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平板划线法一、实验目的1、了解平板划线法分离菌种的基本原理2、练习平板划线法分离菌种的基本操作，掌握无菌操作技术二、实验原理平板划线法是指把杂菌样品通过在平板表面划线稀释而获得单菌落的方法。一般是将混 杂在一起的不同种微生物或同种微生物群体中的不同细胞，通过在分区的平板表面上作多次 划线稀释，形成较多的独立分布的单个细胞，经培养而繁殖成相互独立的多个单菌落。通常 认为这种单菌落就是某微生物的“纯种”。实际上同种微生物数个细胞在一起通过繁殖也可 形成一个单菌落，故在科学研究中，特别是在菌种鉴定等工作中，必须对实验菌种的单菌落 进行多次划线分离，才可获得可靠的纯种。三、材料和器皿1、菌种：前期帅选中有溶钙圈的单菌落2、培养基：MRS固体培养基3、器皿：无菌培养皿，接种环，培养箱等。四、实验步骤1、MRS培养基的配置：用MRS肉汤按每升48g计算配置，向其中加入1.5%的比例加入 琼脂，按1%的比例加入CaCOg后，121C灭菌15m in。2、倒平板：培养皿灭菌，烘干后，取灭菌的 MRS 固体培养基倒平板（每个平板倒 10mL 左右），放入4C冰箱备用。3、划线：于超净工作台中，将涂布平板中的单菌落用接种环挑取，按图1 中所示的方法与 平板上划线。4、将接种好的平板置于37C厌氧培养箱中培养24h。5、培养期间，注意观察菌的生长情况，培养结束后，拍照留底。A
