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1、生化测试一：蛋白质化学一、填空题1.氨基酸的结构通式为 。2.氨基酸在等电点时，主要以 兼性/两性 离子形式存在，在pHpI的溶液中，大部分以阴 离子形式存在，在pHpI的溶液中，大部分以阳离子形式存在。3.生理条件下（pH7.0左右），蛋白质分子中的Arg侧链和 Lys_侧链几乎完全带正电荷，但 His侧链带部分正电荷。4.测定蛋白质紫外吸收的波长，一般在280nm，要由于蛋白质中存在着Phe、 Trp 、 Tyr 氨基酸残基侧链基团。5.皮肤遇茚三酮试剂变成 蓝紫 色，是因为皮肤中含有 蛋白质 所致。6.Lys的pk1（）=2.18，pk2（）=8.95，pk3（）=10.53，其pI为
2、9.74 。在pH=5.0的溶液中电泳，Lys向 负 极移动。7.实验室常用的甲醛滴定是利用氨基酸的氨基与中性甲醛反应，然后用碱（NaOH）来滴定 NH3+/氨基 上放出的 H 。8. 一个带负电荷的氨基酸可牢固地结合到阴离子交换树脂上，因此需要一种比原来缓冲液pH值 小 和离子强度 高 的缓冲液，才能将此氨基酸洗脱下来。9. 决定多肽或蛋白质分子空间构像能否稳定存在，以及以什么形式存在的主要因素是由一级结构 来决定的。10. 测定蛋白质中二硫键位置的经典方法是_对角线电泳 。11. 从混合蛋白质中分离特定组分蛋白质的主要原理是根据它们之间的 溶解度 、 分子量/分子大小 、 带电性质 、 吸
3、附性质 、 生物亲和力 。12. 蛋白质多肽链主链构象的结构单元包括_-螺旋_、_-折叠_、_-转角_等，维系蛋白质二级结构的主要作用力是_氢_键。13. 蛋白质的螺旋结构中， 3.6 个氨基酸残基旋转一周，每个氨基酸沿纵轴上升的高度为 0.15 nm，旋转 100 度。14. 交换层析分离蛋白质是利用了蛋白质的 带电/解离 性质。阴离子交换层析在层析柱内填充的交换剂上带 正 电荷，可吸引带 负 电荷的蛋白质，然后用带 负 电荷的溶液洗柱将蛋白质洗脱下来。二、选择题 1.区分极性氨基酸和非极性氨基酸是根据 （ C ）A. 所含的羧基和氨基的极性 B. 所含氨基和羧基的数目 C. 所含的R基团为
4、极性或非极性 D. 脂肪族氨基酸为极性氨基 2.下列哪一种氨基酸不属于人体必需氨基酸 （ D ）A. 亮氨酸B. 异亮氨酸 C. 苯丙氨酸D. 酪氨酸3.下列哪一组氨基酸为酸性氨基酸： （ D ）A. 精氨酸，赖氨酸B. 谷氨酸，谷氨酰胺 C. 组氨酸，精氨酸D. 谷氨酸，天冬氨酸 4.含硫的必需氨基酸是 （ B ）A. 半胱氨酸 B. 蛋氨酸/甲硫氨酸 C. 苏氨酸 D. 亮氨酸 5.芳香族必需氨基酸包括 （ D ）A. 蛋氨酸 B. 酪氨酸 C. 亮氨酸 D. 苯丙氨酸 6.含四个氮原子的氨基酸是 （ B ）A. 赖氨酸 B. 精氨酸 C. 酪氨酸 D. 色氨酸 7.蛋白质中不存在的氨基酸
