实验常用染料

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1、实验室常用染料性能介绍及常用药品试剂和培 养基 的配制（一）2007-05-30 16:13生物标本常用染料性能简介（一）天然染料1、苏木精 苏木精是从南美的苏木 （热带豆科植物） 干枝中用乙醚浸制出来的一 种色素，是最常用的染料之一。苏木精不能直接染色，必须暴露在通气的地方， 使他变成氧化苏木精 （又叫苏木素）后才能使用，这叫做“成熟”。 苏木精的“成 熟”过程需时较长， 配置后时间愈久， 染色力愈强。 被染材料必须经金属盐作媒 剂作用后才有着色力。 所以在配制苏木精染剂时都要用媒染剂。 常用的媒染剂有 硫酸铝按、钾明矾和铁明矾等。苏木精是淡黄色到锈紫色的结晶体， 易溶于酒精， 微溶于水和甘

2、油， 是染细胞核 的优良材料， 他能把细胞中不同的结构分化出各种不同的颜色。 分化时组织所染 的颜色因处理的情况而异，用酸性溶液（如盐酸酒精）分化后呈红色，水洗后 仍恢复青蓝色，用碱性溶液（如氨水）分化后呈蓝色，水洗后呈蓝黑色。2、洋红 洋红又叫胭脂红或卡红。一种热带产的雌性胭脂虫干燥后，磨成粉末， 提取出虫红，再用明矾处理， 除去其中杂质，就制成洋红。单纯的洋红不能染色， 要经酸性或碱性溶液溶解后才能染色。 常用的酸性溶液有冰醋酸或苦味酸， 碱性 溶液有氨水、硼砂等。洋红是细胞核的优良染料，染色的标本不易褪色。用作切片或组织块染都适宜， 尤其适宜于小型材料的整体染色。 用洋红配成的溶液染色后

3、能保持几年。 洋红溶 液出现浑浊时要过滤后再用。（二）人工染料 人工染料，即苯胺染料或煤焦油染料，种类很多，应用极广。它的缺点是经日光 照射容易褪色，苯胺蓝、亮绿、甲基绿等更易褪色。在制片中注意掌握酸碱度， 并避免日光直射，也能经几年不褪色。1、酸性品红 酸性品红是酸性染料， 呈红色粉末状，能容于水，略溶于酒精（0.3%）。 他是良好的细胞制染色剂，在动物制片上应用很广，在植物制片上用来染皮层、 髓部等薄壁细胞和纤维素壁。他跟甲基绿同染，能显示线粒体。组织切片在染色前先浸在带酸性的水中， 可增强它的染色力。 酸性品红容易跟碱 起作用，所以染色过度，易在自来水中褪色。2、刚果红 刚果红是酸性染料

4、， 呈枣红色粉末状， 能溶于水喝酒精， 遇酸呈蓝色。 他能作染料，也用作指示剂。 他在植物制片中常作为苏木精或其他细胞染料的衬 垫剂。他用来染细胞质时， 能把胶制或纤维素染成红色。 在动物组织制片中用来 染神经轴、弹性纤维、胚胎材料等。刚果红可以跟苏木静作二重染色，也可用作 类淀粉染色，由于他能溶于水和酒精，所以洗涤和脱水处理要迅速。3、甲基蓝 甲基蓝是弱酸性染料， 能溶于水和酒精。 甲基蓝在动植物的制片技术 方面应用极广。他跟伊红合用能染神经细胞，也是细菌制片中不可缺少的染料。 它的水溶液是原生动物的活体染色剂。 甲基蓝极易氧化， 因此用他染色后不能长 久保存。4、固绿 固绿是酸性染料，能溶

5、于水（溶解度为 4%）和酒精（溶解度为 9%）。 固绿是一种染含有浆质的纤维素细胞组织的染色剂， 在染细胞和植物组织上应用 极广。他和苏木精、番红并列为植物组织学上三中最常用的染料。5、苏丹川 苏丹川是弱酸性染料，呈红色粉末状，易溶于脂肪和酒精（溶解度为 0.15%）。苏丹川是脂肪染色剂。6伊红这类染料种类很多。常用的伊红 Y,是酸性染料，呈红色带蓝的小结晶 或棕色粉末状，溶于水（ 15 摄氏度是溶解度达 44%）和酒精（溶于无水酒精的溶 解度为 2%）。伊红在动物制片中广泛应用，是很好的细胞质染料，常用作苏木 精的衬染剂。7、碱性品（复）红 碱性品红是碱性染料， 呈暗红色粉末或结晶状， 能溶

