《动物解剖生理实验指导.》由会员分享，可在线阅读，更多相关《动物解剖生理实验指导.（25页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、实验内 容实验一、显微镜的使用、组织切片的显微观测实验二、犬骨骼的观测、骨骼辨认测试实验三、血液的凝固实验四、红细胞的脆性实验实验五、蛙心活动观测实验六、红细胞计数实验七、反射弧分析及脊髓反射活动观测实验八、胃肠运动观测和小肠吸取观测实验一 显微镜的构造、使用和保养实验目的 理解显微镜的基本构造,掌握显微镜的使用措施和保养措施。材料设备 显微镜、组织切片、擦镜纸等。措施环节 （一)机械部分1、镜筒2、物镜转换器3、镜臂4、调焦器5、载物台6、镜柱7、镜座（二)光学系统部分光镜的光学系统重要涉及物镜、目镜和照明装置(反光镜、聚光器和光圈等）。1、目镜:常用的有、10和1(表达放大倍数）的目镜,可
2、根据不同的需要选择使用,最常使用的是10目镜。2、物镜:常用物镜的放大倍数有、40和0等几种。一般将8或10的物镜称为低倍镜（而将5如下的叫做放大镜)；将4或4的称为高倍镜；将9或100的称为油镜(这种镜头在使用时需浸在镜油中)。图1-3物镜的性能参数及工作距离C线为盖玻片的的上表面,10物镜的工作距离为7.63m；40物镜的工作距离为0.9mm；100.2、400.6、100/125表达镜头的放大倍数和数字孔径。160/.17表达镜筒长度为10mm,盖玻片厚度为7m。、聚光器：调节光线的强弱,升高聚光器可使光线增强，反之则光线变弱。光圈能控制进入聚光器的光束大小的可变光阑。以调节光线的强弱。
3、在光圈的下方常装有滤光片框,可放置不同颜色的滤光片。、反光镜：反光镜有两个面,一面为平面镜,另一面为凹面镜，凹面镜有聚光作用,适于较弱光和散射光下使用,光线较强时则选用平面镜。二、光学显微镜的使用措施()准备将显微镜平稳地放在身前的实验桌上,略偏左，使镜臂对着身体,镜筒向前。(二）对光转动转换器,使低倍镜对准通光孔,转动粗调节器,使低倍镜前端距载物台约1-2厘米的距离。将光圈放大;让左眼朝目镜里注视，同步用手将反光镜转向光源；调节反光镜,直至从目镜里看到一种白色明亮的圆形视野。 (三)低倍镜观测将玻片标本放在载物台上,使待检查部分位于通光孔中心,用弹簧夹片压住载玻片两端。两眼从侧面注视,将物镜
4、降至距标本约0.5厘米时停止。用左眼朝目镜里观测，同步转动粗调节器,缓慢上升镜筒,直到视野中浮现物象，再用细调节器调节。（四)高倍镜观测先将低倍镜下找到所需观测的物象，把要进一步放大的部位移到视野正中央。转动转换器,使高倍镜到位。调节反光镜和光圈，使光照明亮,再微微调节细调节器,直到物象清晰。 (五)显微镜复原用擦镜纸揩净目镜和物镜,用清洁纱布揩净镜体。再转动转换器,把两个物镜偏到两旁,并将镜筒下降,然后将显微镜平稳地放入镜箱内保存。实验二动物重要组织的显微镜辨认实验目的 掌握单层扁平上皮、单层柱状上皮、单层立方上皮、疏松结缔组织、骨骼肌、平滑肌、神经元的构造特点。材料设备 显微镜、单层扁平上
