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1、检验科的实习记录（医学检验专业）1 免疫室输血前九项Elisa（乙肝两对半+丙肝抗原+丙肝抗体+梅毒抗体+艾滋）乙肝五项化学发光时间分辨定量检测肝炎病原学Elisa（甲+乙+丙+戊）自身抗体全套检测(欧蒙试剂+免疫印迹法)自身免疫性肝病（欧蒙+免疫印迹法：自免肝膜条）抗核抗体抗中性粒细胞胞浆抗体ANCA(欧蒙+膜条)CCP检测Elisa过敏原测定（欧蒙免疫印迹法）食入性+吸入性肥大氏反应（诊断伤寒O，H副伤寒甲乙丙）红细胞冷凝集试验结核抗体检测（金标渗滤法）呼吸道病原学检查全套梅毒 Elisa+ TPPA + TRUSTHBSAG+金标条复查具体操作乙肝两对半Elisa（一步法）（12345，
2、第5项HBCAb需稀释血清50ul+1.5ml生理盐水0.9%NaCl）空白对照阳性（P）阴性（N）样本血清加样50ul阳50ul阴50ul血清加酶505050混匀，37温育25min，洗板5次，最后一次尽量扣干显色液A显色液B 5050505050505050混匀，避光显色15min 加终止液50505050双波长测定注：HBeAb 加样后，需加入中和抗原50ul梅毒螺旋体抗体Elisa空白对照阳性（P）阴性（N）样本血清加酶100ul100ul 100ul 加样202020混匀，37温育30min，洗板5次，最后一次尽量扣干显色液A显色液B 5050505050505050混匀，避光显色1
3、5min 加终止液50505050双波长测定丙肝抗体（同戊肝抗体）空白对照阳性（P）阴性（N）样本血清加稀释液 100ul 100ul 100ul加样101010混匀，37温育30min，洗板5次，最后一次尽量扣干加酶100100100混匀，37温育30min，洗板5次，最后一次尽量扣干显色液A显色液B 5050505050505050混匀，避光显色15min 加终止液50505050双波长测定丙肝抗原（没有质控品）空白对照阳性（P）阴性（N）样本血清加稀释液 100ul 100ul 100ul加样100100100混匀，45温育40min，洗板6次，最后一次尽量扣干加酶200200200混匀
4、，37温育30min，洗板6次，最后一次尽量扣干显色液A显色液B 100100100100100100100100混匀，避光显色10min 加终止液50505050双波长测定艾滋（北京万泰）甲肝空白对照阳性（P）阴性（N）样本血清加样50ul阳50ul阴50ul血清3740min，洗板5次，最后一次尽量扣干加酶100100100 3720min，洗板5次，最后一次尽量扣干显色液A显色液B 5050505050505050混匀，避光显色15min 加终止液50505050双波长测定戊肝 TPPA1号标本2号标本3号标本A100ul稀释液(1:5)100ul稀释液100ul稀释液B25ul(1:1
5、0)25ul25ulC25(1:20)(1:40)2525D25(1:40)(1:80)2525E25(1:80)(1:160)2525F25(1:160)(1:320)2525G25(1:320)(1:640)2525H25(1:640)(1:1280)2525分别向以上A横排孔加入25ul血清，吸走25ul加入B排,依次作倍比稀释。C排加入25ul未致敏粒子，ABDEFGH加入致敏粒子注:粉红色(最终稀释倍数)混匀，静置两小时后观察结果。TRUST1号2号原倍血清50ul血清+50ul抗原悬液50ul血清+50ul抗原悬液1:2稀释血清+50ul抗原悬液稀释血清+50ul抗原悬液1:4.乙
6、肝五项化学发光时间分辨定量检测IFFA（同个批号，每天只需做两个浓度的校准品，两点定标）HBsAg,HBsAb,HBeAgBD样本血清加样50ulB校准品50ul D校准品50ul血清室温下振荡器上孵育40min，洗板4次，最后一次尽量扣干加铕标记物（稀释后）100100100室温下振荡器上孵育40min，洗板6次，最后一次尽量扣干加增强液100100100测定HBeAb,HBcAb加样后，需加入中和抗原50ulHBcAb血清样品+1ml生理盐水稀释 肥达氏反应4.875ml生理盐水+125ul待测血清（1：40稀释）加入第一竖排，此时试管内还剩2.5ml稀释血清，+2.5ml生理盐水补足5m
