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1、绿咖啡豆提取物Lvkafeidou tiquwuGreen Coffee Bean Extract本品为咖啡树Coffea arabicaL.或罗布斯塔Coffee robusta L.成熟的种子去壳后经 水或一定比例的乙醇水溶液提取和纯化而制成的提取物。【性状】本品为浅黄棕色至黄棕色的粉末；气特异，味苦涩。【鉴别】HPLC特征图谱 照高效液相色谱法（通则Y04）测定对照品溶液的制备 精密称取绿原酸对照品10mg于10mL量瓶中，加60%甲醇溶液 8ml，超声使溶解，放冷，用60%甲醇溶液稀释至刻度，摇匀。精密量取5mL至50mL 量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。供试品溶液的制备 精密称
2、取本品约25mg，置50mL量瓶中，加60%甲醇溶液40mL， 超声使溶解，放冷，用60%甲醇溶液稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。色谱条件与系统适用性试验 十八烷基键合硅胶填充柱（C18（2），100A，4.6 250mm， 5pm）或同类型柱；以乙腊-水-甲酸（250:750:1，v/v/v）为流动相A，以乙腊-水-甲酸（100:900:1，v/v/v）为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱；柱温25C；检测波 长为330nm；流速为1.5mL/min。理论板数按绿原酸峰计算应不低于10000。时间（min）流动相A (%, v/v)B (%，v/v)0 - 200100100020
3、 - 30100030 - 321000010032 - 400100测定分别精密量取参照物溶液和供试品溶液各10pL，注入液相色谱仪，测定，记录 色谱图。供试品特征图谱中应呈现7个特征峰，其中与绿原酸参照物峰相应的峰为S峰，计 算各特征峰与S峰的相对保留时间，其相对保留时间应在规定值的5%之内。规定值 为：0.66 （3-咖啡酰奎尼酸/3-CQA），1.00 （绿原酸），1.06 （4-咖啡酰奎尼酸/4-CQA）， 1.53 （5-阿魏酰奎尼酸/5-FQA），2.27 （3,4-二咖啡酰奎尼酸/3,4-diCQA），2.39 （3,5-二咖啡酰奎尼酸/3,5-diCQA）, 2.55 （4,
4、5-二咖啡酰奎尼酸/4,5-diCQA）。对照特征图谱【含量测定】照高效液相色谱法（通则Y04 ）测定 对照品溶液的制备 同【鉴别】项下。供试品溶液的制备 同【鉴别】项下。色谱条件与系统适用性试验 同【鉴别】项下。测定分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10四L，注入液相色谱仪，测定，记录 色谱图。以7个特征峰峰面积之和作为供试品中总绿原酸峰面积。绿原酸含量按公式（E.1）计算X=气 乂 C x100%As x Cx （E.1）式中：X供试品中绿原酸组分的质量分数（%）；Ax绿原酸对照品的峰面积；Cx供试品溶液浓度（mg/mL）；As供试品中绿原酸的峰面积；Cs绿原酸对照品浓度（mg/mL）。
5、总绿原酸含量按公式（E.2）计算X= Cs X 工 Ax x100%Asx Cx （E.2）式中：X供试品中总绿原酸组分的质量分数（%）；注330nm波长下色谱图中7个绿原酸成分峰面积之和；Cx供试品溶液浓度（mg/mL）；As供试品中绿原酸的峰面积；Cs绿原酸（5-CQA）对照品浓度（mg/mL）；本品按干燥品计算，含绿原酸不得少于20.0%，总绿原酸不得少于40.0%。【检查】咖啡因照高效液相色谱法（通则Y04）测定对照品溶液的制备 精密称取咖啡因对照品25mg，置50ml量瓶中，加60%甲醇 溶液40ml，超声使溶解，放冷，用60%甲醇溶液稀释至刻度，摇匀。精密量取5ml至 25ml量瓶
6、中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。供试品溶液的制备 精密称取本品约25mg，置100ml量瓶中，加新沸热水40ml， 使溶解（若有不溶物，冷却至40C以下，超声处理），放冷，用水稀释至刻度，摇匀， 滤过，取续滤液，即得。色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂（4.6x250mm， 5顷）；以乙腊-0.41%乙酸钠溶液水（100:900，v/v）为流动相；柱温25C；检测波长为 273nm。理论板数按咖啡因峰计算应不低于7000。测定 分别精密量取对照品溶液和供试品溶液各20似，注入液相色谱仪，测定，记 录色谱图咖啡因含量按公式（E.3）计算。X= AxxC X100%AsxCx
7、 （E.3）式中：X供试品中咖啡因组分的质量分数（%）；Ax供试品中咖啡因的峰面积；Cx供试品溶液浓度（mg/mL）；As咖啡因对照品的峰面积；Cs咖啡因对照品浓度（mg/mL）。本品含咖啡因（C8H10N4O2）不得过15.0%。粒度 按照粒度测定法（通则Y07）测定，80目筛通过率不得少于99%。水分 按照水分测定法（通则Y08）测定，不得过5.0%。灰分 按照灰分测定法（通则Y09）测定，不得过3.0%。溶剂残留 按照溶剂残留测定法（通则Y10）测定，乙醇残留不得过5000mg/kg。重金属及有害元素 按照重金属测定法（通则Y11）测定，重金属含量不得过10mg/kg。 按照铅、镉、砷、
8、汞测定法（通则Y12）测定，铅不得过3mg/kg；镉不得过0.5mg/kg； 砷不得过1.0mg/kg ；汞不得过0.1mg/kg。菌落总数按照菌落总数测定法（通则G09）测定，细菌总数不得过1000cfu/g。霉菌及酵母 按照霉菌和酵母计数测定法（通则G14）测定，霉菌及酵母菌数不得过 100cfu/g。大肠菌群 按照大肠菌群计数测定法（通则G11）测定，大肠菌群不得过40MPN/g。控制菌 按照沙门氏菌检验测定法（通则G12）和金黄色葡萄球菌检验测定法（通则 G13）测定，沙门氏菌和金黄色葡萄球菌均不得检出。【包装】包装材料应符合GB 9685食品容器、包装材料用添加剂使用卫生标准的要求。【贮存】产品应贮存于阴凉、干燥的仓库中。避免与有毒、有害、易腐、易污染等物品一起 堆放。【保质期】在符合规定的贮运条件、包装完整、未经开启封口的情况下，保质期为36个月。【起草单位和起草人声明】本标准由浙江天草生物科技股份有限公司，晨光生物科技集团股份有限公司负责起 草。本标准主要起草人：邢新锋、李若鹏、牛志平、杨清山。
