色谱常见的问题

上传人:公**** 文档编号:459801456 上传时间:2024-02-03 格式:DOC 页数:6 大小:39KB
返回 下载 相关 举报
色谱常见的问题_第1页
第1页 / 共6页
色谱常见的问题_第2页
第2页 / 共6页
色谱常见的问题_第3页
第3页 / 共6页
色谱常见的问题_第4页
第4页 / 共6页
色谱常见的问题_第5页
第5页 / 共6页
点击查看更多>>
资源描述

《色谱常见的问题》由会员分享,可在线阅读,更多相关《色谱常见的问题(6页珍藏版)》请在金锄头文库上搜索。

1、跳槽面试常遇到的经典提问作者:徐州招聘发布时间:2012年7月12日来源:徐州招聘-徐州英才网企业招聘人员肯定是希望应聘者一旦入职,就能够在公司长期稳定的发展,避免人员的流失,所以对于有跳槽经历的求职者,面试时考官就会格外谨慎,跳槽面试常遇到的经典提问,希望求职者面试前可以做好应答准备。跳槽面试经典提问1 、你在工作中觉得自己的才能是否充分施展?面试题回答:基本还是能充分施展的,只是原来公司制度的管理不健全,好多事情效率都比较不高。好希望能进入那种制度化,规范化的公司环境环境。2 、为什么跳槽换工作?不喜欢你原来的工作了吗?面试题回答:刚工作时还喜欢,在一私营公司里熬将近两年,感觉变了,产品不

2、成熟,行业市场比较饱和,公司基本没什么培训,成长空间小,说来说去,原来我还是喜欢自己的工作或专业,但是不喜欢自己的现状。3 、分别说说你最喜欢、最擅长以及最不擅长做的三件事情。面试题回答:最喜欢做的事:做菜、沟通、逛街;最擅长的三件事:做家务、沟通、执行;最不擅长的三件事:做决策、分析、维护感情。4 、你对准备跳槽的新公司有什么要求面试了蛮多家,但基本还是跟原来公司很相像,规模不大,管理不善。希望去一个大公司,待遇可以不高,但希望能真正真正的学到和积累东西。5 、还有什么问题要问的吗面试题回答:为了避免无题可问,列举几个问题仅供参考:1 、贵公司有无针对新人的培训计划,具体是什么?2 、贵公司

3、的企业文化如何?3 、贵公司接下来几年的发展目标是什么?跳槽面试经典提问你了解了吗?想回答好这些问题着实不易,可以准备多组答案,以备在面试的过程中充分的展现自己的能力。液相色谱仪在高效使用中需注意以下几个问题:1、色谱柱中的流动相是否会会排干的问题:不少做色谱分离试验的人遇到过这样的情形:不慎未及时补充流动相,泵将溶剂瓶中的流动相吸干了,HPLC系统由此而停止工作了。如此情况是否会损坏色谱柱?泵是否已将色谱柱中所有流动相都排干了?色谱柱还能使用吗?事实上,如果泵将溶剂瓶中的流动相吸干,并不会造成色谱柱的损坏。即使泵中充满了空气,泵也不会将空气排入色谱柱。因为泵只能输送液体,而不能输送空气。2、

4、色谱柱变干的问题:另一个更可能发生的情况是忘记盖上色谱柱两端的密封盖或盖子太松而使色谱柱变干。同样,整个色谱柱干涸的情况不太容易发生,多半可能只是色谱柱两端的几个毫米变干了,因挥发掉所有溶剂是色谱柱变干需要相当长的时间。即使色谱柱真的变干了,也不一定就不可救药了。可以尝试用一种完全脱气的、表面张力低的溶剂(如经氦气脱气的甲醇)冲洗色谱柱以除去气体。较低的表面张力有助于浸润填料表面;已脱气的溶剂应该能够溶解并去除滞留在填料中的气体。色谱柱大约需要(以1mL/min的流速)冲一个小时或更多的时间被彻底浸润,恢复到正常状态。3、使用PEEK(polyetheretherketone)管路和接头需要注

5、意以下问题:如果经常需要改变流路或更换不同品牌的色谱柱,使用PEEK材料制成的管路和接头会非常方便。PEEK管路容易连接;PEEK接头不仅无需工具,手拧即可固定,而且容易调节锥箍之外的管路长度,方便与不同品牌或规格的色谱柱相连接。使用此类材料的管路需要注意的是:PEEK对卤代烷烃和四氢呋喃的兼容性不好。虽然未观察到上述溶剂溶解PEEK材料的明显迹象,但PEEK遇到上述溶剂会变脆。另一个西药考虑的因素是压力限。不锈钢管可耐受6000psi的压力,但PEEK管只能耐受近4000psi(但多数HPLC应用系统压力不会超过3000psi)。使用PEEK接头时则无需担心接头耐溶剂性能,因为接头几乎或很少

