《液相色谱质谱联用仪(TQXS)操作维护规程》由会员分享，可在线阅读，更多相关《液相色谱质谱联用仪(TQXS)操作维护规程（3页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、液相色谱质谱联用仪（沃特世操作维护规程Xevo TQXS)1操作规程1.1使用仪器前必须征得仪器保管人同意。1.2开机：1.2。1打开电脑，首先打开自动进样器电源，再逐一打开质谱电源和UPLC各电源，各部件通过 自检后，双击工作站图标进入Masslynx工作站.1.2。2选择InstrumentMS Tune进入调谐界面.从调谐界面选择Vacuunpump，打开真空 泵，开始抽真空。机械泵和涡轮分子泵开始工作.1。2。3质谱上的真空灯开始闪烁，当系统达到真空状态，灯变为绿色，不再闪烁，同时观察调 谐界面DiagnosticsTTurbo Speed泵转速达到100%即可，达到实验状态大约要抽真
2、空4小时 （注意：真空规，测量工具，无异常状况通常无需打开，尤其在刚开始抽真空时不要打开。）1.2。4气源压力设置：氮气：90100psi。氯气：0.05Mpa,不超过0。1Mpa（实验前确认氯气瓶 压力，低于1Mpa时需更换氯气。）1.3准备UPL C系统1。3。1准备流动相：（1）A和B所有的缓冲液和超纯水都要新配制，超纯水和缓冲液使用不得 超过二天。缓冲盐一定要可挥发的，而且浓度在2 mM-5mM之间，不要超过10mM（注：若流动相含 有缓冲盐，用完需使用大比例水相长时间冲洗系统和色谱柱，若流动相含有酸，必须为挥发性 酸，浓度范围为0。01%-0。1%，进样器高压密封垫要求PH2,不能使
3、用三氟乙酸、七氟丁酸等 离子对试剂）。有机相要使用原装进口的色谱纯。（2） SW+Purge （弱洗：10%ACN+90%纯水或 者与流动相梯度初始比例相同）用于清洗泵头和密封清洗;Wash （强洗：90%ACN+10%纯水），质 谱端wash （70%ACN+30%纯水）；1。3。2初始化UPLC泵：在Masslynx主页面上点击MS Console,进入系统控制界面，点击左边 Quaternary Solvent Manager选择CONTROLPrime A1/B1/B2/A1solvent,设定时间，按 start。1。3。3初始化UPLC自动进样器：UPLC控制台上选择Sample
4、Manager，选择Control Primeseal wash，灌注进样器和洗针系统。完成后，UPLC自动进样器准备好。1。3。4灌注完泵和自动进样器后UPLC准备好。1.4准备质谱（word完整版）液相色谱质谱联用仪（TQXS）操作维护规程1。4。1 MS Tune，首先打开氮气，再开高压.（注：一定要打开氮气和高压才能开流动相，关闭流动相后才能关高压和氮气）。1。5 ESI调谐1.5。1把调谐液放入A号位（注：浓度在0。05-0o 1ppm之间，根据实际的灵敏度调整样品浓 度）。1o5o 2把流动相的流速设为0.2ml/min，有机相和水相比例为1:1.点击Tune界面下的Fluidic
5、s，点击Purge syringe灌注注射器.设置Infusion流速5uL/min，根据灵敏度可适当 调整。设置Flow State模式（Infusion:直接进样；Combined:液相和样品混合进样；LC:液 相进样；Waste:废液）。1o5o3 选择 Xevo TQ一S MS Detector 下面的 IntelliStart: Sample Tune and Develop Method点击Start,调出界面，输入各参数，系统开始自动优化目标化合物的质谱参数。1.6建立质谱的MRM方法.选择InstrumentMS Method进入质谱方法编辑界面.打开新建质谱方法窗口，再点击M
6、RM,按 调谐结果输入下列参数：离子模式、化合物名称、母离子质量数、子离子质量数、离子驻留时 间、锥孔电压、碰撞能量和MRM运行时间等。1o 7建立UPLC方法。选择InstrumentInlet Method进入UPLC方法编辑界面。逐一编辑泵的方法、自动进样器 的方法和紫外检测器的方法等。最后把UPLC的方法命名保存。1o 8建立样品运行序列表，运行采集数据。在Masslynx主界面上点击FileNew，新建序列表，输入文件名、注释、质谱方法、液相方 法、瓶号、进样体积等参数，最后把编辑好的序列表命名保存.1o 9数据采集。新建项目project,新建sample list，输入文件名，选
7、择质谱方法，质谱调谐方法，液相方 法，样品瓶位置，保存序列名，点击start sample list run采集数据。可设置自动待机程序， 关碰撞器，停流速，关高压，等待两分钟，关氮气。1.10数据分析在sample list中选中要打开的色谱图，单击chromatogram;要提取质量色谱图，菜单栏： DisplayMass 出现质量色谱图窗口，单击 select all） OK积分 processintegrate定量分析，建立sample list,输入样品类型，标准品浓度，确定积分参数，建立定量方法， 处理样品，查看定量结果。1.11关机一般质谱仪部分不需要关机，不用时只要保持在Sta
8、ndby状态下即可。但如果长时间不 用，或是对仪器进行清洗和维修时需要关机。1.11。1首先停止液相色谱流速，如果还需要冲洗色谱柱，可以将液相色谱管路从质谱移开 到废液瓶。1。11.2点击MS Tune进入调谐窗口，点击Standby，关闭高压，让MS进入待机状态时，指示 灯会由绿色变成红色。1.11.3等脱溶剂气温度降到常温，关闭氮气。1.11。4选择OptionVent，这时质谱开始泄真空，待机械泵停止运行，同时观察调谐界面 DiagnosticsTTurbo Speed泵转速为0时即可关闭质谱电源。关闭计算机和显示器，关闭气 路。2。仪器基本维护与使用注意事项：2。1仪器室要保持整洁、干
9、净、无尘；配套设施布局合理。2。2开高压之前一定要先开氮气，关氮气之前一定要先关高压.2.3溶剂和流动相的要求，所有的流动相都要用022m的滤膜过滤，水相要用前新配，并 不得超过两天.样品必须使用022m的滤膜过滤。样品响应值不能超过10e7.2。4 ESI离子化与溶剂密切相关，在使用某些溶剂和添加物需要注意以下几个方面：三氟乙 酸(TFA )多用于蛋白质和多肽分析，但对ESI离子化有抑制效应：三乙胺(TEA)在m/z 102处有 较强的M+H +峰，有可能会抑制某些碱性化合物在正离子ESI条件下的离子化，也有可能会增 强某些碱性化合物在负离子ESI条件下的响应.注意！下列的溶剂添加剂会产生严重的离子化 抑制，建议禁用：强酸强碱、不挥发性酸及相应的盐(如磷酸盐、硼酸盐、柠檬酸盐等)、表面 活性剂、离子对试剂。2。5定期清洗样品锥孔：关闭隔断阀，取下样品锥孔，用专用烧杯，镊子，先用甲醇：水: 甲酸(45:45: 10)的溶液超声清洗20min，然后先后用超纯水和甲醇各溶液超声清洗20分钟， 待氮吹吹干后再安装到仪器上。
