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1、实验一：观察DNA、RNA在细胞中的分布（必修一P26）一实验目的：初步掌握观察DNA和RNA在细胞中分布的方法二实验原理1 甲基绿+DNA 绿色 两种试剂不是单独使用，应混合使用吡罗红+RNA 红色几种液体的作用2 8%盐酸：改变细胞膜的通透性，加速染色剂进入细胞，同时使染色休中的DNA和蛋白质分离，有利于DNA与染色剂结合。 0.9%NaCl溶液：保持口腔上皮细胞正常形态 蒸馏水：配制染色剂，冲冼载玻片三方法步骤操作步骤注意问题解释取口腔上皮细胞制片载玻片要洁净，滴一滴质量分数为0.9%的NaCl溶液（生理盐水）用消毒牙签在自己漱净的口腔内侧壁上轻刮几下取细胞将载玻片在酒精灯下烘干防止污迹
2、干扰观察效果保持细胞原有形态消毒为防止感染，漱口避免取材失败杀死并固定装片；烘干时应来回移动，防止受热不均破裂水解将烘干的载玻片放入质量分数为8%的盐酸（HCl）溶液中，用300C水浴保温5min改变细胞膜的通透性，加速染色剂进入细胞促进染色体的DNA与蛋白质分离而被染色，细胞为死细胞冲冼涂片用蒸馏水的缓水流冲洗载玻片10S洗去残留在外的盐酸缓水流：防止细胞被冲走染色用吸水线除去多余的水分滴2滴吡罗红甲绿染色剂于载玻片上染色5minKS*5U.C#O%吸取染色剂除去多余的染色剂并盖上盖玻片观察先低倍镜观察：选择染色均匀、色泽浅的区域，移至视野中央，调节清晰后才换用高倍物镜观察：使观察效果最佳现
3、象细胞核大部分被染成绿色细胞质大部分被染成红色细胞核也有小部分被染成红色细胞质也有小部分被染成绿色结论DNA主要集中分布于细胞核中RNA主要集中分布于细胞质中在细胞质中也有DNA分布在细胞核中也有RNA分布实验二： 检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质（必修一P18）一实验目的：尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质水浴加热二实验原理：某些化学试剂能使生物组织中的有关有机化合物，产生特定的颜色反应。1还原糖（如葡萄糖、果糖、麦芽糖）+ 斐林试剂 砖红色沉淀。使用时：甲乙液等量混匀后立即使用斐林试剂 甲液：0.1g/ml NaOH 溶液 乙液：0.05g/ml CuSO4 溶液实质：是还原
4、糖（全部单糖、麦芽糖、果糖、乳糖）与新制的Cu ( OH ) 2反应生成砖红色氧化亚铜（Cu 2O）。2脂肪可以被苏丹染液染成橘黄色（或被苏丹染液染成红色）。3蛋白质与双缩脲试剂发生作用，产生紫色反应。（蛋白质分子中含有很多肽键，在碱性NaOH溶液中能与双缩脲试剂中的Cu2+作用，产生紫色反应。）使用时：先加A液后加B液双缩脲试剂 A液：0.1g/ml NaOH 溶液 B液：0.01g/ml CuSO4 溶液实质：在碱性条件下，肽键结构与铜离子反生络合反应，生成紫色络合物。 4. 淀粉遇碘变蓝色。KS*5U.C#O%三实验材料1做还原糖鉴定实验：应选含糖高，颜色为白色或近白色的植物组织，如苹果