5、皮、单层柱状上皮、单层立方上皮、疏松结缔组织、骨骼肌、平滑肌、神经组织切片及有关的图。措施环节 1、取镜与放置移动显微镜时,要一手拿镜臂，一手托镜座，将显微镜放置在前方桌面上。2、打开光源,上升聚光镜,开大孔径光阑。3、观测将被检标本置于载物台上，用压片夹夹住，旋转最低倍数物镜观测。调节粗调焦螺旋,使载物台缓缓上升,直至物镜镜头接近标本。这时,一边使用目镜观测，一边调节粗调焦螺旋使载物台下降,直至视野中看到物像为止。移动载片位置,使物象处在视野的中心，此时再调节细调焦螺旋以增长物象的清晰度,可以调节聚光镜和孔径光阑,使光线强弱适中,以便于观测。转动物镜转换器，换用高倍镜头。用细调焦螺旋调节,换
6、用高倍镜后,可调节聚光镜和孔径光阑以增长亮度。观测更细微构造必需使用油镜时，则在制片上滴一滴香柏油。油镜使用完后，要及时地用蘸有乙醚的擦镜纸把油镜镜头擦拭干净。4.收显微镜关闭光源；下降聚光镜；关闭孔径光阑；转动物镜转换器,使之处在最低倍数物镜下。显微镜保持清洁。显微镜的光学部分只能用专门的擦镜纸擦拭。按实验室的规定，做好显微镜的使用记录等。实验成果 .复层上皮组织2.平滑肌. 神经组织4. 心肌切片5. 硬骨组织6. 软骨组织实验三 犬全身重要骨、关节、骨性标志的辨认实验目的 在犬骨骼标本上辨认各部位骨骼及骨性标志。材料设备 犬骨骼标本。措施环节 1 脊柱骨的构成:颈椎、胸椎、腰椎、荐椎、尾
7、椎的形态与连结。2 胸廓的构成:胸椎、肋骨和胸骨。3 骨盆腔构造：背侧荐骨、侧面髋骨、后侧坐骨、腹侧耻骨构成。4 四肢骨构成及分布:骨骼名称、形态、关节名称、关节角度。5 骨性标志：肩胛冈、大结节、髋结节、大转子、坐骨结节。实验成果绘制犬全身重要骨、关节和骨性标志的图示。技能考核在标本和活体上辨认重要骨、关节及骨性标志。*骨骼辨认测试实验三 血液凝固实验目的 以血液凝固时间作为指标,理解对血液凝固影响的因素,加深对生理止血过程的理解。 实验原理血液凝固是一种酶的有限水解激活过程，可分为三个环节:(1）凝血酶原激活物的形成；（）凝血酶原激活为凝血酶;（3）纤维蛋白的形成。在此过程中有多种凝血因子
8、和C离子的参与。根据凝血过程起动时激活因子来源不同,可将血液凝固分为内源性激活途径和外源性激活途径。内源性激活途径是指参与血液凝固的所有凝血因子在血浆中，外源性激活途径是指受损的组织中的组织因子进入血管后，与血管内的凝血因子共同作用而启动的激活过程。 实验药物和器材 生理盐水,液状石蜡、草酸盐、柠檬酸盐、肝素（8U/l)。注射器，试管6支,小烧杯2个，试管架，竹签束（或细试管刷)，秒表。实验措施与环节 . 采血(动物不限）。 2. 准备试管。 试管1 不加任何解决（对照管) 试管2 用液状石蜡润滑整个试管内表面 试管3 放少量脱脂棉 试管4 加草酸钾1ml 试管5 加柠檬酸盐12l 3. 每管
9、加入血液-2 l。将多余的血盛于小烧杯中,并不断用竹签搅动直至纤维蛋白形成。 .记录凝血时间 每个试管加血-2 ml后,即刻开始计时,每隔壁15 s 倾斜一次，观测血液与否凝固,至血液成为凝胶状不再流动为止，记录所经历的时间。4、5号试管加入血液后，用拇指盖住试管口将试管颠倒两次，使血液与药物混合。 5如果加草酸钾和柠檬酸盐的试管不浮现血凝,可再向两管内分别加入0025 molL-1的CaCl溶液23滴,观测血液与否发生凝固? 注意事项 1. 采血的过程尽量要快，以减少计时的误差。对比实验的采血时间要紧接着进行。 2. 判断凝血的原则要力求一致。一般以倾斜试管达45度时，试管内血液不见流动为准