5、是下列中的哪一种？（ D ）A. 赖氨酸 B. 羟赖氨酸 C. 酪氨酸 D.鸟氨酸8.在蛋白质中不是L-氨基酸的是（ B ）A. 苏氨酸 B. 甘氨酸 C. 半胱氨酸 D. 谷氨酰胺 9.谷氨酸的PK值为2.19, 4.25, 9.76; 赖氨酸的PK值为2.18, 8.95, 10.53; 则它们的PI值分别为（ B ）A. 2.19和10.53 B. 3.22和9.74 C. 6.96和5.56 D. 5.93和6.36 10.从赖氨酸中分离出谷氨酸的可能性最小的方法是（ D ）A. 纸层析 B. 阳离子交换层析 C. 电泳 D. 葡萄糖凝胶过滤 11.用于确定多肽中N-末端氨基酸的是（
6、C ）A. Sanger试剂 B. Edman试剂 C. 两者均可 D. 两者均不可12.有一蛋白质水解物,在PH6时,用阳离子交换柱层析,第一个被洗脱的氨基酸是（ C ）A. Val (PI5.96) B. Lys (PI9.74) C. Asp (PI2.77) D. Arg (PI10.76) 13. 下列关于离子交换树脂的叙述哪一个是不正确的？（ D ）A.是人工合成的不溶于水的高分子聚合物 B.阴离子交换树脂可交换的离子是阴离子 C.有阳离子交换树脂和阴离子交换树脂两类 D.阳离子交换树脂可交换的离子是阴离子 14.可使二硫键氧化断裂的试剂是（ C ）A. 尿素 B. 巯基乙醇 C.
7、 过甲酸 D. SDS15. Sanger试剂是（ B ）A.苯异硫氰酸酯 B. 2,4二硝基氟苯 C. 丹磺酰氯 D.巯基乙醇16.下列哪种氨基酸可使肽链之间形成共价交联结构（ D ） A.Met B. Ser C. Glu D. Cys17.以下氨基酸中哪一种可能会改变多肽链的方向和阻断a螺旋（ D ）A. Phe B. Cys C. Trp D. Pro18.蛋白质分子中螺旋的特点是（ C ）A.肽键平面完全伸展 B.靠盐键维持稳定 C.多为右手螺旋 D.螺旋方向与长轴垂直19.为从组织提取液中沉淀出活性蛋白最有可能的方法是加入（ A ）A. 硫酸铵 B. 三氯乙酸 C. NH4Cl D
8、. 氯化汞20.有一个肽用胰蛋白酶水解得：H-Ser-Ala-Arg-OHH-Gly-Tyr-OHH-Met-Glu-Leu-Lys-OH三组片段，用BrCN处理得：H-Ser-Ala-Arg-Met-OHH-Glu-Leu-Lys-Gly-Tyr-OH两组片段，按肽谱重叠法推导出该九肽的序列应为（ C ）A. 3+2+1 B.5+4 C.2+1+3 D.2+3+1 E.1+2+321.蛋白质变性后，不发生下列哪种改变（ C ） A.生物活性丧失B.易被降解 C.一级结构改变D.空间结构改变 E.次级键断裂 22. 关于蛋白质三级结构的描述，下列哪项是正确的（ A ） A. 疏水基团位于分子内
9、部 B. 亲水基团位于分子内部 C. 羧基多位于分子内部 D. 二硫键位于分子表面23. 下列蛋白质通过凝胶过滤层析柱时，最先被洗脱的是（ D ） A.牛胰岛素（分子量5700） B. 肌红蛋白（分子量16900） C.牛乳球蛋白（分子量35000） D.马肝过氧化物酶（分子量247500）24. 镰刀型贫血病患者，Hb分子中氨基酸的替换及位置是（ D ） A. 链第六位Val换成Glu B. 链第六位Val换成Glu C. 链第六位Glu换成Val D. 链第六位Glu换成 Val三、名词解释1. -氨基酸：是含有氨基的羧酸，氨基连接在-碳上。是蛋白质的构件分子。2. 氨基酸的等电点：在某一
