基因工程技术原理与应用

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1、基因工程技术原理与应用（ 总分： 1046.00 ，做题时间： 90 分钟 ）一、填空题 （ 总题数： 51，分数： 198.00）1. BarnH I是识别6个核苷酸的酶，其切割产物的平均长度的理论值是1。（分数： 1.50 ）填空项 1: （正确答案： 40）解析：2. 通过比较用不同组合的限制性内切核酸酶处理某一特定基因区域所得到的大小不同的片段，可以构建显 示该区域各限制酶切位点位置的 1 。（分数： 1.50 ）填空项 1: （正确答案：限制酶切图谱）解析：3. EC0K是I类限制性内切酶，分子组成是a 2 B 2丫。a亚基的作用是; B亚基的作用是亚基的作用是 。（分数： 4.50

2、 ）填空项 1: （正确答案：限制 修饰 识别）解析：4. 个体之间DNA限制性片段长度的差异称为1。（分数： 1.50 ）填空项 1: （正确答案：限制性片段长度多态性）解析：5. 限制性内切核酸酶的命名原则是：第一个字母来自 ；第二、三两个字母来自 ；第四个字母则表示 。（分数： 4.50 ）填空项 1: （正确答案：属名 种名 菌株名）解析：6. 在限制性内切核酸酶切反应管中添加各种成分后，需要离心数秒钟，其目的是和（分数： 3.00 ）填空项 1: （正确答案：混匀 防止部分酶切）解析：7. 为了进行部分酶切可以采用下列措施： 、和等。（分数： 4.50 ）填空项 1: （正确答案：降

3、低酶量 缩短反应时间 增大反应体积）解析：8限制性内切核酸酶的识别序列分别由4、6、8对碱基组成，它们在 DNA序列上的切割频率的理论值分别是 、 和 。（分数： 4.50 ）填空项 1:解析：9. 限制性内切核酸酶通常保存在（正确答案： 44 48 48）1 浓度的甘油溶液中。（分数： 1.50 ）填空项 1: （正确答案： 50%）解析：10.测序酶是修饰了的 T7 DNA聚合酶，它只有 酶的活性，而没有 活性。（分数： 3.00 ）填空项 1:解析：11. 切口平移 （nick translation）（正确答案：5 -3合成 3 -5外切）法标记DNA勺基本原理在于的和的作用（分数：

4、4.50 ）填空项1: （正确答案：DNA酶I内切酶活性 DNA聚合酶I的5 -3合成酶活性）解析：12.欲将某一具有突出单链末端的双链DNA分子转变为平末端的双链形式，通常采用的方法是 和（分数： 3.00 ）填空项1: （正确答案：DNA聚合酶I 5 -3外切酶 5 -3合成酶）解析：13.反转录酶具有催化 DNA合成的作用，同时还具有 的作用，可以将 DNA-RNA杂合双链中的 消化掉。（分数： 3.00 ）填空项1: （正确答案：RNAB H RNA解析：14. 基因工程中所用的载体主要有三类： 、 和（分数： 4.50 ）填空项 1: （正确答案：质粒 病毒 人工染色体）解析：15.

5、 一个最简单的质粒载体必须包括以下几个部分： 、 和16. 如果两个质粒不能稳定共存于同一个寄主细胞中，则属于 群，这是因为他们的 所致。（分数： 3.00 ）填空项 1: （正确答案：同一不亲和群 复制机制相同）解析：17. 质粒的拷贝数是指细胞中 1 。（分数：1.50 )填空项 1解析：: （正确答案：质粒的拷贝数与基因组数的比值）18.ColEl 质粒复制的起始需要三种酶： 、 和（分数： 4.50 ）填空项1: （正确答案：DNA聚合酶RNA聚合酶RNA酶H）解析：19. 那些没有可以检测表型的质粒称为 1 。（分数： 1.50 ）填空项 1: （正确答案：隐蔽性质粒）解析：20.

6、噬菌体可以被改造作为基因工程载体，主要是由于 和 （分数： 3.00 ）填空项 1: （正确答案：在大肠杆菌细胞中繁殖复制 背景知识清楚）解析：21. 入噬菌体载体主要有两种类型， 插入型和置换型。就酶切位点来说，插入型为 个；置换型为 个。（分数： 3.00 ）填空项 1: （正确答案：一个 两个）解析：22. M13噬菌体DNA的复制分为三个阶段：、和（分数： 4.50 ）填空项1: （正确答案：S4R RFRF RPSS解析：23. 噬菌粒是由质粒和噬菌体 DNA共同构成的.其中来自质粒的结构主要是 和;来自噬菌体的主要结构是 。24. 入噬菌体由于包装的限制，插入外源DNA片段后，总长

7、度应在噬菌体基因组的1范围内。（分数： 1.50 ）填空项1: （正确答案：75% 105%解析：25. 引物在基因工程中至少有 4 方面的用途： 、 、和 （分数： 4.50 ）填空项1: （正确答案：合成 CDNA合成探针PCR引物DNA序列测定）解析：26. 利用Taq DNA聚合酶进行PCF反应所得产物不是平末端，而是在 端带有一个突出的 ;据此人们设计了 PCR产物的隆法。（分数： 4.50 ）填空项 1: （正确答案： 3 A T 载体）解析：27. 简并引物PCR主要是依据蛋白质的氨基酸序列设计1引物来扩增相应的基因（分数： 1.50 ）填空项 1: （正确答案：简并）解析：28

