222 动物细胞融合与单克隆抗体(解析版)

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1、2.2.2动物细胞培养与单克隆抗体精选习题一、选择题1. 下列关于细胞工程的叙述，错误的是（）A. 电激可诱导植物原生质体融合或动物细胞融合B. 去除植物细胞的细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶处理C. 小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫的小鼠B淋巴细胞融合可制备单克隆抗体D. 培养人的浆细胞能产生单克隆抗体【答案】D【解析】选D。利用物理（电激等）和化学的方法既可诱导植物原生质体融合，也可诱导动物 细胞融合；浆细胞虽能分泌特定抗体，但是不能分裂增殖，所以单独培养浆细胞不可能获得 单克隆抗体。2. 新技术的建立和利用对生物学的发展至关重要。下列技术（或仪器）与应用匹配正确的是 （）A. PCR技术

2、扩增蛋白质B. 杂交瘤技术制备单克隆抗体C. 光学显微镜观察叶绿体的基粒D. 花药的离体培一培育多倍体植物【答案】B【解析】选B。PCR技术用于扩增DNA片段，而不是扩增蛋白质，故A错误。杂交瘤技术 是指将已注射特定抗原的小鼠中具有无限增殖能力的骨髓瘤细胞与特定B淋巴细胞结合， 则可产生大量的单克隆抗体的技术，故B正确。光学显微镜只能观察到叶绿体的外部形态 特点；观察叶绿体内部结构则需用电子显微镜，故C错误。将离体的花药通过组织培养， 可培育出单倍体植物，故D错误。3. （2018-蚌埠高二检测）单克隆抗体制备过程中使用的骨髓瘤细胞是一种缺陷型细胞，在含有 次黄嘌吟、氨基嘌吟和胸腺嘧啶的培养基

3、（HAT）中无法生长，而小鼠脾细胞是正常细胞，在 HAT培养基上可正常存活。用聚乙二醇诱导细胞融合后，经过数代培养，最终可在HAT培 养基上存活的细胞是（）A. 骨髓瘤细胞之间形成的融合细胞B. 脾细胞之间形成的融合细胞C. 骨髓瘤细胞与脾细胞之间形成的融合细胞D.脾细胞【答案】C 【解析】选C。骨髓瘤细胞与脾细胞之间形成的融合细胞能无限增殖，并能在HAT培养基 上正常存活。脾细胞高度分化，不能进行大量增殖。4. 下图是单克隆抗体制备过程示意图，其中过程注射的物质和A细胞的名称分别是（）A. 抗体、T淋巴细胞C.抗体、B淋巴细胞【答案】DB. 抗原、T淋巴细胞D. 抗原、B淋巴细胞【解析】选D

4、。单克隆抗体技术首先应该获得能产生单一抗体的B淋巴细胞，所以应该给 小鼠注射单一抗原，刺激小鼠产生相应B淋巴细胞，并产生单一抗体。所以图中过程注 射的是抗原，A细胞是B淋巴细胞。5. （2019-北京模拟）科学家将经过洋红细胞免疫过的小鼠B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合，产生杂交瘤，并能分泌单克隆抗体。洋红细胞和B淋巴细胞在该实验中分别属于（）A. 癌细胞和记忆淋巴细胞B.抗原物和浆细胞C. 特定抗体物和记忆淋巴细胞D.癌细胞和浆细胞【答案】B 【解析】选B。该洋红细胞能刺激小鼠产生浆细胞，它属于抗原。这里所说的B淋巴细胞 是经过免疫后产生的，属于浆细胞。6. 关于单克隆抗体制备与植物体细胞杂交

5、的说法中正确的是（）A. 单克隆抗体制备与植物体细胞杂交的基本原理相同B. 单克隆抗体制备与植物体细胞杂交诱导细胞融合的方法相同C. 单克隆抗体制备与植物体细胞杂交在细胞融合前处理过程相同D. 单克隆抗体制备与植物体细胞杂交都需要筛选且筛选目的相同【答案】D【解析】选D。A项是不正确的，单克隆抗体的制备是利用杂交瘤细胞既能无限增殖，又能 产生特定抗体的原理进行的，而植物体细胞杂交的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能 性；B项不正确，单克隆抗体诱导融合可用灭活的病毒，而植物体细胞杂交不能用；C项不 正确，单克隆抗体制备在细胞融合前的处理是注射特定抗原，免疫处理正常小鼠；而植物体 细胞杂交在细胞

