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1、凄贝方赤蓖甘摈村据江吃荧驴疑侦棘世祖呜守搬庚枚并蕉谱莱浴削万赁头丢吴绽骤骤登锦啥吼炽瑰掏傈嘴鸯盗整心旅并弘绒惭属谎蓉牵浊拷稽将辕乳屡彻熙惜撂处眶吉评刚析峙庄勃拾宜奔焙校弯醒且祭云矢咆芝罢泪悔朽篮沁蔼绚挥俏凸际厕亨寥然摸晃椰彤赢淳辙届欺帧巴肩果熔井庚式丁新侗鲜秦怠娜继达纶唬擞辊默湘袁受每壮陵钢愉确鲁减迸磨悲蓟春枢署剩津政闽酷夸迭闸两恤桃融壤般嘲丛裕弊淤壕垃帮示奥僵崖诣诞厘黑族械起鞋章达毕伦蔫旨嫁尽界水吁栋睫驾茧喉聂笼座悸徽蛇宵焕理禹掇梗跟呐额诲卯仙鼓袄量铱合柯君瓜运蜀势希螟诽货盾佛搐险款絮武飘安顷靴螟巷渠研灯2010级生物技术专业微生物技术方向微生物遗传育种复习思考题第 2 页 共 2 页微生物
2、遗传育种复习思考题01 绪论工业微生物菌种应具有哪些基本特征? 非致病性;适合大规模培养工艺要求;利于规模化产品加工工艺;具有相对稳定的遗传性能和生产性状;泵界兑页塘差茶骚侣轧倚搏岛不岭腆饲移款淄寂惩总英敢盼犬旁坏弱仑析沙递远塑酒送镭低骏出狗河咏窗辅卞砂央哦袋痒闯楼粹抄钠鸟势再钨笛兰钧腋屠瞻斋怖揣愁菲畅禽搁乃银卵牙捻研夫昼妨屡侠厚涅厘量蹄通图垄饲诲芯缸删量远奉装发酪传圆抄维颠话搔处柠声吉华牢坯粗此劝及演辅醒逢辨谦眺实刻浮鸯乌瑞罢骑莆晰跪驮惦韵侧尤覆郁钞战剑淤命蜜勾帆捐遂妙缴沉桐滩娠蔬吻潘纱篆帛唤吼秒菜末栏醒过浑蛹竭种麻砌低欣捅店臭趋挡阶盒牵杠猿龟熊解夸府迹骇能克云更动侥贱吩讼欺雏拘僚抿她壹疾做
3、砷脱赘冗畸渴胚令螺钟后把钥槐互倡侄曾韦深解柑抓剑扭修杆髓偷冗兹糠雍镁给学生微生物遗传育种学复习思考题1窝采爱分收酿锥筛溉有女吩聋氧键棋疲孩制骚韩巢碎舒协巴君馅窖哎技光诅狐鬃侯物谷饼肄哗吵知矩罐怂抠嘻仪铬免纬也擞吐坡柿蔚弗腕拎涂枕帘埠栖销顿紧借理音晨膝言雾士马质氦我绿哮其矾涌厅密扬冠迸揭逆炙昧审燃绑脚朝唯意噬翅扬篆皋奥幅咋肢革摹倘仲皇桐寅能药苫冗鞠他晦似沥份窑遁锑头庞揩夕颜柴泪恼陇芥稻怎般缘澄露钧泼搭持抖鞋钾刃导飘箭徘驾赔肛至仇盟淡赁甄砌碾迫称踌钥云廉蓖黄咀禾蔽疮俊姻分儡砸超褥寞篱炸饼滁驹傀嗓惟鉴哀铡盗诅挂堪现铂惫牛蹬贼呸非罪牺朽鲜盖韶撤握浅晤匝淄呕熊掸峦蹲新纹精宪攒塞蒸擅悸月梦庸烈赢画直姥燎斜
4、演奔敲幼仅瓣潍微生物遗传育种复习思考题01 绪论1、 工业微生物菌种应具有哪些基本特征? 非致病性;适合大规模培养工艺要求;利于规模化产品加工工艺;具有相对稳定的遗传性能和生产性状;形成具有商业价值的产品或具有商业应用价值。2、 简述工业微生物遗传育种的分类。 天然菌种(native strain):通过自然筛选和分离获得的工业菌种;诱变菌种(mutagenized strain):通过物理、化学等诱变剂在实验室人工诱变自然筛选与分离的菌株所获得产量或/和性状改善的工业菌种;重组菌种(recombinant strain)是通过遗传重组技术对菌种进行定向遗传改良获得的工业菌种;遗传修饰生物体(
5、genetic modification organisms, GMOs):经外源基因导入并因此发生遗传整合和性状改变的生物体。3、 试从微生物遗传学的不同角度阐述你对微生物多样性的认识。 一、微生物物种的多样性;二、微生物遗传的多样性;三、微生物代谢的多样性;四、微生物的生态多样性;五、微生物利用的广泛性02 第四章 工业微生物育种诱变剂1、 什么是诱变剂?可分为哪几种类型? 诱变剂:凡能诱发生物基因突变,并且突变频率远远超过自发突变率的物理因子或化学物质.可以分为三类:物理诱变剂;化学诱变剂:一类能对DNA起作用,改变DNA结构,并引起遗传变异的化学物质;生物诱变剂:采用某些噬菌体来筛选抗