6、于水（溶 解度 1%）和酒精（溶解度 8%）。碱性品红在生物学制片中用途很广，可用来染 色胶原纤维、 弹性纤维、嗜复红性颗粒和中枢神经组织的核质。 在生物学制片中 用来染维管束植物的木质化壁， 又作为原球藻、 轮藻的整体染色。 在细菌学制片 中，长用来鉴别结核杆菌。在 尔根氏反应中用作组织化学试剂，已核查脱氧核 糖核酸。8、结晶紫 结晶紫是碱性染料， 能溶于水（溶解度 9%）和酒精（溶解度 8.75%）。 结晶紫在细胞学、 组织学和细菌学等方面应用极广， 是一种优良的染色剂。 他是 细胞核染色常用的，用来显示染色体的中心体，并可染淀粉、纤维蛋白、神经胶 质等。凡是用番红和苏木精或其他染料染细胞

7、核不能成功时， 用它能得到良好的 结果。用番红和结晶紫作染色体的二重染色， 染色体染成红色， 纺锤丝染成紫色， 所以也是一种显示细胞分裂的优良染色剂。 用结晶紫染纤毛， 效果也很好。 用结 晶紫染色的切片，缺点是不易长久保存。9、龙胆紫 龙胆紫是混合的碱性染料， 主要是结晶紫和甲基紫的混合物。 在必要 是，龙胆紫能跟结晶紫互相替用。医药上用的紫药水，主要成分是甲基紫，需要 时能代替龙胆紫和结晶紫。10、 中性红 中性红是弱碱性染料，呈红色粉末状，能溶于水（溶解度4%）和酒 精（溶解度 1.8%）。它的碱性溶液中呈现黄色，在强碱性溶液中呈蓝色，而在 弱酸性溶液中呈红色，所以能用作指示剂。中性红无

8、毒，常做活体染色的染料， 用来染原生动物和显示动植物组织中活细胞的内含物等。陈久的中性红水溶液， 用作显示尼尔体的常用染料。11、番红 番红是碱性染料，能溶于水和酒精。番红是细胞学和动植物组织学生 常用的染料，能染细胞核、染色体和植物蛋白质，示维管束植物木质化、木栓化 和角质化的组织，还能染孢子囊。12、亚甲蓝或美蓝 亚甲蓝或美蓝是碱性染料，呈蓝色粉末状，能溶于水（溶解 度 9.5%）和酒精（溶解度 6%）。亚甲蓝是动物学和细胞学染色上十分重要的细 胞核染料，其优点是染色不会过深。13、 甲基绿 甲基绿是碱性染料。它是绿色粉末状，能溶于水（溶解度8%）和酒 精（溶解度 3%）。甲基绿是最有价值

9、的细胞和染色剂，细胞学上常用来染染色 质，跟酸性品红一起可作植物木质部的染色。把硫酸铜溶液缓缓倒入柠檬酸钠 - 碳酸钠溶液中，边加边搅拌，如果产生沉淀， 要过滤。本尼迪克溶液配制后能长期使用 （存放时间较久而产生沉淀是， 取上层 清液使用，不必重新配制）。本尼迪克溶液用来测试食物、血液和尿中的葡萄糖，可测出 0.150.20%的葡 萄糖。这种溶液跟未知物同加热时， 如果未知物中有葡萄糖， 会形成红色的氧化 亚铜沉淀物。配方二 裴林（ Fehling ）溶液（1）把 34.5 克硫酸铜溶于 500毫升蒸馏水中。（2）把 125 克氢氧化钾（钠）和 173克酒石酸钾钠溶解在 500毫升蒸馏水中。

10、上述两种溶液应分别保存。 在检测葡萄糖时， 使他们等量的混合， 加入待测物的 试管内，加热到沸腾。如果有葡萄糖，会形成红色的氧化亚铜沉淀物。2、检查淀粉的试剂鲁哥氏（Lugol s）溶液（碘液）取 6 克碘化钾溶于 20 毫升蒸馏水中，搅拌到溶解后，加入 4 克碘，等碘充分溶 解，在加入 80 毫升蒸馏水，贮存在棕色试剂瓶内。碘液用来测试食物样品或叶片中的淀粉， 也用作染色剂， 例如可染色鞭毛、 纤毛 和细胞核等。3、检查蛋白质的试剂配方一 米伦（ Millon ）试剂在 60 毫升浓硝酸（比重 1.42 ）中溶解 40 克汞（水浴加温可助溶），溶解后加 入两倍体积的蒸馏水稀释， 静置澄清后，

11、 取它上层的清液备用。 这种试剂可长期 保存。在待测物中加入少量米伦试剂，加热，如果有蛋白质，会出现红色。这种试剂不 能用来测定尿中的蛋白质。配方二 双缩尿试剂分别配制 10%氢氧化钠溶液和 1%硫酸铜溶液。在3毫升待测物中加入 1毫升 10%氢氧化钠溶液和 1滴 1%硫酸铜溶液。如果有蛋 白质，会出现紫色反应。4、检查脂肪的试剂苏丹m（w）酒精饱和溶液取0.2克苏丹川（或苏丹W）,放入纯酒精中，加热，使它充分溶解，成为饱和 酒精溶液，过滤后密闭在试剂瓶内保存备用。5、酸碱指示剂配方一 酚酞试剂和试纸酚酞试剂 取 1 克酚酞，溶解在 100 毫升 60%的酒精溶液里，装在试剂瓶内密闭 保存。酚