5、、梨。（因为组织的颜色较浅，最好无色，防止颜色干扰且易于观察。）2做脂肪的鉴定实验：应选富含脂肪的种子，以花生种子为最好，实验前一般要浸泡34小时（也可用蓖麻种子）。3做蛋白质的鉴定实验：可用富含蛋白质的黄豆或鸡蛋清等。四、实验试剂斐林试剂、苏丹或苏丹染液、双缩脲试剂、体积分数为50%的酒精溶液，碘液、蒸馏水。五、方法步骤（一）可还原糖的鉴定操 作 方 法注 意 问 题解 释1. 制备组织样液。（去皮、切块、研磨、过滤）苹果或梨组织液必须临时制备。要取组织的颜色较浅，最好无色，易于观察。因苹果多酚氧化酶含量高，组织液很易被氧化成褐色，将产生的颜色掩盖。2. 取1支试管，向试管内注入2mL组织样
6、液。3. 向试管内注入1mL新制的斐林试剂，振荡（此时呈现斐林试剂的颜色：浅蓝色）。应将组成斐林试剂的甲液、乙液分别配制、储存，使用前才将甲、乙液等量混匀成斐林试剂；切勿将甲液、乙液分别加入苹果组织样液中进行检测。斐林试剂很不稳定，易分解。甲、乙液分别加入时可能无Cu ( OH )2生成。4. 试管放在盛有50-650C温水的大烧杯中，加热约2分钟，观察到溶液颜色：浅蓝色 棕色 砖红色（沉淀）最好用试管夹夹住试管上部，使试管底部不触及烧杯底部，试管口不朝向实验者。也可用酒精灯对试管直接加热。防止试管内的溶液冲出试管，造成烫伤；缩短实验时间。留适当样液与反应后溶液做对照，结论：组织样液中含有还原
7、糖（二）脂肪的鉴定显微镜观察法操 作 方 法注 意 问 题解 释花生种子浸泡、去皮、切下一些子叶薄片，将薄片放在载玻片的水滴中，用吸水纸吸去装片中的水。干种子要浸泡34小时，新花生的浸泡时间可缩短。因为浸泡时间短，不易切片，浸泡时间过长，组织较软，切下的薄片不易成形。切片要尽可能薄些，便于观察。 KS*5U.C#O%取最理想的薄片，放在载玻片中央在子叶薄片上滴23滴苏丹或苏丹染液，染色1分钟。染色时间不宜过长。用吸水纸吸去薄片周围染液，用50%酒精洗去浮色，吸去酒精。酒精用于洗去浮色防止浮色影响对橘黄色脂肪滴的观察。酒精是脂溶性溶剂，可将花生细胞中的脂肪颗粒溶解成油滴。用吸水纸吸去薄片周围酒精
8、，滴上12滴蒸馏水，盖上盖玻片。滴上清水可防止盖盖玻片时产生气泡。低倍镜下找到花生子叶薄片的最薄处，可看到细胞中有染成橘黄色或红色圆形小颗粒。装片不宜久放。时间一长，油滴会溶解在乙醇中。花生种子匀浆 + 苏丹III染液 橘黄色 或 花生种子匀浆 + 苏丹IV染液 红色三、蛋白质的鉴定操 作 方 法注 意 问 题解 释制备组织样液（浸泡、去皮研磨、过滤。）黄豆浸泡1至2天，容易研磨成浆，也可购新鲜豆浆以节约实验时间。鉴定：加样液约2ml于试管中加入双缩脲试剂A，摇匀再加入双缩脲试剂B液34滴，摇匀 溶液变紫色A液和B液也要分开配制，储存。鉴定时先加A液后加B液。CuSO4溶液不能多加。先加NaO
9、H溶液，提供一个碱性的环境。A、B液混装或同时加入，会导致Cu2+变成Cu ( OH ) 2沉淀，而失效。否则CuSO4的蓝色会遮盖反应的真实颜色。可用蛋清代替豆浆。蛋清要先稀释。如果稀释不够，在实验中蛋清粘在试管壁，与双缩脲试剂反应后会粘固在试管内壁上，使反应不容易彻底，并且试管也不易洗干净。留适当样液与反应后溶液做对照附：淀粉的检测和观察用试管取2ml待测组织样液，向试管内滴加2滴碘液，观察颜色变化。碘液不要滴太多以免影响颜色观察实验三：用显微镜观察多种多样的细胞（必修一P7）一实验目的（1）使用高倍显微镜观察几种细胞，比较不同细胞的异同点（2）运用制作临时装片的方法二实验原理：利用高倍镜
