《食管鳞癌P16、P15基因杂合子缺失的研究》由会员分享，可在线阅读，更多相关《食管鳞癌P16、P15基因杂合子缺失的研究（5页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、食管鳞癌P16、P15基因杂合子缺失的研究 摘 要 目标：探讨P16和P15基因和ESCC发生发展的关系。方法：应用显微切割、PCR、凝胶电泳、AgNO3染色等技术，检测食管鳞癌（ESCC）和高等级不经典增生中P16、P15基因杂合子缺失（LOH），对照正常细胞，分析ESCC和高等级不经典增生组织中LOH的改变，并就LOH率和患者的临床病理参数分别进行单原因分析。结果：ESCC组织中的LOH率为29.7%，高等级不经典增生组织中的LOH率为16.5%。应用SPSS软件对LOH率和患者的性别、组织分化、淋巴结转移进行单原因分析，差异均无显著性（P0.05）。结论：从正常鳞状上皮到不经典增生再到癌
2、变的过程中存在基因的异常累积。P15基因可能和食管鳞癌的发生发展相关。D9S162位点或其周围可能存在和ESCC发展相关的抑癌基因。关键词 食管鳞状细胞癌；P16；P15；抑癌基因；杂合性丢失Abstract Objective：To investigate P16 protein expression ,we infer the role and clinical significance of P16 gene during the occurrence and development of hepatocellular carcinoma. Methods：P16 protein exp
3、ression was quantitatively determined by im munohistochemistry in 26 cases of hepatocellular carcinoma.Simultaneously adjacent tumor tissues were contrasted. Results：P16 protein expression in 26 cases of hepatocellular carcinoma was significantly lower than that in adjacent tumor tissues. The expres
4、sion of P16 protein becomes lower with the increase in grading (P0.05），故未再进行多原因分析。3 讨论食管癌的发生是环境原因和宿主原因相互作用的结果，包括多原因的作用、多基因的改变和多阶段的发展过程，其中一项主要的遗传改变就是多个抑癌基因的失活和癌基因的激活，研究发觉抑癌基因的失活常伴有邻近DNA多态标识的丢失,若观察到癌组织的某一染色体区域频发的LOH,此现象提醒目标区域可能存在和所研究的肿瘤相关的抑癌基因。P16和P15属于INK4I(cyclindependent kinase 4 inhibitors)家族,全部定在
5、9p21，在细胞周期G1期调控细胞增生。P16蛋白为CDK4特异性抑制剂，经过和细胞周期素DCDK4复合物紧密结合或和CDK4结合竞争性地阻断细胞周期素DCDK4复合物的形成，维持RB蛋白非磷酸化状态，阻止细胞从G1期进入S期，抑制细胞增殖。P15从P16分离而来，和P16有95%的序列相同，P16的改变往往伴有P15的改变，现在已被认为是另一个含有研究意义的新的抑癌基因。P16和P15经过不一样的机制失活2，3，P16失活占优势作用的是开启子区CPG岛异常甲基化，突变和纯合性缺失相对较低，而P15常发生纯合性缺失。对某种肿瘤的抑癌基因此言，若受检病例中的25%以上发生LOH可视为有意义4。相
6、关9p21区域的LOH在多种肿瘤中可见报道，但检测结果很不一致。Hu等5经过对56例ESCC患者9p21p22上多个微卫星位点LOH的检测，并就其和CDKN2A(P16)和CDKN2B的相关性分析认为，CDKN2A的突变和基因内的等位基因丢失在ESCC的演进中全部起着主要的作用。本试验检测了和P16基因紧密连锁的D9S1748位点的LOH情况，结果显示其在高等级不经典增生中LOH率为7%（2/30），在癌组织中LOH率为17%（5/30），提醒该位点和食管癌早期的发生关系较少。我们检测的另一个位点 D9S171，距9号染色体短臂末端42cm，是距P16较远的着丝粒侧的微卫星位点，座在P15基因
7、，故D9S171的LOH也就意味着抑癌基因P15的丢失。D9S171的LOH在诸如头颈癌、肺癌、宫颈癌、食管癌等人类肿瘤中全部被检测到，但LOH率高低不一，所以推测15的失活可能在各肿瘤中发挥的作用不尽相同。Xing et al.2经过对食管癌高发区林县的60例ESCC的研究认为P15周围的D9S171的LOH率很常见（47%）。王全红等6等研究发觉不论在食管癌高等级不经典增生组织还是癌组织中，该位点全部存在较高的丢失率（33%，33%）。本试验检测到该位点在高级不经典增生和癌组织中的LOH率分别为29%和36%，结论和前者相一致，提醒P15基因可能和ESCC的发生发展相关。D9S162(9p
8、22p23)距P16编码区6cM，是距P16较远的端粒侧的微卫星位点。相关D9S162的LOH报到较少，早期报道9p22p23区域存在着很高的LOH(41.9%),提醒该位点周围可能存在着食管癌抑癌基因。Lichun 等7对食管癌9号染色上的17个多态性标识的LOH情况进行了检测，其中9p22p23区域观察到缺失（42.9%），我们检测的结果为36%,结果和前者一致，提醒该区域可能存在有和食管癌发展相关的抑癌基因。食管癌是一系列组织病理改变的结果，经典的病理改变包含食管炎、单纯增生、轻度到重度的不经典增生、原位癌，直至最终形成浸润癌，每一步骤包含着很多分子水平的改变。本试验显示正常组织中未发生
9、LOH，高等级不经典增生总LOH率为16.5%，食管鳞癌总LOH率为29.7%，而且各位点伴随病变的加重LOH全部有不一样程度的增加，说明在从正常鳞状上皮到不经典增生再到癌变的过程中存在基因的异常累积。总而言之，LOH的检测对筛选、定位和克隆食管癌相关的抑癌基因提供了一个很好的手段，食管癌的发生可能是众多失活抑癌基因协同作用的结果。参考文件Tavassoli F.A., Devilee P. World Health Organization Classification of Tumors.IARC Press,Lyon，2021，261.2Xing EP, Nie Y, Wang LD,e
10、t al. Aberrant methylation of P16INK4a and deletion of P15 INK4b are frequent events in human esophageal cancer in Linxian, China. Carcinogenesis，1999，20:7784.3Tokugawa T, Sugihara H, Tani T,et al.Modes of silencing of P16 in development of esophageal squamous cell carcinoma.Cancer Res.2021，62:4 938
11、4 944.4Muzeau F, Flejou JF, Thomas G,et al.Loss of heterozygosity on chromosome 9 and P16(MST1, CDKN2) gene mutations in esophageal cancer.Int J Cancer.1997，72:2730.5Hu N, Wang C, Su H,et al.High frequency of CDKN2A alterations in esophageal squamous cell carcinoma from a highrisk Chinese population. Genes Chromosomes Cancer，2021，39(3):205216.6王全红，张培红，李 光，等.食管鳞癌及其前驱病变基因杂合子缺失的研究J.中华病理学杂志，2021，33(4):346349.7Lichun Y, Ching Tang CM, Wai Lau K,et al.Frequent loss of heterozygosity on chromosome 9 in Chinese esophageal squamous cell carcinomas. Cancer Lett，2021，203(1):7177. 2/2 首页12
