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1、 粗茶中茶多糖的提取和测定的分析论文1实验部分1.1仪器和试剂仪器:722型可见分光光度计(上海光学仪器),KQ-500VDB双频数控超声清洗器(昆山市超声仪器有限公司);超纯水机(南京易普易达科学发展有限公司);电子天平(赛多利斯利科仪器(北京)有限公司)等。试剂:无水乙醇,蒽酮,浓硫酸,葡萄糖,丙酮,无水乙醚等,所用的化学试剂均为分析纯。1.2茶多糖的提取粗老茶叶-烘干-研磨-温水浸提-过滤-浓缩-乙醇沉淀-静置-离心-无水乙醇、丙酮、无水乙醚交替洗涤-烘干-茶多糖粗成品。称取10 g粗茶,60 度干燥2 h,磨碎过40-50目筛,温水浸提(80 度 ,80 min, 3次),过滤,减压浓
2、缩,沉淀剂,95%乙醇沉淀,离心(4000 r/min,10 min)得沉淀物,用无水乙醇、丙酮、无水乙醚交替搅拌洗涤2次干燥(60 度, 4 h),得粗茶多糖,称量。1.3蒽酮-硫酸试液的配制称取0.30 g蒽酮,加100 mL浓硫酸,置于棕色试剂瓶中,摇匀后置于冰箱中。1.4标准曲线的绘制称取无水葡萄糖标准品适量,加蒸馏水配成1.008 mg/mL的标准溶液。精密移取标准溶液1.0. 2.0. 4.0. 6.0. 8.0. 10.0 mL分别置于100 mL容量瓶中,各加水至刻度,摇匀。分别精密移取上述标准溶液各2.0 ml置具塞试管中,以2 mL蒸馏水作空自,每管再加8 mL蒽酮-硫酸试
3、液,立即摇匀,冰水浴冷却。沸水浴中加热7 min,流动水冷却至室温,10 min后在560 nm处测定吸光度,以吸光度(A)对葡萄糖浓度(C)作回归处理,得回归方程:C=105.0383 A-7.2499, r=0.9995 。1.5换算因子的测定1.6茶多糖的测定2 结果与讨论2.1茶多糖提取最佳条件选择选择浸提时间、浸提温度、料液比三个因素、三个水平,进行茶多糖提取最佳条件的选择。2.2重复性精确称取粗老茶叶1g,按照1.6项下方法处理后重复测定6次分别计算茶叶多糖含量,RSD=0.54,表明精密度良好。2.3稳定性精确吸取1.6项下制取茶多糖样品液1 mL于具塞试管中,每间隔1h测定溶液的吸光度,RSD=0.23 %(n=5),在5h内显色稳定。2.4加样回收率精确称取3份粗老茶叶各1g,加入精制茶叶多糖约20 mg,按1.6项下方法测定茶叶多糖含量,计算回收率,回收率范围为98.86%-102.32%。3结论本实验采用蒽酮-硫酸法测定粗老茶叶中茶多糖的含量,方法快速、准确、灵敏。由正交设计得出茶多糖提取的最佳工艺,结果表明粗老茶叶中茶多糖含量较高。