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1、金标法与滴度法应用于临床检测梅毒的效果观察【摘要】目的探讨金标法以及TRUST滴度法检测梅毒螺旋体的效果。方法 采用酶联免疫吸附试验，甲苯胺红滴度法(TRUST)对147例临床样本进行初级筛选 试验，并对初筛结果阳性的49例血清进行金标法梅以及毒螺旋体检验。结果 酶联 免疫吸附试验滴度法(TRUST)试验阳性的49例样本中，金标法阳性46例，二者的 符合率为93.88%。结论 金标法与(TRUST)滴度法其灵敏度、特异性无显著性差异 (P0.05)，可以联合应用于临床中梅毒的检测，提高检出率。【关键词】梅毒；抗体；金标法；滴度法大量的临床资料以及有关的流行病学调查结果显示，在我国梅毒的发病率有
2、逐 年上升的趋势12。因此，开发出一种简便的、快速的同时具有较高灵敏度及特 异性的检查方法，对于该种疾病的预防、治疗以及筛查大量的献血者无疑具有十分 重要的意义。对筛查者进行血清学检测是诊断梅毒的重要依据之一，在梅毒的诊 断、治疗以及研究上具有非常重要的意义。因此，本院将金标法，TRUST滴度法分 别应用于对梅毒的检测，由于TPPA是公认的比较好的梅毒抗体的确认方法，因此 分别对样本进行检测，在以TPPA结果进行对比，观察其结果的一致性，现将分析 报道如下。1资料与方法1.1 一般资料本组标本选择作者单位2006年4月以来143例，先对临床样本进行初级 筛选试验，再对初筛结果呈阳性的49例血清
3、，进行金标法以及梅毒螺旋体检验。 其中男性26例，女性23例，年龄1878岁，平均年龄(4826.5)岁。1.2检测试剂甲苯胺红TRUST试剂(上海荣盛生物工程有限公司。批号20010301);金标 法试剂(上海科华生物。批号：200110225);TPPA试剂(上海实业科华生物技术有限 公司。批号：200110201)1.3 方法梅毒螺旋抗体检测：采集上述的试剂盒中所要求的血清(浆)样本，并且按 照试剂盒的说明分别进行检测。1.4统计学方法采用SPSS15.0统计学软件进行统计学分析。配对计数资料采用x2检 验，P0.05)，TRUST滴度法的假阴性率明显高于金标法(7.08， 6.97，P
4、0.01)。表1金标法和TRUST滴度法阳性例数比较3讨论梅毒螺旋体检测，以此明确患者受血前或术前的情况，是如今医学发展的 必经步骤，是新的医疗事故处理条例实行举证责任倒置的参照。在传染性指标 的检测中，选择初筛试验时，试验的灵敏度很重要，敏感性差的，易出现漏检，不 适合筛选献血者及输血前患者各传染性指标的检测。梅毒螺旋体侵入机体后产生两种抗体：为心磷脂抗体及抗密螺旋体抗体， 检测前者的方法，目前，在国内最为常用的是RPR和TRUST滴度法，且长期以来成 为筛查检测献血者的主要方法。机体感染梅毒螺旋体后，产生特异性抗螺旋体抗体 (TPAb )及非特异性的抗类脂质抗体。梅毒特异性抗体出现早、消失
5、慢，即使经正规 的抗梅毒治疗，仍然检出了特异性抗体，甚至可终生检出3。据文献4报道，人 体感染梅毒螺旋体后，血清中产生的抗螺旋体抗体相对与抗类脂质抗体早5。胶体金免疫层析法即金标法，是近几年发展起来的继三大标志免疫检测之 后一种新的免疫检测技术6。该试验的原理是将各种试剂逐一固定在同一张试纸 条上，检测标本列于试纸条的一端，一种试剂溶解后，通过毛细血管作用移动，与 条上另外的试剂接触发生反应，像层析一样7。TPPA检测血清中的梅毒螺旋体抗体，特异性好、灵敏度高，已是目前公 认的检测梅毒血清试验方法;但因试剂较贵，检测用时较长。金标法，采用了纯化 重组基因的梅毒抗原，胶体金作为其指示标记，硝酸纤
6、维素膜上进行反应，双抗原 夹心法原理为基础，快速定性的检测人血清(血浆)中的梅毒螺旋体特异性抗体，其 特异性、灵敏度与TPPA相近，符合率为93.88%(46/49)，从而替代TPPA作为快速 梅毒血清确证试验。但是血清(血浆)中特异性梅毒螺旋体抗体浓度过低时，梅毒螺 旋体抗体胶体金法会产生假阴性反应，这就需要与TPPA方法结合，再进行综合的 判断。本实验结果显示，金标法其特异性和TPPA相比无显著差异，且明显好于 TRUST法。TRUST滴度法和金标法之间在假阳性之间无明显的区别，但是TRUST滴 度法的假阴性率明显高于金标法，由于金标法检测在老年患者中存在较高的假阳性 率，因此在初筛试验阳
7、性时，必须进一步选择TRUST试验并结合临床进行综合分 析，才能做出准确诊断。金标法试剂成本低，符号显示结果明确，操作简便，可分 批或单人份检测，结果易保存。因此，采用灵敏特异的梅毒螺旋体抗体诊断金标法 可以完全与TRUST滴度法相互替代。作为大批量标本梅毒筛查的理想方法，又可以 作为诊断试验。参考文献1 梁庆华.3种方法联合检测在老年梅毒诊断中的应用价值J.检验医学与 临床，2009，6(7):498499.2 秦红群，马顺高.梅毒螺旋体抗体筛查实验的选择J.中国现代医生， 2008，46(28):146147.3 Lambert NL， Fisher M， Imrie J， et al.
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