100万株组培苗工艺流程设计

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1、目 录前言 -22 器材用品-33工厂布局设计-4 3.1 准备间-4 3.2 培养及配置及灭菌室-43.3 检测及称量室-43.4 接种室- -43.5 培养室-54.参考文献-7前言 在植物组织培养过程中,根据所培养的植物种类、生产规模,选择合适的器材、设施是十分必要的,只有这样才干保证整个操作过程的顺利进行。在器材、设施的选择上,不要贪大求洋,应当在其是否实用上多下功夫。在研究型的组织培养操作中,往往对器材、设施的规定较高;而在生产型的组织培养中,则对器材、设施的规定却较为粗放,因此管理者必须根据实际情况来进行培养器材、设施的遴选。 在植物组织培养的过程中,从外植体的采收到试管苗的定植都

2、必须要在特定的环境中进行,例如,培养基的配制要在专用的器材、设施中进行;外植体的接种要在专用的器材、设施中进行。应当根据植物组织培养不同阶段的需要,选择不同的器材、设施。只有从减少投入、提高工效、节约劳力等诸方面加以考虑,才干减少培养成本、提高培养效率。在植物组织培养过程中,所使用的器材种类较多,但它们通常可以分为通用器具、盛具、计量器械、灭菌器械、接种器械、培养器械等几种类型。在使用这些容器、设备时,必须要了解它们的基本用途,并学会它们的基本用法。例如,不能给容量瓶加热;必须用磨砂玻璃灯罩来熄灭正在燃烧的酒精灯;应当定期更换超净工作如的无菌滤膜等等。具体操作可参考具体设备、容器的使用说明。在

3、100万株组培苗工厂化生产设计中,厂房设立的基本原则要立足于科学、高效、经济和实用。通常其组成必须要有准备间、无菌操作间和培养间。2器材、用品通用器械 烧杯常用的规格有(50ml、100ml、250ml、500ml、1000ml)。烘箱 恒温水浴 玻璃搅拌棒 洗耳球 冰箱 牛角勺 玻璃漏斗 剪刀 器械架各种盛具 搪瓷浅盘 塑料盆 铁丝筐 纯水水桶:常用的规格有10L、20L。 塑料桶 各种规格的磨砂玻璃瓶计量器械 量筒:常用的规格有25ml、50ml、100ml、500ml、1000ml。 容量瓶:常用的规格有50ml、100ml、500ml、1000ml。 大肚移液管:常用的规格有1ml、5

4、ml、10ml。 刻度移液管常用的规格有1ml、5ml、10ml。 移液管架 酸度计 药物天平 分析天平灭菌器械 磨砂口玻璃瓶 酒精灯 细菌过滤器 无菌滤纸 无菌脱脂棉 真空泵 高压灭菌锅 可调试电炉 皮下注射器 紫外线灭菌灯接种器械 超净工作台 小型喷雾器 钝头镊子 尖头镊子 解剖刀 打孔器 双目显微镜 细菌滤膜 接种针培养器械 试管:常用的规格有2cm15cm、3cm15cm。 培养皿:常用的规格有直径9cm、12cm。 锥形瓶:常用的规格有50ml、100ml。 显微镜 成套载玻片 铝箔 橡皮筋 血球计数器 空调 摇床3 工厂布局设计3.1 准备间 规定具有耐酸碱的水池和排水口。天天都有

5、大量的植物材料碎片、琼脂等东西堆积,因此排水口一定要安装过滤网,做到天天清洗检查,一是减少微生物滋生源,二是避免排水系统堵塞,带来不必要的麻烦。 配有不同形状及大小的洗涤刷,假如有也许安装洗瓶机器,更能提高工作效率。 配备数个塑料箱盛装瓶子,将瓶放入箱内时,应倒立,这样可使瓶子自然干燥。3.2 培养基配制及灭菌室 手提式高压灭菌锅23个,用于一些小型物品或急需用品的高压灭菌。组培工厂必须配备1至数台大型灭菌锅,直径4050cm的不锈钢或铝锅23个,用于溶解琼脂或调制培养基,加热源最佳采用煤气灶或用电。 去离子水发生器12台。 干燥箱1台,用于器皿或急需用品的干热灭菌。 大型工作台12张,用于培

6、养基分装、包扎等。 玻璃柜1个,用于放置药品等。 试剂瓶、具刻度移液管、皮下注射器、量筒、搪瓷量杯、容量瓶、各式塑料瓶或塑料桶等易损品数个,更重要的是配备大量充足的培养瓶。3.3 检测 称量室 药品室 PCR仪:可用于真菌和细菌性病原菌的检测和部分病毒病的检测。 酶标仪:通过血清免疫技术(ELISA)进行重要病毒病的检测。 双目显微镜、解剖镜:用于植物组织培养材料的形态发育及细胞观测。 凹穴载玻片:用于细胞悬浮培养。 载玻片和盖玻片:用于制作细胞和组织的显微制片。 光照培养箱;用于不同种类植物培养方法或培养条件的研究。 冰箱:用于贮存化学药品,培养基母液和植物材料等。 低温冰箱:用于长期贮存培