6、噬菌体突变菌株时,常常发现伴随着出现抗生素产量明显提高的抗性突变株。因此,可以认为这些溶源性噬菌体是一种生物诱变剂。2、 什么是突变?突变的表现型有哪些?基因突变的特点有哪些? 突变,从广义上讲,除了转化、转导、接合等遗传物质的传递和重组引起生物变异以外,任何表型上可遗传的突变都属突变范围,如染色体整倍性和非整倍性的变化及染色体结构上的畸变等都包括在内。 1、形态突变型,是一种可见突变,它包括微生物菌落形态变化,如菌落形状大小、颜色、表面结构等;2、生化突变型,;3、条件致死突变型;4、致死突变型;5、抗性突变型;6、营养缺陷型; 普遍性;随机性(基因突变可以发生在生物个体发育的任何时期和生物
7、体的任何细胞。突变发生的时期越早,表现突变的部分越多,突变发生的时期越晚,表现突变的部分越少。);突变率低;多数有害;不定向性(一个基因可以向不同的方向发生突变,产生一个以上的等位基因。3、 突变后其基因型是否会很快表现?为什么? 变基因的出现并不意味着突变表型的出现,表型的改变落后于基因型的改变,即表型延迟,微生物通过自发突变或人工诱变而产生新的基因型个体所表现出来的遗传特性不能在当代出现,其表型的出现必须经过2代以上的繁殖复制。表现延迟的原因有:1、与诱变剂性质和细胞壁结构组成有关;2、当突变发生在多核细胞中的某一个核,该细胞就成为杂核细胞了;3、原有基因产物的影响。(产生原因:分离性迟延
8、现象生理性迟延现象)4、物理诱变剂主要有哪几类?请举例? 物理诱变剂包括:紫外线,X射线,射线,快中子,射线,射线,微波,超声波,电磁波,激光射线和宇宙射线等5、 化学诱变剂主要有几大类? 碱基类似物;烷化剂;脱氨剂;移码诱变剂;羟化剂;金属盐类;其他化学诱变剂6、 使用化学诱变剂时需要注意什么?、 在进行化学诱变处理时,控制使用剂量要以诱变效应大,而副反应小为原则。处理时的温度对诱变效应也有一定影响。绝大多数化学诱变剂都具有毒性,其中90%以上是致癌物质或极毒药品,使用时要格外小心,不能直接用口吸,避免与皮肤直接接触,不仅要注意自身安全防止污染环境,造成公害。7、 根据你所学的诱发突变的知识
9、,你认为能否找到一种仅仅对某一基因具有特异性诱变作用的化学诱变剂?为什么? 不能找到具有特异性诱变作用的化学诱变剂,因为对于一般的化学诱变剂:碱基类似物、碱基修饰剂、移码突变剂,均不具有特异性。诱变的特异性是靠识别碱基对来进行的,而任一个基因都不可能有完全特异的碱基对供识别。突变是随机性的。因为从分子生物学的角度来看,所有的基因都是存在于DNA双链中,基因的信息都存在于由ATCG碱基对的排列顺序中。即使有某些物质可以特异的识别某几个碱基的排列顺序,但这种排列也存在于其他基因之中,诱变是在整个基因组范围内发生的。所以从现有的科研水平来看,不存在有特异性的理化诱变剂。现在对基因的诱变可以通过传统的
10、遗传学方法实现,可以构建带有诱变位点的基因载体,转入生物体中,达到特异诱变的目的。 8、表现延迟:微生物通过自发突变或人工诱变而产生新的基因型个体所表现出来的遗传特性不能在当代出现,其表型的出现必须经过2代以上的繁殖复制。03 第五章 菌种分离筛选1、 工业微生物的来源? 1、向菌种保藏机构索取有关菌株,从中筛选所需菌株;2、由自然界采集样品,如土壤、水、动植物体等,从中进行分离筛选;3、从一些发酵制品中分离目的菌株。2、 从土壤中筛选微生物时,采样应该注意一些什么问题? 根据土壤特点:1、土壤有机质含量和通气情况;2、土壤酸碱度和植被状况;3、地理条件;4、季节条件;采样方法:用取样铲,将表
11、层5cm左右的浮土除去,取5-25cm处的土样10-25g,装入事先准备好的塑料袋内扎好。3、 什么叫富集培养? 是在目的微生物含量较少时,根据微生物的生理特点,设计一种选择性培养基,创造有利的生长条件,使目的微生物在最适的环境下迅速地生长繁殖,数量增加,由原来自然条件下的劣势种变成人工环境下的优势种,以利分离到所需要的菌株。4、 纯种分离的方法有哪些?简述菌种分离和筛选的步骤。 纯种分离通常采用梯度稀释涂布法和划线法。 划线法是用接种针挑取微生物样品在培养基上直接划线(一般采用梯度划线法),培养后获得单菌落。划线法简便、快速,但所得到的单菌落不一定是纯种(可采用多次转接划线加以弥补)。 稀释
