液相色谱操作

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1、1开关机开机:从上到下,从左到右依次打开仪器开关一开电脑一打开LC软件连接仪器关机: LC 软件中:“仪器”中“关机”,待仪器绿灯变黄后从上到下,从右到左关闭仪 器开关。2 流动相有机相:选择满足检测对象要求的液相色谱级别专用有机溶剂,用有机相专用“溶剂过滤 器”过滤,所用微孔滤膜为“有机膜”,光滑面的朝向与过滤时液体流动方向相同,然后超 声5lOmin,冷却后使用.水相:二次去离子水一超纯水一用溶剂过滤器”过滤,所用微孔滤膜为水相专用膜一超声 15m in,冷却后使用。第三流路用50%的甲醇水溶液,甲醇和水的要求与有机相和水相的要求相同,若隔几天 用须再次超声。3样品检测检测操作过程:排气一

2、清洗一进样(1 ) 排气a:软件自动排气,放空阀可以关闭;排气时A、B相流路各5min,进样器排气25min。b:仪器面板“purge”键排气分别按A、B相流路的“pump”键或点击软件中的“泵开关”按钮使泵处于关闭状态,此 时“pump”指示灯不亮,然后务必打开A、B相流路放空阀,按A、B相流路和采样器的“purge”键执行排气操作,A、B相流路排气完成后关上放空阀。这种方法的特点是A、B相流路和采样器同时排气,A、B相流路排气完成(5min)后, 虽然采样器仍在排气,但可以直接进行清洗或采样检测(2) 清洗与平衡上述仪器面板“purge”键排气完成后分别按A、B流路的“pump”键或点击软

3、件中 的“泵开关”使泵开始工作,即“pump”灯亮,打开软件中的“绘图”,等待基线走平。清 洗完成并且A、B两相配比平衡(即达到样品检测要求条件)的标志有基线水平为o, 上 下波动在0.5之内(若出现峰则说明柱子中有杂质,继续清洗)A、B泵压力值保持恒定, 允许变化范围为0.3( 3) 取样检测 方法文件的建立:确定有机相和水相的最佳配比、分析时间、流速、温度(一般设置温度高于室温5C左右, 便于控温),LC时间分析程序分为等浓度和二元梯度a:等浓度(整个过程用同一配比),LC时间分析程序如下:时间单元操作值0.01ControllerStop/b:二元梯度(根据实际要求在同一个样品检测过程中

4、改变有机相和水相配比,避免出峰重叠)例:开始时B相的配比为50%,在第lOmin将B相配比改为30%,第30min将B相配比 调整到40%,第60min停止,LC时间分析程序如下:时间单元操作值0.01pumpsB.conc5010pumpsB.conc3030pumpsB.conc4060controllerStop/ 单次运行方法文件:选择已保存方法文件,若不选择默认执行当前LC软件显示窗中的方法。 数据文件:样品检测结果的保存位置与文件名 样品架:进样器中左边样品架编号为1,右边样品架编号为2 ,通常使用1 号样品架 样品瓶:对应样品架中的位置编号进样体积:进样量不宜太少(如系统默认进样量1“L) 批处理 多个“单次运行”自动连续执行4 维护 样品检测完成后若短时间内不用仪器(几天内),单独使用有机相所在流路让纯有机溶剂 (即 100%配比)清洗 4050min 后关机。 若长时间不使用仪器(一周以上),A、B流路都用有机溶剂清洗4050min,关机。 长时间不用仪器,应把水相中的磨砂头放进有机相中防止长苔,若磨砂头堵塞则需超声。

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