7、养基储备液,某些酶和椰子汁等。 称量仪器:涉及感量为110000的电子天平,感量为110的普通托盘天平,称量为15kg的台秤等,用于药品的称量配制和植物组织生长量的测定。 水质及培养基检测仪器:涉及pH酸度计、电导率仪或Ec值测定仪。细菌滤膜及其支座:用于对溶液进行过滤灭菌。3.4 接种室 这是组培工厂的最核心和关键部分,是进行无菌操作的场合,如植物材料的消毒接种,无菌材料的继代,丛生苗的增殖或切割,嫩茎插植生根等。它也关系到污染率这项最重要的成本指标的高低,直接影响组培工厂的工作效率及经济效益。无菌操作室原则上宜小不宜大,要有缓冲间,以便进人无菌室前在此洗手、换衣、换鞋、预解决材料等。无菌室

8、的地板和四周墙壁应尽也许光洁,不易积染灰尘,易于采用各种清洁和消毒措施。无菌室内要吊装紫外灭菌灯,用于经常照射灭菌。要安装空调机,保持室温在2325,原则上无菌室的门窗应紧闭,保持与外界相对隔绝。无菌操作室内需要的用品如下。 1. 超净工作台:用于进行无菌操作。 2. 室内小推车:用于运送培养物、培养基和各种器皿用品。 3. 酒精灯:用于灼烧各种金属用品。 4. 手持喷雾器:用于在超净工作台内或对其他物品喷洒酒精进行消毒。 5. 带盖螺口玻璃瓶:用于盛装无菌水,对植物材料进行表面消毒。 6. 大的钝头镊子:用于进行接种和继代、生根等操作。 7. 细解剖针;用于植物材料的解剖。 8. 解剖刀:用

9、于切割植物材料。 9. 各种孔径的不锈钢筛网:用于分离太小不同的细胞团。 10.低速台式离心机:用于沉淀细胞,以便拟定沉积细胞的总体积或清洗原生质体。 11.振荡培养器;用于植物材料的液体培养。 12.血球计算器;用于细胞计数。3.5 培养室 培养室要讲究保温隔热。假如是专为组织培养设计的新建筑,为了减少能源消耗,培养室应尽量运用自然光照,最大限度地增长采光面积。除必要的承重结构外,所有安装落地式双层大玻璃窗,并在窗外设立防止直射的半透明瓦楞板,它的宽度、数目应按本地的纬度、日照强度、日照时数等气象因子适当考虑。 培养室的四壁可选白色或浅米黄色防霉漆、涂料等涂层,地面也应选浅色建材,最佳是白水

10、泥、白水磨石或同样的磨石砌块、瓷砖等,顶部为白色,总之各处都应增强反光,以提 高室内的光亮度和易于清扫。我国大多数地区属大陆性气候,夏热冬冷,而培养室规定常年保持25士(12),因此房屋构造上要做到保温、隔热、防寒性能良好,做到冬暖夏凉。温度调节常借助空调机,使高温季节降温,低温季节升温。在华南、昆明等冬暖地区,冬季由辅助照明灯产生的热量即可很容易地维持室温在2 5左右。房屋结构及隔热性能良好, 无论降温或升温都可有效地节省能源,并易于保持温度的稳定。 培养室应设计能有效通风的窗户,定期或需要时加强通风散热,如夏初或秋末,一天内温度变化很大,即使夏天,有时夜温也不适宜必要时都可运用通风来调节温

11、度,这样可节省一些降温用电。方法是只要在室内地板稍高处设立进风气窗,在气窗的对侧,近天花板处 设立排风窗,亦可安装小功率的排风扇,运用自然空气来调节室内的温度。进风气窗可用两层以上的纱布简朴地滤尘。 假如改建,则应考虑增长窗户,改为双层窗,内壁加保温隔热层,如加一层纤维板或胶合板,墙与板之间填塞保温物如蛭石、软木砖、泡沫塑料块等。如原有建筑质量较好,外界温度变化并非太剧烈,也可只钉一层纤维板,留下适当的空气层,甚至于可直接运用原有房舍作培养室。培养室的天花板也应有保温层,地面架设地板,以利保温。至于这些结构应当完善到什么限度,重要根据本地的温度变化情况、投资的多少等来决定。100万株马铃薯组培

12、苗所需的培养架数 一个培养架长1.5m宽 1.2m高2.25m 分五层。一个培养瓶直径为8cm。则一层培养架长可放16个培养瓶,宽可放13个培养瓶,则每层可放208个瓶,一个培养架可放1040个培养瓶。(以上数据来源于北方民族大学生物科学与工程学院实验室)假若每人天天接种50瓶,每瓶25棵苗,每组8人。天数:=100(天)由于马铃薯组培苗在培养室每20天出一次苗,所以培养架只需考虑放置20天的组培苗,20天接种的苗数:20万株,8000个培养瓶的场地,则需要8个培养架。 为了美观与经济设计如图5 参考文献1 李清萍、马铃薯. 试管苗工厂化生产及成本核算. 甘肃定西地区旱农中心, 定西. 2 马铁山、郝改莲、张建军. 马铃薯脱毒微型种薯工厂化繁育技术 . 河南濮阳.3 袁正仿、张苏锋、王广铭、远凌威. 马铃薯脱毒种薯的工厂化生产研究. 河南 信阳 2023.4 王季春、唐道彬. 马铃薯脱毒种薯生产技术操作规程要点 . 西南农业大学农学系.5 徐洁兰、管彩虹. 花卉组培苗产业化及育苗成本分析. 广州城市职业学院,广东广州. 6 李永峰. 工厂化育苗在林木种苗生产中的应用.

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