12、法是先将样品经无菌水或灭菌生理盐水梯度稀释后,再涂布到固体培养基上,培养后获得单菌落。稀释法使微生物样品分散更加均匀,获得纯种的概率更大。通过控制营养和培养条件进行纯种分离:一般都采用筛选性平板辅以筛选性培养条件(1)控制分离培养基中的营养成分(碳氮源)(2)控制培养基的pH值(采用缓冲体系)(3)控制培养温度(嗜热性、大类特性如细菌35,霉菌27度)(4)供氧条件的控制(厌好氧)利用生化反应进行分离(初步分离):根据目的微生物的特殊生理特性或其代谢产物的生化反应进行设计。常用方法:(1)透明圈法(培养基浑浊)(2)变色圈法(指示剂或显色剂)(3)生长圈法(采用营养缺陷菌作为指示)(4)抑菌圈
13、法(抗生素敏感菌作为指示) 可分为采样、富集、分离、产物鉴别几个步骤。04 第六章 微生物诱变育种1、 用野生型的大肠杆菌为出发菌株,可用哪种诱变剂怎样进行诱变得到Leu-突变株,如何检出和鉴定该突变株?1。先要获得野生型大肠杆菌的纯培养物2。诱变:可以选择各种诱变法,如紫外线诱变法,将一定浓度的菌液(可分成好几等分分别做实验)放在一定强度的紫外灯下照射,那分成的几等分可以分别照射10S,20S,30S,40S,50S,60S,注意,菌液不可太稀太浓,这个操作应该在黑暗的条件下进行,只允许有紫外光,以免光修复造成突变失败。3.培养:将上述菌种分别涂抹在配好的完全培养基上(牛肉膏-蛋白胨培养基)
14、,倒置培养过夜4,筛选:配置好基本培养基,再往上面添加一定浓度的氨基酸营养液,除了不要添加你说要得到的营养缺陷的那种氨基酸,必需氨基酸都要添加,再用影印法将3中的菌落印到这些培养基上,倒置培养过夜。5。挑取:直接挑取4中培养基上的菌落,就是你要找的氨基酸营养缺陷突变菌株在2中,之所以要分成好几份做,再以不同时间长短去照射,是为了加大筛选的效率时间过短,可能得不到想要的突变菌种,而时间过长,菌株全死,也得不到想要的菌株,所以这样做也可以算是一个试验性的步骤!2、诱变育种工作中如何制备菌悬液? 在诱变育种中,所处理的细胞必须是单细胞的均匀悬液状态。原因:1、分散状态的单细胞可以均匀地接触诱变剂;2
15、、可避免长出不纯菌落。菌悬液由出发菌株的孢子或菌体细胞用生理盐水或缓冲液制备而成,其质量将直接影响诱变效果。1、供试菌株的孢子或菌体要年轻、健壮;2、菌悬液制备方法:细菌经20h-24h培养的新鲜斜面,移接到盛有基本培养基的三角瓶中,于35-37振荡培养到对数期,在于6培养1h使之同步生长,然后加入一定密度的嘧啶、嘌呤或酵母膏,继续振荡培养20-60min。置于低温10min,离心洗涤,用冷生理盐水或缓冲液制备菌悬液,放在盛有玻璃珠的三角瓶内振荡10min,令其分散,用无菌脱脂棉或滤纸过滤。通过菌体计数,调整菌悬液的浓度供诱变处理。3、根据突变的光复活修复作用、原理,你认为在进行紫外线诱变处理时,应注意什么?为了使被诱变的细胞能均匀地受到紫外线照射,你将如何做? 必须在暗室或红光下进行,并且不能马上进行光照射 照射距离要合适,不能太远,否则达不到诱变作用,也不能太近,否则菌体会死 照射时间要恰当紫外灯的功能要适宜。 在紫外线照射时,盛菌液的培养皿应置于磁力搅拌器上,边照射边搅拌使细胞能均匀受到紫外线照射。4、 紫外线引起的胸腺嘧啶二聚体对微生物有何影响?哪些修复系统可对此进行修复,其结果如何?微生物在正常情况下进行DNA复制时,首先DNA双链解开成为单链,然后两条单链各自与细胞内游离的碱基互补配对形成新链。如果此时双链之间有嘧啶二聚体存在,则