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1、DNA甲基化与基因表达DNA甲基化是最早发现的修饰途径之一,可能存在于所有高等生物中。DNA甲基化能关闭某些基因的活性,去甲基化则诱导了基因的重新活化和表达。1. DNA甲基化的主要形式5-甲基胞嘧啶,N6-甲基腺嘌吟和7-甲基鸟嘌吟。在真核生物中,5-甲基胞嘧 啶主要出现在CpG和CpXpG中,原核生物中CCA/TGG和GATC也常被甲基 化。真核生物细胞内存在两种甲基化酶活性:一种被称为日常型(mai nte-nan ce)种是从头合成(de novo sy nthesis )甲基转移酶。前者主要在甲基化母链(模板链)指导下使处于半甲基化的DNA双链分子上与甲基胞嘧啶相对应的胞嘧啶甲基化。
2、日常型甲基转移酶常常 与DNA内切酶活性相耦联,有3种类型。II类酶活性包括内切酶和甲基化酶两 种成分,而I类和III类都是双功能酶,既能将半甲基化DNA甲基化,又能降解 外源无甲基化 DNA。细胞内3类日常型甲基转移誨活性分析特性1类类I类蚩白质结构甲基化与内切酵功腿 由不同蛋白质执行双功BE酶2亍亚基双功雜薛3十亚基识别位点46 b卩常为回文结构5-7 bp,第为不对称洋列由两牛不对称序列构成同谀别位点或非常靠识别宜点下游2电右bp非持昇性珥住距识别近该位点位点 ai ooo bp a内切/甲基化獭互独立同时进行不能同时进行其他不需EAT F水解US S ATP水解 ATP水解由于甲基化胞嘧啶极易在进化中丢失,所以,高等真核生物中 CG 序列远远低于其理论值。哺乳类基因组中约存在4万个CG islands,大多位于转录单元的5区。没有甲基化的胞嘧啶发生脱氨基作用,就可能被氧化成为U,被DNA修复系 统所识别和切除,恢复成C。已经甲基化的胞嘧啶发生脱氨基作用,它就变为T, 无法被区分。因此, CpG 序列极易丢失。