8、. 现有的克隆基因的策略大体上可以分为三类： 、和分数： 4.50 ）填空项 1:（正确答案：定位克隆功能克隆 表型克隆）解析：29.DNA重组连接的方法大致有4 种： 、 、和 。（分数： 6.00 ）填空项 1:（正确答案：黏末端平末端 同聚物加尾接头连接法）解析：30.SD序列是mRN毋子中与结合的序列， 位于_密码子的上游;在基因组中的对应位置是位点与 位点之间（分数： 6.00 ）填空项 1: （正确答案：核糖体 起始 转录起始 翻译起始）解析：31. 携带有外源基因并能持久传递给子代的植物称为 植物；这些外源基因就叫做 （分数： 3.00 ）填空项 1: （正确答案：转基因 转基因

9、）解析：32. 重组子的筛选有两层含义，一是 ；二是 。（分数： 3.00 ）填空项 1: （正确答案：区分重组子和非重组子 区分带有重组子和非重组子的大肠杆菌）解析：33限制性内切核酸酶切割 DNA后产生5端突出的黏性末端，可以用 进行3端标记；如果限制性内切核酸酶切割DNA后产生3端突出的黏性末端，可以用 进行5端标记。（分数： 3.00 ）填空项1: （正确答案：Klenow酶T4DNA聚合酶）解析：34. 为了获得单链标记的 DNA探针可以采用以下三种方法：、和（分数： 4.50 ）填空项1: （正确答案：M13载体反转录不对称PCR解析：35. 根据 Northern 杂交的结果可以

10、说明 ；根据 Southern 杂交的结果可以说明 ；根据 western杂交的结果可以说明 ；根据原位杂交的结果可以说明 。（分数： 6.00 ）填空项1: （正确答案：基因是否转录和mRNA勺大小DNA是否存在和酶切片段的大小 相应抗原的存在 互补序列的位置）解析：36. Northern 杂交和 Southern 杂交的根本区别在于 和 。（分数： 3.00 ）填空项 1: （正确答案：样品的区别 电泳方式的区别）解析：37. 欲将某一具有单链突出末端的双链DNA分子转变成平末端的双链形式，通常采用的方法有 和（分数： 3.00 ）填空项1: （正确答案：S1核酸酶切割DNA聚合酶补平）

11、解析：38. 由于不同构型的DNA插入EB的量的不同，它们在琼脂糖凝胶电泳中迁移率也不同，scDNA的泳动速度; oc DNA的泳动速度 ; 1DNA居中。39. 在基因工程中，导入外源基因的主要方法有 、和 等。（分数： 6.00 ）填空项 1: （正确答案：转化 噬菌体侵染 显微注射 基因枪）解析：40. 在基因组计划中用来构建人基因组DNA文库的载体通常有4种，分别是、和（分数： 6.00 ）填空项1: （正确答案：质粒 入噬菌体YAC BAC）解析：41. 反向PCR的方法通常用来 ;重组PCF的方法通常用来 ;原位PCR的方法通常用来 分数： 4.50 ）连接两个DNA片段获得靶序列

12、的填空项 1: （正确答案：扩增已知片段两侧的序列 位置信息） 解析：42. 核酸凝胶电泳中常用的染料是 1（分数： 1.50 ）填空项 1: （正确答案： EB）解析：43. 为对某一生物的基因进行全面的研究，只需建立 个基因组文库，同时必须建立 个CDNA文库。（分数： 3.00 ）填空项 1: （正确答案：一个 多个）解析：44. 双脱氧链终止法测定 DNA碱基序列需要的试剂为 、和等。（分数： 6.00 ）填空项1: （正确答案：dNTP ddNTP引物DNA聚合酶）解析：45. Taq DNA聚合酶需要适当浓度的 Mg+才能发挥作用。Mg+浓度升高对Taq DNA聚合酶的效应是; M

13、g+浓度降低，对Taq DNA聚合酶的效应是 。（分数： 3.00 ）填空项 1: （正确答案：活性升高特异性降低 活性降低特异性升高）解析：46. 普通质粒载体、入噬菌体载体、黏粒载体和噬菌粒的容量由大到小依次为 、 、和（分数： 6.00 ）填空项1: （正确答案：黏粒载体入噬菌体载体 噬菌粒 普通质粒载体）解析：47. 目前栽培面积较大的 5种农作物是 、和。其中以 为最大（分数： 9.00 ）填空项 1: （正确答案：大豆 玉米 棉花 油菜 马铃薯 大豆）解析：48. 外源基因导入植物细胞的方法为 、和。（分数： 4.50 ）填空项 1: （正确答案： Ti 质粒 Ri 质粒 基因枪）解析：（分数： 7.50 ）填空项 1:解析：50. 大肠杆菌中选择性标记一般为49. 外源基因导人动物受精卵的方法有 、 、和 （正确答案：显微注射 病毒侵染 细胞移植 细胞核移植 精子介导）；酵母菌中选择性标记一般为 。（分数： 3.00 ）填空项 1:（正确答案：抗生素抗性基因营养缺陷型）解析：51. 核型多角体病毒有两种表现型和 ；分别感染 _和 （分数： 6.00 ）填空项 1: （正确答案：包埋型 出芽型病毒 不同个体 同一个体的不同细胞）解析：二、判断题（总题数： 26，分数： 26.00）52. 限制与修饰现象是宿主的一种保