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1、1.（2017广西四市高三联考F列问题。回答课时分层训练（三十七）（建议用时：45分钟）A组基础达标）如图是某细菌纯化培养过程中划线接种的培养结果。（1）在（填图中编号）区域出现了单个菌落，产生每个菌落的最初细菌数目是个细菌。据图分析，在培养基上划线接种时，划线的顺序依次是（用编号 表示）。（2）下表是某微生物培养基成分。编号成分含量编号成分含量粉状硫10 g(NH) 2SQ0.4 g&HPQ4 gMgSQ9.25 gFeSO0.5 gCaCb0.5 gH2Q100 mL 若培养从土壤中分离出来的自生固氮菌，该培养基应添加 ，去除 若要鉴别纤维素分解菌，可用法，若要鉴别尿素分解菌， 可在培养液
2、中加入【解析】（1）从图中可知，号区域出现了单个菌落；1个菌落最初是由1个细菌形成; 根据线条数量可判断，划线的顺序依次是tt。（2）自生固氮菌是异养生物，能自身固氮而获得氮源，但自身无法获得碳源，因而培养基中应添加碳源去掉氮源。鉴别纤维素分解菌可用刚果红染色法，要鉴别尿素分解菌，可在培养液中加入酚红指示剂。【答案】（1）1tT（2）碳源氮源刚果红染色酚红指示剂2. （2017 汕头市二模）我国规定每升饮用水中大肠杆菌不能超过3个。某兴趣小组尝试对某品牌饮用水的大肠杆菌含量进行检测，操作简图如图甲，伊红美蓝培养基配方如图乙。lOOmL2 nL2山1就回答下列相关问题：(1) 图甲中滤膜的孔径应
3、 ( 填“大于”或“小于” )大肠杆菌。受此启发，对某些不耐高温的试剂可以怎样除菌？ 。(2) 配制图乙中的基础培养基时， 除了水分、 无机盐以外， 还应加入 ( 一种营养成分 )，以及 。伊红美蓝培养基上生长的大肠杆菌菌落呈现黑色，从功能上划分，该培养基属于 培 养基。(3) 该小组通过统计 的数目，计算出单位体积样品中大肠杆菌数目，理论上 他们 的统 计 值 比实 际 值 ( 填 “ 偏 高” 或“ 偏 低 ”) ， 理由 是【解析】 (1) 为达到除菌的目的， 图甲中滤膜的孔径应小于大肠杆菌。 对某些不耐高温 的试剂可以用滤膜过滤除菌。(2) 配制图乙中的基础培养基时，除了水分、无机盐以
4、外，还应加入氮源，以及琼脂。 伊红美蓝培养基上生长的大肠杆菌菌落呈现黑色， 从功能上划分， 该培养基属于鉴别培养基。(3) 该小组通过统计黑色菌落的数目，可计算单位体积样品中大肠杆菌数目，若两个或 多个大肠杆菌连在一起， 平板上只能观察到 1 个菌落， 因此理论上他们的统计值比实际值偏 低。【答案】 (1) 小于 用滤膜过滤除菌 (2) 氮源 琼脂 鉴别 (3) 黑色菌落 偏低 两个或多 个大肠杆菌连在一起时，平板上只能观察到1 个菌落3将没有吃完的西瓜，盖上保鲜膜后放入冰箱，是很多人日常储藏西瓜的办法。但事 实上，有时候盖上保鲜膜储藏的西瓜中的细菌种类和数目反而比没用保鲜膜的多。 某生物研
5、究小组用保鲜膜保存三天的西瓜表面的瓜瓤制备浸出液，研究细菌的种类和数量。(1) 该研究小组需配制用于培养微生物的培养基，配制的培养基一般都含有水、碳源、和 。一般采用 法对培养基进行灭菌。(2) 为了避免培养基污染， 在培养过程中， 需将平板 ( 填“正置”或“倒置”) 。为了观察浸出液中微生物的种类和数量， 采用法接种。 接种时， 为了避免环境中微生物的污染，实验操作应在 附近进行。(3) 在培养 20 小时后， 观察到平板上有形态和颜色不同的菌落， 说明西瓜的浸出液中有 ( 填“一种”或“多种” )细菌。细菌总数越多，说明西瓜被细菌污染的程度越 ( 填“高”或“低” )。【解析】 (1)
6、虽然培养微生物的各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、碳源、 氮源和无机盐。常采用高压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌。(2) 平板冷凝后，皿盖内侧会凝结水珠。将平板倒置，可以防止皿盖上的水珠落入培养 基，造成污染。 要观察细菌的种类和数量，需采用稀释涂布平板法。为了避免周围环境中微生物的污染，需在酒精灯火焰旁进行接种。(3) 通过观察菌落的颜色、形状和大小判断微生物的种类，菌落种类越多，说明微生物 种类多；菌落数量多，说明西瓜被细菌污染的程度高。【答案】 (1) 氮源 无机盐 高压蒸汽灭菌 (2) 倒置 稀释涂布平板 酒精灯火焰 (3) 多种 高4. (2017 吉林市实验中学模拟)有机化工原
7、料氯苯不易降解，会污染环境，现欲从土 壤中分离高效降解氯苯的微生物。回答下列问题：(1) 为了获得能降解氯苯的微生物菌种，可在被氯苯污染的土壤中取样，并应选用以为碳源的培养液进行选择培养。 除含有碳源外， 培养液还应含有 、 无机盐和蒸馏水等。(2) 将获得的 3 种待选微生物甲、乙、丙分别接种在 1 L 含 20 mg 氯苯的相同培养液中培养(培养液中其他营养物质充裕、 条件适宜 )，观测从实验开始到微生物停止生长所用的时 间，甲、乙、丙分别为 33小时、 15小时、 46 小时，则应选择微生物 作为菌种进行后续培养。(3) 若要测定培养液中选定菌种的菌体数，既可用 直接计数，也可选用法统计