6、与溶剂直接接触。但手拧固定的PEEK接头压力限低于不锈钢管,因而压力太高时,可能会使接头在管路上滑动而产生死体积或漏液。4、预防液相泵的故障:处于良好操作状态的泵,应该能使色谱图上的基线平稳;保留时间的重复性好。在等度洗脱时压力波动小于2%。梯度洗脱时压力变化应是缓慢和平稳的。要保持泵的良好操作性能,必须维护系统的清洁,保证溶剂和试剂的质量,对流动相进行过滤和脱气.下面列出预防泵故障的几项措施:1)用高质量试剂和HPLC级溶剂;2)过滤流动相和溶剂;3)脱气;4)每天开始使用时放空排气,工作结束后从泵中洗去缓冲液;5)不让水或腐蚀性溶剂滞留泵中;6)定期更换垫圈;7)需要时加润滑油;8)查阅有

7、关泵操作手册中的其它建议。9)为了使故障发生后尽快排除,平时应常备密封、单向阀(入口与出口)、泵头装置、各式接头、保险丝等部件,以及更换工具。一,高效液相色谱仪操作过程:1、开机操作:(1)、打开电源,用Harb相连接时,注意Harb电源,打开计算机,打开BootpServer(一般启动时已打开);(2)、自上而下打开个组件电源,BootpServer里显示有信号时(有六行字符),打开工作站(先打开Online);(3)、打开冲洗泵头的10异丙醇溶液的开关(需用针捅抽),控制流量大小,以能流出的最小流量为准;(4)、注意各流动相所剩溶液的容积设定,若设定的容积低于最低限会自动停泵,注意洗泵溶液

8、的体积,及时加液;(5)、使用过程中要经常观察仪器工作状态,及时正确处理各种突发事件。2、先以所用流动相冲洗系统一定时间(如所用流动相为含盐流动相,必须先用水冲洗20分钟以上再换上含盐流动相),正式进样分析前30min左右开启D灯或W灯,以延长灯的使用寿命;3、建立色谱操作方法,注意保存为自己命名的Method,勿覆盖或删除他人的方法及实验结果;4、使用手动进样器进样时,在进样前和进样后都需用洗针液洗净进样针筒,洗针液一般选择与样品液一致的溶剂,进样前必须用样品液清洗进样针筒3遍以上,并排除针筒中的气泡;5、溶剂瓶中的沙芯过滤头容易破碎,在更换流动相时注意保护,当发现过滤头变脏或长菌时,不可用

9、超声洗涤,可用5%稀硝酸溶液浸泡后再洗涤;6、实验结束后,一般先用水或低浓度甲醇水溶液冲洗整个管路30分钟以上,再用甲醇冲洗。冲洗过程中关闭D灯、W灯;7、关机时,先关闭泵、检测器等,再关闭工作站,然后关机,最后自下而上关闭色谱仪各组件,关闭洗泵溶液的开关;8、使用者须认真履行仪器使用登记制度,出现问题及时向老师报告,不要擅自拆卸仪器。(续)1、操作过程若发现压力很小,则可能管件连接有漏,注意检查。当出现错误警告(各组件指示灯均为红色),一般为漏液,其中一个感应器中已有溶剂,漏液故障排除后,擦干,点击Online操作界面中的Instrument/SystemOff,然后再点击操作界面中的Ins

10、trument/SystemOn即可。2、连接柱子与管线时,应注意拧紧螺丝的力度,过度用力可导致连接螺丝断裂。柱接头处易发生漏液,可能情况为接头Fittings中间的管子未和接口处贴紧。不同厂家的管线及色谱柱头结构有差异,最好不要混用,必要时可使用PEEK管及活动接头;3、操作过程若发现压力非常高,则可能管路已堵,应先卸下色谱柱,然后用分段排除法检查,确定何处堵塞后解决。若是保护柱或色谱柱堵塞,可用小流量流动相或以小流量异丙醇冲洗,还可采用小流量反冲的办法(新柱不提倡),若还是无法通畅,则需换柱;4、运行过程中自动停泵,可能为压力超过上限或流动相用完;5、样品瓶中样品较少,自动进样器进样针无法

11、到达液面,可采用调低进样针进样高度的办法,注意设置时不要使进样针碰到瓶底,微量样品分析应使用微量样品瓶;6、自动进样器进样针未与样品瓶瓶口对准时,需重新定位。7、泵压不稳或流量不准,可能为柱塞杆密封圈问题或sealwash垫圈问题,需更换;8、基线产生不规则噪声,可能原因为系统不稳定或没达到化学平衡(使其平衡,若用离子对试剂,在首次使用使需要足够的时间和溶剂体积,色谱柱才能达到足够的平衡),流动相被污染(更换流动相,清洗储液器、过滤器,冲洗并重新平衡系统),色谱柱被污染(为证明可能的原因更换系统的色谱柱或使用一根同类的被证明性能好的色谱柱),检测器不稳定;9、短期有规则的噪声,可能原因为泵压不