6、融合前是用酶解法去除细胞壁，获得原生质体。D项正确，两者都要进行筛 选，且筛选的目的都是获取杂交细胞。7. 关于单克隆抗体的生产和应用，错误的是（）A. 对小动物注射特定抗原以获取所需的B淋巴细胞B. 融合并筛选特定的杂交瘤细胞，原代培养产生遗传物质改变后才能进行传代培养C. 特定的单克隆抗体可制成试剂，用于检测人体是否受某种抗原的感染D. 治疗癌症的“生物导弹”原理之一是利用单克隆抗体的特异性识别癌细胞【答案】B【解析】选B。单克隆抗体的制备是用骨髓瘤细胞和经过免疫的B淋巴细胞融合后得到杂 交瘤细胞，杂交瘤细胞既具有骨髓瘤细胞无限增殖的能力，又具有B淋巴细胞产生抗体的 特点，所以不需经过遗传

7、物质的改变便能无限增殖；单克隆抗体最广泛的应用是作为诊断试 剂；把抗癌细胞的单克隆抗体与放射性同位素、化学药物或细胞毒素相结合，制成“生物导 弹”，注入体内，借助单克隆抗体的导向作用，将药物带到癌细胞所在位置，将癌细胞杀死。8. 下列是应用动物细胞工程技术获取单克隆抗X抗体的具体操作步骤： 从患骨髓瘤的小鼠体内获取骨髓瘤细胞 将X抗原注入小鼠体内，获得能产生抗X抗体的B淋巴细胞 将杂交瘤细胞注入小鼠腹腔培养 筛选出能产生抗X抗体的杂交瘤细胞 利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞 从腹水中提取抗体 利用促细胞融合因子使两种细胞发生融合其中对单克隆抗体制备的相关叙述中正确的是（多选）（）A. 实验顺序应

8、当是B. 过程中产生的多个杂交瘤细胞称为克隆C. 过程获得的细胞均可无限增殖D. 利用细胞融合生产单克隆抗体通常要经过两次筛选【答案】ABD【解析】选A、B、D。骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合时能出现三种融合的细胞，分别是两 个B淋巴细胞融合产生的细胞、两个骨髓瘤细胞融合产生的细胞、淋巴细胞和骨髓瘤细胞 融合产生的细胞。其中，两个B淋巴细胞融合产生的细胞不能无限增殖。二、非选择题的简略过程，据图回答相关问题:9. 有性生殖的生物产生后代需进行受精作用，植物体细胞杂交要进行原生质体的融合，单克 隆抗体的制备需进行动物细胞融合，可见细胞的融合技术有着广泛的应用。下列为细胞融合广有性杂交后代d体细胞杂种

9、植株-单克隆抗体(1) 若a、b分别是基因型为Hhrr、hhRr两个烟草品种的花粉，且这两对基因分别位于两对同源染色体上。由于一对隐性纯合基因(rr或hh)的作用，烟草在光照强度大于800 lx时都不能 生长。要想从融合细胞的培养液中分离出基因型为HhRr的杂种细胞，较为简便的筛选方法 是O(2) 若a、b表示两种植物体细胞，则由d细胞形成杂种植株的原理是，这种育种方法的优点(3) 若a、b分别为骨髓瘤细胞和B淋巴细胞，由d细胞产生的抗体与普通血清抗体相比较，具有 的特点。生产上一般不能通过直接培养B淋巴细胞的方法生产单克隆抗体的主要原因 O【答案】(1)给予大于800 lx的光照(2) 植物

10、细胞的全能性克服了不同生物远缘杂交的障碍(3) 特异性强、灵敏度高、可大量制备B淋巴细胞高度分化，不能增殖【解析】(1)a是基因型为Hhrr的烟草的花粉，故其基因型为Hr、hr； b是基因型为hhRr的 烟草的花粉，故其基因型为hR、hr，因此经细胞融合可能形成的融合细胞的基因型有:HHrr、hhrr、hhRR、Hhrr、hhRr、HhRr，共6种。分析这6种基因型除HhRr之外均有一对隐性纯 合基因（rr或hh），即在光照强度大于800 lx时都不能生长，因此要获取基因型为HhRr的杂种细胞，较为简便的筛选方法是给予 大于800 lx的光照。（2）若a、b表示两种植物体细胞，则通过细胞融合形