8、活菌数目，一般前者得到的结果 (填“ ”或“ (4) 原核 核糖体5. (2017 佛山市二模)牛奶中富含蛋白质，长期饮用有助于增强体质，但牛奶同时也 是多种疾病的传播载体。国家标准是每毫升牛奶中细菌数小于 30 000 个。以下是牛奶消毒 及细菌检测实验。#生竿IB(1) 图中步骤称为 消毒法。步骤是 (2) 培养基中的蛋白胨可以为微生物提供 。进行步骤操作时，应选用下列中的哪种工具？ 。为了避免杂菌污染，此步骤应在 附近进行。(3) 将接种后的培养基和作为对照的 同时放入 37 C恒温培养箱中，培养36小时。取出后统计各平板的菌落数，结果如下表所示。应该选择其中稀释倍数为的平板进行计数，经
9、过消毒后的牛奶中，细菌数大约是 /mL。牛奶稀释倍数102103104平板1菌落数87101平板2菌落数83121平板3菌落数85100【解析】(1)80 匚恒温水浴15 min是巴氏消毒法，步骤是进行系列稀释(或梯度稀释)。(2) 培养基中的蛋白胨可以为微生物提供碳源、氮源(和维生素)，是接种，因为需要计数，需用稀释涂布平板法，接种工具是涂布器；为了避免杂菌污染， 此步骤应在酒精灯火焰附近进行。(3) 统计各平板的菌落数时，应选择菌落数在30300的计数X经过消毒后的牛奶中，2细菌数大约是(87 + 83+ 85) - 3X 10 = 8 500个。【答案】(1)巴氏系列稀释(或梯度稀释)(
10、2)碳源、氮源(和维生素)B酒精灯火焰(3)2一个未接种的培养基 10 8 500个6. 人工瘤胃模仿了牛羊等反刍动物的胃， 可用来发酵处理秸秆， 提高秸秆的营养价值。 为了增强发酵效果，研究人员从牛胃中筛选纤维素酶高产菌株， 并对其降解纤维素能力进行 了研究。请回答下列问题：(1) 在样品稀释和涂布平板步骤中，下列选项不需要的是 (填序号)。酒精灯培养皿显微镜无菌水在涂布平板时，滴加到培养基表面的菌悬液量不宜过多的原因是(4) 刚果红可以与纤维素形成红色复合物，但并不与纤维素的降解产物纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。研究人员在刚果红培养基平板上，筛到了几株有透明降解圈的菌落(见下图)。图中降解
11、圈大小与纤维素酶的 有关。图中降解纤维素能力最强的菌株是(填图中序号)。【解析】(1)在样品稀释和涂布平板过程中，需要在酒精灯火焰附近进行操作，培养皿用于盛放培养基并培养细菌，无菌水做稀释的溶剂，此处唯一用不到的是显微镜。(2) 在涂布平板时，要取少量菌悬液滴加到培养基表面，因为如果滴加菌悬液量过多，菌悬液就会堆积在培养基表面影响分离效果。(3) 在向试管内分装含琼脂的培养基时，如果试管口粘附有培养基，就很容易使棉塞受到污染，因此，需要用无菌的酒精棉球将试管口擦拭干净。(4) 因为刚果红可以与纤维素形成红色复合物，且不与纤维素降解产物反应。所以在刚果红培养基平板上，菌落周围有透明降解圈是纤维素
12、被降解的结果，降解圈大小由纤维素酶的活性和量决定。图中菌落周围的降解圈最大，因此其降解纤维素的能力最强。【答案】(1)(2)培养基表面的菌悬液会出现积液，导致菌体堆积，影响分离效果(3) 避免培养基污染棉塞量与活性7. (2017 湖北省孝感市高三模拟)某些农作物秸秆富含纤维素，纤维素经过水解可以 形成葡萄糖，葡萄糖再经过发酵可以生产酒精。如图是利用农作物秸秆生产酒精的大致流程, 请回答下列问题：* jc0 * Font:宋预处理ps水解沁p 9(* jc0 * Fo nt:宋体* hps21 o(sup 9(发酵(1) 农作物秸秆含有丰富的纤维素，纤维素要经过纤维素分解菌分解成葡萄糖。人们常
13、常是从土壤中分离纤维素分解菌。分离纤维素分解菌常用的方法是 。其实验流程是：土壤取样选择培养一T将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上一T挑选产生的菌落。(2) 纤维素分解菌能合成纤维素酶，纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少含有三种组分，即。前两种酶使纤维素分解成 ，第三种酶将它分解成葡萄糖。(3) 图中发酵阶段常用的菌种是酵母菌，在酒精发酵时一般将温度控制在。发酵后是否有酒精产生，可以用 来检验。(4) 利用葡萄能生产果酒，进而生产果醋，生产果醋常用的菌种是醋酸菌，醋酸菌与酵母菌在代谢类型上的区别是 。【解析】(1)刚果红能与纤维素形成红色复合物，而刚果红对纤维二糖和葡萄糖无此作用，分离纤维素分解菌常用的方法是刚果红染色法，其实验流程是土壤取样一t选择培养一t梯度稀释一t将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上一t挑选产生透明圈的菌落。(2)纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少含有三种组分，即C酶、CX酶、葡萄糖苷酶，其中的C酶和CX酶使纤维素分解成纤维二糖，葡萄糖苷酶将纤维二糖