12、态试纸 取 1 克酚酞，溶解在 100 毫升 95%酒精溶液里，加入 00 毫升蒸馏水。 把绿纸条放入酚酞溶液中浸湿后，取出，放在无氨气影响处晾干。酚泰试剂（试纸）pH值变色范围8.210,在酸性和中性溶液中都无色，再碱 性溶液中呈深红色。配方二 红蓝石蕊试纸取市售石蕊 1 克，放在 80 毫升 10%酒精溶液中搅拌，使它溶解，然后过滤。把 滤液分成两份。 1 份滴入稀磷酸或稀硫酸，到出现红色为止。另 1 份滴入稀氢氧 化钠溶液， 到出现蓝色为止。 在上述制备的溶液中分别浸湿滤纸条， 随后取出滤 纸条，放在蔽光处、无酸碱性气体影响的地方晾干，即的红、蓝两种石蕊试纸。 红石蕊试纸在碱性溶液中变蓝

13、，蓝石蕊试纸在酸性溶液中变红。6、检查二氧化碳的试剂 检查二氧化碳的试剂，可用溴代麝香草酚蓝溶液和石灰水。配方一 溴代麝香草酚蓝溶液取0.1 克溴代麝香草酚蓝，溶解在 100毫升蒸馏水里，滴入少量 0.1%氢氧化钾 溶液，使它成为弱碱性溶液而呈蓝色。溴代麝香草酚蓝溶液pH值变色范围是6.0 （黄）7.6 （蓝）。待测物中如果有 二氧化碳，会形成碳酸而使溶液变成黄色。配方二 石灰水 在蒸馏水中加入生石灰（氧化钙），变加边搅拌，直到加入的生石灰不再溶解， 呈饱和状态时为止。在石灰水澄清后，倾出上层清液，用滤纸过滤，放在密闭瓶 内保存。如果测定的物质中有二氧化碳，会生成碳酸钙，使石灰水变浑浊。7、检

14、查细胞生活力的试剂 检查细胞有无生活力，可用中性红甲基蓝试剂。配制的方法是先分别配制1%中性红溶液和 1%甲基蓝溶液，这两种溶液各取 1 份混合，用来鉴定细胞的死活。 该试剂使活细胞的液泡染上红色，而使死细胞全部染成蓝色（二）分离液1、肌细胞分离液配方一马克凯郎（Maccallum ）液取 1份浓硝酸、 2份甘油、 3份水，混合后就得到马克凯郎液。 把新鲜的肌肉组织小块（横纹肌、心肌和平滑肌）投入这种溶液里浸渍，分离时 间需13日。这种溶液尤其适于分离横纹肌核心肌细胞。配方二 氢氧化钾溶液取 35 克氢氧化钾，放在 100 毫升蒸馏水中，加热，使它完全溶解后，在室温下 冷却。把新鲜的肌肉组织块

15、投入氢氧化钾溶液中，浸泡1530 分钟后，肌细胞便可分离。2、上皮细胞分离液配方一 福尔马林氯化钾溶液称取 58.44 克氯化钠，用蒸馏水溶解，再稀释到 1 000毫升，加入 2 毫升福尔马 林。这种溶液是很好的上皮细胞分离液， 分离很迅速， 而且能保护纤细的上皮细胞纤 毛。小肠和气管的上皮组织小块， 放在此溶液里 2小时即可分离， 口腔和皮肤上 皮组织小块的细胞分离一般需 3 日左右。配方二 水和氯醛溶液称取 5 克水和氯醛，用蒸馏水溶解，再稀释到 100 毫升，就得到 5%水合氯醛溶 液。从洗净的动物胃、 肠和口腔内壁上取下上皮组织一小块， 投入以上溶液中， 浸泡 2448 小时。3、神经

16、细胞分离液配方一 可以用上皮细胞分离液配方一福尔马林氯化钠溶液来分离神经细胞 （见 2 ）。配方二 硼酸生理盐水溶液 在生理盐水溶液内加入一些硼酸，搅拌到不再溶解时为止，使成为饱和溶液。 把脊椎灰质和脑皮质部位的神经组织一小块投入这种溶液中分离。4、植物茎细胞分离液杰弗里氏（Jeffrey s）液取等量的 10%铬酸溶液和 10%硝酸溶液混合，成铬酸硝酸溶液。 这种溶液用来分离木本植物茎部的导管、管胞、筛管、伴胞和韧皮纤维等。把材 料切成小块放在水里，加热煮沸，冷却后再加热煮沸。这样重复几次，到材料全 部沉于水底后，投入分离液内，分离时间是 2448小时。5、植物根尖细胞分离液 配方一 盐酸酒精溶液在 1 份 95%酒