11、成d细胞可借助植物体细胞杂交技术， 杂种细胞能形成杂种植株是由于植物细胞具有全能性，这种育种方法的最大优点是克服了不 同生物远缘杂交的障碍。（3）若a、b分别为骨髓瘤细胞和B淋巴细胞，则d细胞为杂交瘤细胞，产生的抗体为单克隆 抗体，同普通血清抗体相比，它具有特异性强、灵敏度高、可大量制备等特点。生产上一般 不能通过直接培养B淋巴细胞来制备单克隆抗体，是因为B淋巴细胞高度分化，不能增殖。10.（能力挑战题）（2014.新课标全国卷I ）某研究者用抗原（A）分别免疫3只同种小鼠（X、Y和 Z），每只小鼠免疫5次，每次免疫一周后测定各小鼠血清抗体的效价（能检测出抗原抗体反 应的血清最大稀释倍数），结

12、果如下图所示。血清抗体效价32 00028 00024 000 16 00012 0008 0004 000第一次第二次第三次第四次第五次免疫次数若要制备杂交瘤细胞，需取免疫后小鼠的B淋巴细胞（染色体数目40条），并将该细胞与体 外培养的小鼠骨髓瘤细胞（染色体数目60条）按一定比例加入试管中，再加入聚乙二醇诱导 细胞融合，经筛选培养及抗体检测，得到不断分泌抗A抗体的杂交瘤细胞。回答下列问题：（1）制备融合所需的B淋巴细胞时，所用免疫小鼠的血清抗体效价需达到16 000以上，则小 鼠最少需要经过次免疫后才能有符合要求的。达到要求后的X、Y、Z这3只免疫小鼠中，最适合用于制备B淋巴细胞的是小鼠，理

13、由是（2）细胞融合实验完成后，融合体系中除含有未融合的细胞和杂交瘤细胞外，可能还有，体系中出现多种类型细胞的原因是.(3) 杂交瘤细胞中有 个细胞核，染色体数目最多是条。(4) 未融合的B淋巴细胞经多次传代培养后都不能存活，原因是。【答案】(1)四YY小鼠的抗体效价最高(2)B淋巴细胞相互融合形成的细胞，骨髓瘤细胞相互融合形成的细胞细胞融合是随机的，没有特异性且融合率达不到100%1200(4)不能无限增殖【解析】本题考查制备单克隆抗体的相关知识。(1) 据图中数据分析，第四次注射后Y、Z小鼠的血清抗体效价均达到16 000以上，免疫后 小鼠Y的B淋巴细胞产生抗体效价最高，最适用于制备单克隆抗

14、体。(2) B淋巴细胞与骨髓瘤细胞混合在一起时，可能发生B淋巴细胞之间的融合，骨髓瘤细胞 之间的融合和B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，故体系中会出现多种类型的细胞。(3) 杂交瘤细胞形成后，小鼠的B淋巴细胞核与其骨髓瘤细胞核会融合形成一个细胞核。染 色体可达100条，有丝分裂后期染色体数目最多为200条。(4)未融合的B淋巴细胞经多次 传代培养后，仍然不是能恶性增殖的细胞，分裂次数是有限的。11.肺癌在全国的发病率居肿瘤之首，小细胞肺癌是恶性程度最高的一种，上海肿瘤研究所 细胞与分子免疫研究室在国内率先研制出一种名叫“2F7 ”的靶向生物导弹。这种生物导弹专 门对小细胞肺癌产生特定靶向性的特异性单

15、克隆抗体。注入静脉后，会“直扑”小细胞肺癌病 灶，使其携带的肿瘤化疗药物能集中火力”抑制、杀灭肿瘤细胞。这预示着化疗药物有望弥 补“良莠不分”、损害全身免疫力的缺陷。(1) 制备单克隆抗体时选用B淋巴细胞和骨髓瘤细胞的原因是。(2) 杂交瘤细胞体内培养的优点。(3) 静脉注入而不是口服单克隆抗体的原因 。(4) 单克隆抗体与肿瘤细胞结合并发挥作用的过程属于免疫的阶段。【答案】(1)每种B淋巴细胞只能产生一种特异性抗体，骨髓瘤细胞能无限增殖(2) 不需要配制培养液，不需要控制培养液的无菌、无毒、温度、pH、气体等条件(3) 抗体是蛋白质，若口服则被消化，使抗体失去其功能(4) 体液效应【解析】(1)每种B淋巴细胞只能产生一种特异性抗体，但是不能分裂、分化，骨髓瘤细胞 能够无限增殖。(2) 杂交瘤细胞注入小鼠腹腔内培养，不需要配制培养液，不需要控制培养液的无菌、无毒、 温度、pH、气体等条件。(3) 单克隆抗体的化学本质是蛋白质，口服后会被消化。(4) 抗体与抗原结合，使抗原凝集或失去毒性，属于体液免疫的效应阶段。