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1、 毕 业 论 文 题 目：蔬菜的农药残留快测速检学 院：生命科学学院专 业：农村能源与环境技术姓 名： 完成时间：2011年4月联系电话：*贵阳云岩区部分蔬菜的农药残留快速检测 根据农残检测的实际结果进行相关实验分析*摘 要：通过以贵阳市云岩区部分蔬菜的农药残留快速检测为例，采用酶抑制率法（分光光度法）的实验方法检测部分蔬菜的农药残留量，根据实验结果判定被测样品蔬菜的农药残留情况，并分析在实验过程中某些样品出现错误数据的原因。关键词：云岩区；酶抑制率法；农药残留；实验结果；原因 众所周知农药在我国蔬菜种植及生产过程中发挥着极其重要的作用，然而有些果蔬农民及果蔬商违反施用农药后安全期的规定，急于
2、上市出售，导致了果蔬产品中农药残留量超出国家标准，不仅使生态环境受到污染，更为严重的是损害了消费者的身体健康1。并且随着人民生活水平的不断提高，蔬菜中农药残留对消费者健康的危害已经引起了社会的广泛关注。一、 实验题目：贵阳云岩区部分蔬菜的农药残留快速检测二、 实验方法：酶抑制率法（分光光度法）三、 实验目的： 通过部分蔬菜农残快速检测的实验，掌握农残快速检测试剂的配制方法和农残快速检测仪的使用方法，增强实验的动手能力，发散分析实验问题的思维。四、 实验原理：在一定条件下，有机磷和氨基甲酸酯类农药对胆碱酯酶正常功能有抑制作用，其抑制率与农药的浓度呈正相关。正常情况下，酶催化神经传导代谢产物（乙酰
3、胆碱）水解，其水解产物与显色剂反应，产生黄色物质，用分光度计在412nm处测定吸光度随时间的变化值，计算出抑制率，通过抑制率可以判断出样品中是否有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类农药的存在。五、实验仪器：剪刀1把、不锈钢镊子1把、量筒（500ml和10ml）、小烧杯（若干个）、试管（若干支）、可调移液枪(10100微升和15毫升)、T6新世纪紫外可见分光光度计1台、电子天平1台、电热恒温培养箱1个、洗瓶1个、培养皿1个等其他配件。六、实验材料：AG209农残速测试剂、纯净水或蒸馏水、一定浓度的酒精、被测蔬菜为贵阳云岩区市售的辣菜、芹菜、小白菜、生菜、菠菜、瓢儿白、蕨菜、豌豆夹、茴香菜、西红柿、南瓜、
4、土豆、胡萝卜、金针菇、折耳根、葱、青椒、蒜苗、大豆、藕20种蔬菜。七、AG209 农残速测试剂的配制：1. 缓冲剂的配制：每包缓冲剂加510ml蒸馏水或纯净水溶解，常温保存。2. 显色剂的配制：每瓶显色剂加10.5ml缓冲溶液溶解，4冰箱保存。3. 底物的配制：每瓶加3.1ml蒸馏水或纯净水溶解，4冰箱保存。4. 注明：胆碱酯酶不用配制，直接取用。八、 实验步骤：1. 样品的处理：将蔬菜样品冲洗掉表面的泥土，剪成1cm左右大小的碎片，用电子称称取1g左右放置于小烧杯中，待用。2. 在小烧杯的样品中加入5ml缓冲溶液，震荡12min,倒提取液于试管中，静置35min，待用。3. 取2.5ml提取
5、液于试管中，加入0.1ml酶溶液，再加0.1ml显色剂摇匀后放置于37的恒温箱中，静置15min以上，取出来后再加入0.1ml底物摇匀，摇匀之后倒于比色皿中，随即放入仪器比色池中，此时检液开始显色反应，记录反应3min前的At0 ，待3min后记录反应后的At3 值，计算出吸光度变化值A0 = At3 -At0 。4. 样品溶液的测试：先于试管中加入2.5 ml样品提取液，其他操作与对照溶液 测试相同，记录反应3min的吸光度变化值At 。九、实验结果显示及计算：为了实验需求与方便，将被测蔬菜一一进行编号；原本按照实验要求在电子天平上称取1g样品进行实验，但是在实际实验操作过程中根本很难准确称
6、取，实验讲究的就是真实性，为此样品蔬菜编号及称量实际重量明细如下表（1）：表（1）：蔬菜样品名称编号及称重明细表蔬菜名称 编号序号 实际称重含量辣菜10.996g 芹菜2 0.999g 小白菜3 1.005g 生菜4 1.004g 菠菜5 1.004g 瓢儿白6 1.001g 蕨菜7 0.998g 豌豆夹8 0.999g 茴香菜9 1.002g 西红柿10 0.999g 南瓜11 0.997g 土豆12 0.998g 胡萝卜13 1.001g 金针菇141.003g 折耳根15 0.996g 葱16 0.999g 青椒17 0.998g 蒜苗18 0.998g 大豆19 1.001g按照农药残
7、留检测的实验方法检测以上蔬菜样品，便得出以下实验数据，并根据抑制率的公式计算出所测样品的抑制率。其中，抑制率(%)=(A0-At)/ A0100（注明：该式中A0对照溶液反应3min吸光度的变化值；At样品溶液反应3min吸光度的变化值）其实验结果详细情况如表（2）：表（2）：整个实验数据及计算结果表第一组第二组序号At0AT3 Ax抑制率序号At0AT3 Ax抑制率空白组0.2830.7520.469空白组1.2081.7890.58111.0571.3770.3231.77%81.2231.7450.52210.15%21.3491.7060.35723.89%91.4421.392-0.
