole. Each sample can be made accord ing to its own qua ntity, and can be used as a hole in the hole.3 diluted after sta ndard 50ul in reac tion hole, added to the sample 50 U
14、L in reac tion hole to be measured. Immediately joined the 50 UL anti body bio tin. Cover the membra ne plate, gen tly oscilla ting mixing, 37 degrees Celsius for 45 minu tes.4 left hole liquid, each hole filled with wash ing liquid, oscilla ting 30 sec onds off the wash ing liquid, pat dry with absorbe nt paper. Repeat this opera tion 4 廿 mes. If the wash ing mach ine with wash ing, wash ing times in creased on ce.5 per hole add ing cha in affin ity en zyme -HRP 100ul, gen tly oscilla ting mixing, 37 degrees 30 minu tes in cuba tion.6 le