10、。 3. 每支试管口径大小及采血量要相对一致，不可相差太大。实验成果 将实验成果及多种条件下的凝血时间，并进行比较、分析解释产生差别的因素。思考题1.血液凝固的机制及影响血凝的外界因素? 2.为什么有几管不凝？为什么有几管比对照组管凝血时间长?为什么有几管比对照管凝血时间短？实验四 红细胞脆性的测定实验目的 学习测定红细胞渗入脆性的措施，理解细胞外液渗入张力对维持细胞正常形态与功能的重要性。 实验原理 正常红细悬浮于等渗的血浆中,若置于高渗溶液内，则红细胞会因失水而皱缩；反之,置于低渗溶液内，则水进入红细胞，使红细胞膨胀。如环境渗入压继续下降，红细胞会因继续膨胀而破裂，释放血红蛋白,称之为溶血
11、。红细胞膜对低渗溶液具有一定的抵御力,这一特性称为红细胞的渗入脆性。红细胞膜对低渗溶液的抵御力越大，红细胞在低渗溶液中越不容易发生溶血,即红细胞渗入脆性越小。将血液滴入不同的低渗溶液中,可检查红细胞膜对于低渗溶液抵御力的大小。开始浮现溶血现象的低渗溶液浓度，为该血液红细胞的最小抵御力;浮现完全溶血时的低渗溶液浓度,则为该血液红细胞的最大抵御力。 生理学上将与血浆渗入压相等的溶液称为等渗溶液;而将能维持红细胞正常形态、大小和悬浮于其中的溶液称为等张溶液。等渗溶液不一定是等张溶液（如19%的尿素溶液），但等张溶液一定是等渗溶液。 实验药物 1%肝素,%氯化钠溶液,氯化钠溶液，蒸馏水。 仪器与器材
12、0 m小试管，试管架,滴管,1 l移液管,2 l移液管。 实验措施与环节 .溶液配制:取11个小试管,配制出11种不同浓度的氯化钠低渗溶液。 不同浓度的aCL溶液配制试管号试液12457891011NaCl/ml.4.3121.11.00.0.8.0.602%Nal 2蒸馏水ml060.00.91.011.21.31.4.50aCl浓度/%0.7.50.60.5505.40.0.350.0.52 2.制备抗凝血:不同动物采血措施各有所异,但多采用末梢血,将血滴在有1%肝素（或柠檬酸盐）的表面皿上，混匀(%肝素.m可抗10ml血）。 .加抗凝血：用滴管吸取抗凝血,在各试管中各加一滴,轻轻摇匀,静
13、置05h。 4.观测成果：根据各管中液体颜色和浑浊度的不同,判断红细胞脆性。 未发生溶血的试管：液体下层为大量红细胞沉淀,上层为无色透明，表白无红细胞破裂。 部分红细胞溶血的试管:液体下层为红细胞沉淀，上层浮现透明淡红(淡红棕）色,表白部分红细胞已经破裂,称为不完全溶血。 红细胞所有溶血的试管:液体完全变成透明红色，管底无红细胞沉淀，表白红细胞完全破裂，称为完全溶血。 实验成果 报告该实验动物红细胞的最小渗入抵御力和最大渗入抵御力。将全班的成果加以记录,并用平均值原则差表达。讨论如何通过渗入脆性特性判断机体的健康状况。注意事项 小试管要干燥,加抗凝血的量要一致,只加一滴。 混匀时,轻轻倾倒12次,减少机械震动,避免人为溶血。 抗凝剂最佳为肝素，其她抗凝剂可变化溶液的渗入性。 配制不同浓度的NaCl溶液时应力求精确、无误。NaCl溶液的浓度梯度可根据动物的实际状况合适进行调节。思考题 1.红细胞的形态与生理特性有何关系？ 根据成果分析血浆晶体渗入压保持相对稳定的生理学意义。 .输液时应注意的事项。实验五 蛙心活动观测 实验目的