8、05108.61%30.180.3670.18760.10%101.0081.3920.38433.90%40.9981.3630.36522.17%11-0.344-0.1770.16771.26%50.0720.6720.6-29.84%120.5561.0090.45322.03%60.8581.4010.543-15.78%13-0.3980.1560.5544.65%70.0280.3860.38617.69%140.9831.3490.36637.01%第三组序号At0AT3 Ax抑制率空白组0.2970.9990.702150.2330.8160.58316.95%160.805
9、1.2370.43238.46%171.0531.6110.55820.51%181.2311.7320.50128.63%190.4571.0490.59215.67%十、实验结果分析：本次试验结果除了小部分数据不符合常理之外，大部分还是符合实际生活情况的。并且得出结论：样品1号、2号、4号、7号、8号、10号、12号、13号、14号、15号、16号、17号、18号和19号农药残留量都在国家安全标准的范围之类，以上样品蔬菜人们可以放心食用，不会对人类身体造成影响和不良危害。但是样品3号和11号的农药残留分别为60.10%和71.26%，据资料显示，农药残留量高于50%的蔬菜对人类健康有危害。
10、1.样品蔬菜农药残留量多少的分析1号（辣菜）、2号（芹菜）、9号（茴香菜）除此实验样品之外还有茼蒿菜、香菜等本身有一种很浓的香辛味，是天然的驱虫剂，虫子少，这些菜自然不用打农药了，因而农药的残留量就比较少，故有香味的蔬菜可以多吃。7号（蕨菜）农药残留量最少，是由于野菜几乎没有使用任何农药，没有什么农药残留，最安全。另外豇豆、韭菜农药多，黄瓜、西红柿（10号）杀菌剂多。因为豇豆比较爱长虫，种植时会使用大量的农药。洋葱和韭菜一样，根部容易长韭蛆等害虫，常会灌较浓的农药，有些农药毒性大，且容易残留。黄瓜和西红柿生长环境湿度很大，易生病，一般用药量都比较大，尤其杀菌剂用得比较多。不过相对于杀虫剂，杀菌
11、剂对人体的危害要小一些。大白菜其实是放心蔬菜，大白菜一般在秋季种，只在苗期用一些防治蚜虫，小菜蛾的杀虫剂，距离上市时间，也就是大家吃到菜的时间比较远，农药残留较少。洋白菜、生菜也是如此。我们每天都必需摄入带有一定农药量的蔬菜，除了在选择蔬菜品种之外，还可以从以下几个方面减少蔬菜的农残量，确保我们食入的蔬菜既安全又卫生。有资料显示，中国农业大学食品学院的实验表明，用自来水将蔬菜浸泡10-60分钟后再稍加搓洗，可除去15%-60%的农药残留。对于茄子、青椒和水果表面有蜡质的果蔬最好先泡后洗。将蔬菜切成小块后浸泡会导致农药渗入，最好的方法是保持蔬菜的完整，用流水冲洗。也可以用淡盐水或头一两次的淘米水
12、浸泡，前者可以让农药快速溶解，后者可中和农药毒性，但不要浸泡太长时间。高温加热也可以使农药分解，比如用开水烫或油炸。实验证明一些耐热的蔬菜，如菜花、豆角、芹菜等洗干净后可以用开水烫几分钟，可以使农药残留下降30%。再经高温烹炒就可以清除90%的农药。蔬菜去皮虽然会造成一定的营养损失，但是可以减少农药残留。黄瓜、茄子等农药用得多的蔬菜和大部分水果，最好去皮吃。总之尽量从有效途径减少农药残留量以保证我们人类的健康。2.不符合常理的实验数据分析被测样品5号和6号的农药残留量分别为-29.84%和-15.78%，检测结果中抑制率出现负值，是指在计算中样品的At 比空白值A0 要大。造成的原因：可能是操
13、作中的系统误差，由于是首次做该实验，操作不是很熟练就会产生人为的系统误差，较小的负值误差（-10%）以下，则是在允许范围之内3。但是以上两个数据的负值误差已经在-10%以上了，原则上必须进行两次重复检测。所以该数据不能作为衡量该样品农药残留的依据。在实验过程中，测试第一组时，出现空白组的吸光值差居然在0.3以下，写实验报告时查相关资料才知道空白三分钟前后吸光值差在0.3-0.8为好，如果空白低于0.3可适当加大酶的使用量2。那是由于酶的剂量不够造成的，后来那组数据全部都不能使用。还有，有些实验数据误差太大的，可能是在实验操作过程中以下原因导致的。（1）试剂储存的温度不够苛刻；严格说来速测试剂要严格放置在规定温度下保存。酶抑制率测试法（分光光度法）所用的试剂大多数为生化试剂，因此它们的保存条件比较苛刻。对于粉化剂的酶及底物应保存在-18的环境中。对于已经配置成溶液的试剂如酶液、底物溶液、显色剂溶液等应置于0-4环境中保存。由于当地实验室的实际情况，我们配置好的试剂溶液用完后没有及时放到冰箱里低温保存，时间短一点倒无所谓，但是我们将那些试剂放于室温中直到实验结束。这样对实验结果多多少少会有一些影响。（2）样品重量的多少也有影响；实验要求是称取样品1g，但是在实际操作中几乎不可能准确称取，小于1g的，测量结果就会偏低一些，大于1g的，测量结果就会偏高一些。再者