7、l（1:80稀释）加入第二竖排，依次稀释下去1:401:801:1601:320对照管（NaCl）甲500ul500ul500ul 500ul 500ul乙500ul500ul 500ul 500ul500ul丙500ul500ul 500ul 500ul500ulO 500ul500ul 500ul 500ul500ulH 500ul500ul 500ul 500ul500ul向以上各管加入500ul相应的菌液。最后稀释倍数为;(1:80)(1:160)(1:320) (1:640) 红细胞冷凝集试验（两管血：抗凝全血+血清）将全血洗涤3次，制成洗涤红细胞，取30ul+2970ul生理盐水制
8、成1%红细胞悬液倍比稀释血清12345678910生理盐水 200200200200200200200200200200待测血清2001:22001:42001:82001:162001:322001:642001:1282001:2562001:5122001:1024向以上各管加入已制成的1%红细胞悬液200ul.全自动免疫分析仪 (瑞士TECAN)时间分辨仪洗板机酶标仪超声波清洗仪连续加样枪2 微生物染色革兰染色(真菌，一般检查)龙胆紫1min，水洗，甩干碘液1min，水洗，甩干脱色液（丙酮，乙醇）30s，甩干沙黄溶液复染30s，干燥抗酸染色（结核杆菌检查）石碳酸复红20-25min，水
9、洗，甩干盐酸酒精（1-2次）脱至无色，水洗，甩干亚甲蓝复染5min，水洗，干燥墨汁染色隐孢子球菌 黑色 荚膜被染成 ？KOH 用于检出头发,皮屑等中的真菌?转种1血平板 2麦康凯 3沙保氏（制作该平板时，不需要调节PH，偏酸，倒平板前加入氯霉素抑制细菌，用于分离真菌及对氯霉素耐药且耐酸的细菌）血液培养及鉴定（自动血液培养仪）需氧+血平板，麦康凯。厌氧+两个血平板，一个麦康凯，一血平板放入孵箱中，另一血平板放入烛缸（厌氧环境）中培养（都是三区划线法）若需氧厌氧都长菌，则转种两个血平板(O2,O2)，两个麦康凯(O2,O2)尿液培养及鉴定（1，2）尿液本来是无菌标本，但因为生理环境，采集时极易被污
10、染，临床以有菌标本对待。血平板：棋盘法划线(用接种环取一环,连续作横、竖接种,期间不用灭菌(用于菌落计数，105/L认为是感染菌)麦康凯:分区划线痰培养及鉴定（1，2，3）分区划线(直接取标本画)大便培养及鉴定( 2, 3 ) 分区划线（直接画）真菌芽管实验：200ul健康人血清+第一区取菌种约13环鉴别真菌?上鉴定卡全自动血培养仪放瓶 密码1取瓶 positive bottle 密码12345，打开机门后，可以连续取瓶escyes扫条码扫完后escyes退出配制培养基称量：XX*1 XX*0.X溶解：蒸馏水加热：搅拌调节PH：滴加NaOH,慢慢调节分装沙保氏培养基加入氯霉素？不用调PH原因？
11、只有耐酸又对氯霉素耐药的细菌才能生长，抑制细菌生长，选择性生长真菌。 绿脓杆菌（铜绿假单胞菌）特点：全自动微生物鉴定仪GPI (革兰阳性菌鉴定卡) GPS（革兰阳性菌药敏卡）GNI（革兰阴性菌鉴定卡）GNS（革兰阴性菌药敏卡）3 体液室1 尿常规（组合）尿液分析仪H-800质控：编号0500阳性质控分析尿沉渣分析仪i质控（高值和低值）手动分析进样2尿常规（门诊）尿液分析仪BW-500质控3粪便常规（组合）涂片镜检：生理盐水涂片（保护红细胞原有形态）红细胞：皱缩红细胞、膨胀的红细胞（微调感受包膜同心圆感）、正常红细胞（圆圆的双凹圆盘形，吹动能翻转），大多可泛灰红色。白细胞：圆圆的，是红细胞体积的
12、13倍，微调可见泛绿光，颗粒感。真菌（霉菌）：多见芽生孢子1）葵瓜子样，多见有一小点，微调亮亮的，泛绿光2）椭圆形较葵瓜子样大，微调亮亮的，体内多有一小点，常泛绿光（注意与泛黄光的那种鉴别，其内多没有小点）寄生虫：最常见钩虫，蛔虫，鞭虫隐血试验（OB）:原理：胶体金法检测粪便中的血红蛋白蒸馏水溶解（破换红细胞，释放血红蛋白？）4阴道分泌物常规（白带常规）的临界条件：E+,WBC=15例：E+,WBC=15,霉菌少量。则为5前列腺液检查乳白稀薄卵磷脂小体80%-90%（圆圆的，像闪光的星星，注意与变形的白细胞相区别）查见颗粒细胞（可能是吞噬了卵磷脂小体的吞噬细胞）查见淀粉样小体（同心圆）白细胞XX-XX/HP红细胞XX-XX/HP精子XX-XX/HP6精液常规检查例 颜色：乳白性状：稀薄量：5ml镜下所见：A级精子20% 。快速直线运动B级精子35% 。缓慢运动C级精子20% 。缓缓运动或原地打转D级精子30% 。不动死精子精子活动率=(A+B+C)%白细胞XX-XX/HP红细胞XX-XX/HP精子计数：XX *109注;精液超过2h不液化，则不用计数。精子计数(稀释20倍)：20ul液化精液+0.38ml精子计数用稀释液，冲池后静置5分钟后计数。例：20*10*106*207胃液检查隐血检查