10、pH的溶液中，氨基酸解离成阳离子和阴离子的趋势及程度相等，成为兼性离子，呈电中性，在电场中既不向阳极也不向阴极移动。此时溶液的pH值称为该氨基酸的等电点。3. 层析：按照混合物在移动相（可以是气体或者液体）和固定相（可以是液体或固体）之间的分配比例将混合成分分开的技术。4. 蛋白质的沉淀：如果加入适当的试剂使蛋白质分子处于等电点状态或失去水化层（消除相同电荷，除去水膜），蛋白质胶体溶液就不再稳定并将产生沉淀。5. 蛋白质的变性：蛋白质在某些物理和化学因素作用下，其特定的空间构象被破坏，也即有序的空间结构变成无序的空间结构，从而导致其理化性质改变和生物活性的丧失。6. 结构域：指多肽链在二级结构
11、或超二级结构的基础上形成三级结构的局部折叠区，它是相对独立的紧密球状实体，称为结构域。 四、问答题某八肽的氨基酸组成是2Lys, Asp, Tyr, Phe, Gly, Ser和Ala。此八肽与FDNB反应、酸水解后释放出DNPAla。用胰蛋白酶水解该八肽，得到两个三肽及一个二肽，其三肽的氨基酸组成分别为Lys, Ala, Ser和Gly, Phe, Lys。用胰凝乳蛋白酶（糜蛋白酶）水解该八肽，释放出游离的Asp及一个四肽和一个三肽，四肽的氨基酸组成是Lys,Ser, Phe, Ala, 三肽与FDNB反应后，经酸水解释放出DNPGly。根据上述结果分析，写出该八肽的氨基酸排列顺序，并简述分
12、析过程。 解答： Ala-Ser- Lys- Phe- Gly- Lys- Tyr- Asp生化测试二：酶化学一、填空题1. 酶的活性中心有 结合部位 和 催化部位 两个功能部位，其中 结合部位 直接与底物结合，决定酶的专一性， 催化部位 是发生化学变化的部位，决定催化反应的性质。2. 温度对酶活性的影响有以下两个方面，一方面随着温度的升高酶活性增加，另一方面 过高的温度会使酶蛋白变性。3. 酶活力是指酶催化一定化学反应的能力，一般用单位时间内酶催化反应产物的增加量表示。4. 全酶有 酶蛋白 和 辅助因子 组成，在催化反应时，二者所起的作用不同，其中酶蛋白决定专一性和效率，辅助因子 起传递电子
13、、原子或化学基团的作用。5. 酶活性的快速调节方式包括 变构调节 和 可逆修饰 。6. 酶作为生物催化剂的特点为 专一性 、高效性 、催化条件温和、活性可调节。二、选择题1. 竞争性可逆抑制剂的抑制程度与下列哪种因素无关 （ A ）A.作用时间 B.抑制剂浓度 C.底物浓度 D. 酶与抑制剂亲和力的大小 E. 酶与底物亲和力的大小2. 关于变构酶下列哪一种说法是错的 （ C ）A.变构效应剂多为酶的底物或产物 B.存在催化与调节两个活性部位 C.反应符合米-曼氏方程式 D.反应曲线呈S形 E.一般由多个亚基组成3. 酶的竞争性可逆抑制剂可以使 （ C ）A. Vmax减小，Km减小 B. Vmax增加， Km增加 C. Vmax 不变，Km增加 D. Vmax 不变，Km减小 E. Vmax 减小，Km增加4. 酶的活化和去活化过程中，酶的磷酸化和去磷酸化的位点通常在酶的哪一种氨基酸残基上 （ D ） A.天冬氨酸 B.脯氨酸 C.赖氨酸 D.丝氨酸 E甘氨酸5. 酶的抑制剂 （ B ）A.由于引起酶蛋白变性而使酶活性下降 B.使酶活性下降而不引起酶蛋白变性 C.只引起酶蛋白变性而可能对酶活性无影响 D.一般为强酸，强碱 E.都和底物结构相似6. 同工酶的叙述，正确的是