10、可以看到某些在低倍镜下无法看到的细胞结构，例如：可以看到叶绿体、线粒体等细胞器（能看到细胞器，无法看清细胞器结构），从而能够区别不同的细胞。显微镜 光学显微镜 细胞显微结构图：不能显示细胞器的内部结构 电子显微镜 细胞亚显微结构图：能显示细胞器的内部结构三显微镜的使用：不能直接使用高倍显微镜，一定是先低倍后高倍观察低倍显微镜的使用：取镜 安放 对光 压片 调焦 观察高倍显微镜的使用：在低倍镜下找到目标 移装片使观察对象位于视野中央 转动转换器换高倍镜 调焦 观察注：移中央：观察对象在哪往哪移；由低倍换高倍镜后一定不能转动粗准焦螺旋（容易压坏玻片），只需轻轻转动细准焦螺旋微调即可四相关问题镜头
11、物镜：有螺纹，镜头越长，放大倍数越大，距离装片的距离越近 目镜：无螺纹，镜头越长，放大倍数越小放大倍数 总放大倍数目镜放大倍数物镜放大倍数 显微镜放大倍数是指物体的长度与宽度放大倍数物像大小视野范围看到细胞数目视野亮度物镜与装片距离低倍镜小大多亮远高倍镜大小少暗近为什么要先用低倍镜观察清楚后，把要放大观察的物像移至视野的中央，再换高倍镜观察？提示：如果直接用高倍镜观察，往往由于观察的对象不在视野范围内而找不到。因此，需要先用低倍镜观察清楚，并把要放大观察的物像移至视野的中央，再换高倍镜观察。 KS*5U.C#O%五：讨论1.试归纳所观察到的细胞在结构上的共同点，并描述它们之间的差异，分析产生差
12、异的可能原因：答：共同点是：有细胞膜、细胞质和细胞核，植物细胞还有细胞壁。可能原因是：这些细胞的位置和功能不同，其结构与功能相适应，这是个体发育过程中细胞分化产生的差异2.低倍镜换为高倍镜后，若看不到或看不清原来的像，可能原因？（ABC） A、物像不在视野中 B、焦距不在同一平面 C、载玻片放反，盖玻片在下面 D、未换目镜3.污点判断：(1）污点随载玻片的移动而移动，则位于载玻片上；(2）污点不随载玻片移动，换目镜后消失，则位于目镜；换物镜后消失，则位于物镜；(3）污点不随载玻片移动，换镜后也不消失，则位于反光镜上。实验四：用高倍镜观察线粒体和叶绿体（必修一P47）一、实验目的 使用高倍镜观察
13、叶绿体和线粒体的形态分布。二、实验原理叶肉细胞中的叶绿体：因其本身含有色素，呈绿色故不需染色，呈扁平的椭圆球形或球形。线粒体：本身无色，需染色体才能观察到。线粒体+健那绿染液 蓝绿色健那绿染液是专一性染线粒体的活细胞染料，染色后细胞仍然是活的。三、实验材料观察叶绿体时选用：藓类的叶、黑藻的叶。取这些材料的原因是：叶子薄而小，叶绿体清楚，可取整个小叶直接制片，所以作为实验的首选材料。（若用菠菜叶作实验材料，要取菠菜叶的下表皮并稍带些叶肉。因为表皮细胞不含叶绿体。）观察线粒体时选用：人口腔上皮细胞或紫色洋葱鳞片叶内表皮细胞（无色）四、方法步骤实验步 骤注 意 问 题分 析观察叶绿体1制片：用镊子取一片黑藻的小叶，放入载玻片的水滴中，盖上盖玻片。制片和镜检时，临时装片中的叶片不能放干了，要随时保持有水状态否则细胞或叶绿体失水收缩，将影响对叶绿体形态和分布的观察。2低倍镜下找到叶片细胞3高倍镜下观察叶绿体的形态和分布观察线粒体1制作人的口腔上皮细胞临时装片在洁净载玻片中央滴一滴健那绿染液用牙签取口腔上皮细胞盖盖玻片健那绿染液是活细胞染料（不影响细胞生命）2低倍找到口腔上皮细胞后，换高倍镜观察线粒体蓝绿色的是线粒体，细胞质接近无色。专一性染线粒体的五、讨论1、细胞质基质中的叶绿体，是不是静止不动的？为什么？答：不是