12、稳或泵脉冲,调节溶剂不适当(如两种溶剂的互溶性问题),泵入口管路松或堵塞,泵太脏,泵柱塞磨损,检测器不稳定;10、长期有规则噪声,可能原因为室温不稳(未使用柱温箱)或使用柱温箱不当;11、基线漂移,可能原因为系统不稳或没有达到化学平衡,室温不稳(未使用柱温箱),流动相污染或分解,柱污染,检测池泄漏,系统泄漏,固定相流失(另选流动相,另选色谱柱),测定的波长选择错误(对溶剂有吸收),样品组分保留太长(用强度合适的溶剂清洗色谱柱),检测器不稳定;12、每次进样时的保留时间不重复,可能原因为系统不稳或未达到化学平衡,由于气泡、各部件磨损等原因引起的泵压或泵脉冲输液不稳定,进样体积太大或样品浓度太高平

13、衡被破坏,溶剂配比不合适,柱被污染;13、无峰,可能原因为检测器选择错误,使用错误的流动相,样品降解;14、色谱峰比预计的小,可能原因为进样体积错误,检测器灯故障,进样问题(瓶号错、进样体积不合适、进样错误、针头堵塞);15、峰变宽,可能原因为进样体积太大或样品浓度太高,过滤器、保护柱入口、柱入口或连接管路有部分堵塞,检测器时间常数设置错误,进样器问题(如阀漏、针头堵塞或损坏),柱或保护柱被污染,对流动相来说样品溶剂太强,使用错误的色谱柱,温度变化;16、出现双峰/肩峰,可能原因为保护柱或柱入口部分阻塞,柱或保护柱被污染,柱性能下降,保护柱失效,进样体积太大或样品浓度太高(样品过载),平衡破坏

14、;17、前沿峰,可能原因为进样体积太大或样品浓度太高(样品过载),平衡破坏,对于流动相来说样品溶剂非极性太强(对于反相柱),柱或保护柱被污染,柱性能下降,保护柱失效;18、脱尾峰,可能原因为柱或保护柱被污染,柱性能下降,保护柱失效,进样器问题(如阀漏等),检测器时间常数设置错误;19、出现鬼峰,可能原因为流动相被污染,样品预处理时产生降解或混入杂质,先前进样的流出物,样品定量管清洗不当,注射器脏,柱被污染,进样装置被污染,流动相中含有稳定剂/稳定剂变化。二,高效液相色谱柱使用注意事项:1、使用前仔细阅读色谱柱附带的说明书,注意适用范围,如pH值范围、流动相类型等;2、使用符合要求的流动相;3、

15、使用保护柱;4、如所用流动相为含盐流动相,反相色谱柱使用后,先用水或低浓度甲醇水(如5%甲醇水溶液),再用甲醇冲洗。5、色谱柱在不使用时,应用甲醇冲洗,取下后紧密封闭两端保存;6、不要高压冲洗柱子;7、不要在高温下长时间使用硅胶键合相色谱柱;三,流动相操作:1、流动相应选用色谱纯试剂、高纯水或双蒸水,酸碱液及缓冲液需经过滤后使用,过滤时注意区分水系膜和油系膜的使用范围;2、水相流动相需经常更换(一般不超过2天),防止长菌变质;3、使用双泵时,A、B、C、D四相中,若所用流动相中有含盐流动相,则A、D(进液口位于混合器下方)放置含盐流动相,B、C(进液口位于混合器上方)放置不含盐流动相;AB、C

16、、D四个储液器中其中一个为棕色瓶,用于存放水相流动相。一、高效液相色谱仪的维护要点1、手动进样器:平时应该注意使用二次蒸馏水和甲醇在装载状态及进样分析状态清洗;如果出现漏液现象,原因极可能为转子密封垫磨损或污染,一般要申请维修或更换配件。2、排液阀:此处不能完全密封或漏液时一般是其中的垫片污染或磨损,可卸下后取出其垫片用异丙醇超声波清洗或更换垫圈。3、单向阀:如遇到泵压不稳或流动相不能抽取,则可能是单向阀出现问题,卸下用异丙醇超声波清洗,清洗时须按其安装的方向放置在小烧杯中,切记不可与安装方向倒置超洗!4、工作站:出现死机可重起计算机;不正常运行时,首先可更换电脑测试其硬件故障;或在本机上重新插拔接口、重新安装软件。5、过滤器:当色谱峰出现异常情况时,有可能是此部件被污染,拆下用异丙醇超洗或更换过滤垫片。6、吸滤头:特殊情况下可拆下滤头抽取以判断其中是否堵塞;亦可

展开阅读全文
相关资源
相关搜索

当前位置:首页 > 办公文档 > 活动策划

电脑版 |金锄头文库版权所有
经营许可证:蜀ICP备13022795号 | 川公网安备 51140202000112号