《色谱分析法》复习题答案

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1、色谱分析法复习题1. 色谱法作为分析方法的最大特点是什么?1)色谱法的突出特点是具有很强的分离能力。所以,色谱法成为许多分析工作的先决条件和必需的步骤。2)􀁺近二十年来,随着与色谱法相关的一系列技术,如填料与柱制备技术、仪器一体化技术、检测器技术、数据处理技术的发展与创新,色谱法已具有分离效率高、分析速度快、样品用量少、灵敏度高、分离和测定一次完成、易于自动化等优点。2. 一个组分的色谱峰可用哪些参数描述?这些参数各有何意义?色谱峰的特征 一个组分色谱峰特征的描述:􀁺峰高或峰面积(用于定量)􀁺峰位(用保留值表示,用于定性)􀁺

2、;峰宽(用于衡量柱效)3. 衡量色谱柱效的指标是什么?请作简要的说明.色谱峰的柱效参数 (区域宽度 )􀁺标准差():正态分布曲线上两拐点间距离之半. 的大小说明组分在流经色谱柱的过程中的分散程度。小,分散程度小,极点浓度高,峰形“瘦”,柱效高。反之,大,峰形“胖”,柱效低。􀁺峰宽(W ):在峰两侧拐点处所作切线与峰底相交两点间的距离.􀁺W = 4􀁺半峰宽(W1/2):通过峰高的中点作平行于峰底的直线,此直线与峰两侧相交两间的距离.􀁺W1/2= 2.355W = 1.699W1/24. 简述谱带展宽的原因.

3、5. 什么是分离度?要提高分离度应从哪两方面考虑?分离度是相邻两组分色谱峰保留时间之差与两峰峰宽均值之比。􀁺分离度是总分离效能指标。􀁺R=tR2tR1/(W1+W2)/ 2= 6. 下列参数发生何种变化可使理论塔板高度减小?(1) 流动相速度;(2)固定相颗粒;(3)组分在固定相中的扩散速度;(4)柱长.Ven Deemter 方程式􀁺HA + B/u + Cu 􀁺H:理论塔板高度 􀁺A:涡流扩散系数 􀁺B:纵向扩散系数影响塔板高度的C:传质阻抗系数 􀁺u:流动相线速度

4、在填充色谱柱中,由于填料粒径大小不等,填充不均匀,使同一组分的分子经过多个不同长度的途径流出色谱柱,使色谱峰展宽。􀁺涡流扩散的程度由下式决定:􀁺A2dp7. 名词解释: (1)噪声和飘移;(2)灵敏度和检测限;(3)线性和线性范围.(4)梯度洗脱.8. 写出分离度(R)与柱效(n)、分配系数比()及容量因子(k)间的关系式.指出各项的含义.当分别增加n、k时,R有什么样的改变?9. 色谱分析法进行定量分析的依据是什么?10. 简述Van Deemter方程在气相色谱和高效液相色谱中表达形式的异同.11. 某色谱柱的理论塔板数很大,是否任何两种难分离的组分一定

5、能在该柱上进行分离?为什么?12. 什么是正相色谱?什么是反相色谱?讨论正、反相色谱中流动相强度与极性的关系.13. 在RP-HPLC中使用的甲醇-水流动相体系中加入磷酸盐时,流动相的洗脱能力是增大还是减小?为什么?14. HPLC的光二极管阵列检测器可以得到那些信息?15. 用方程式说明反相离子对色谱法分离强酸、强碱的机制.16. 何谓化学键合相?常用的化学键合相有哪几种类型?17. 常用的HPLC定量分析方法是什么?内标法的特点是什么?18. 以液相柱色谱方法分离纯化蛋白质的分离模式有几种,各自的基本特点是什么?19. 用HPLC建立一种测定生物材料中某种活性成分的含量的方法时,进行课题设计需要从哪几个基本方面来考虑?

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