实验 植物叶脉标本的制作

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1、实验植物叶脉标本的制作一、实验目的:掌握叶脉标本的制作方法;加深对植物叶脉即叶片表面维管束(疏导组织)分布的了解二、实验原理:利用叶片的叶脉和叶肉对化学物质腐蚀的差异性,使用酸性或碱性物质将叶肉腐蚀后,设法除去叶肉,留下尚未被腐蚀的叶脉。叶脉标本可以用来观察叶片的疏导组织,制作后又常用颜料染色作为书签,因此又称作叶脉书签标本。它是在除去叶肉漂洗后再经漂白、染色、压干而成。除去叶肉有两种方法:腐蚀法:配制510%的氢氧化钠或氢氧化钾溶液,放入烧杯中,加入叶片,在酒精灯或电炉上煮沸后,再文火煮制(加热时间一般10-15分钟),煮时要用筷子或玻璃棒等不断的搅动,使之受热均匀。当溶液的颜色由无色变为深

2、褐色(或叶肉有脱落),叶片由硬变软时,用筷子从烧杯中取出,在清水中洗净碱液后,放到盛有清水的培养皿中,使叶片在培养皿底部展平再用旧牙刷垂直由上而下轻轻拍打叶片或用牙刷轻轻的刷,大部分的叶肉会除去。把含叶肉的混水倒掉,换上清水,并在培养皿底部铺一张白纸,可清晰的看到未除去的叶肉,再用牙刷将其打掉。若无牙刷,从清水中取出一片煮好的叶子,平铺于一只手的手掌上,再用另一只手的食指轻轻摩擦叶片,并不时在清水中洗去以被擦掉的叶肉,即成完整的叶脉标本。然后可进行漂白、染色,压干。腐烂(水沤)法:将新鲜叶片放入水中浸泡,利用各种菌类对各种叶肉蛋白的腐蚀作用使叶肉腐败,叶表皮与叶肉部分分离,并出现隆起。这时,先

3、用镊子将表皮撕掉,轻震或轻拍,部分叶肉会落于水中。没脱离的部分采用上述牙刷打或手擦的方法除去,从而制成完整的叶脉标本。多数落叶不适合用沤制法制作叶脉标本,只有橡皮树等肉质厚、叶脉细软的落叶才适合用腐烂法制作。一般需要半个月左右,浸泡的时间与气温、叶片质地均有密切关系。气温高,叶片薄,一般一周左右;气温低、叶片厚,时间长些,浸渍时注意换水。三、实验器材:植物叶片、NaOH或KOH、NaCO、双氧水或漂白粉、各色普通布23料染色剂、烧杯、电炉、石棉网、大号镊子、培养皿、牙刷、玻璃棒、小塑料桶、吸水纸(或草纸)、烘箱、书。四、实验步骤:1、采:采集叶片。选取叶脉坚韧,叶质较厚较硬、大小适中、叶面完整

4、、叶脉丰富、形态美观的树叶(如槭树、悬铃木、玉兰、杨树、榕树、菩提叶等叶脉粗壮的叶)。2、煮:将叶片置于沸腾的NaOH溶液中煮约10-15分钟(视叶片状况而定)。溶液配制:称取35gNaOH(具强腐蚀性,使用时应特别小心)和25gNaCO放23入烧杯中,加入1L水混溶,使之溶解,制成溶液。3、洗:停止加热,用筷子或镊子将叶片取出,放入盛有清水的小塑料桶中或用流水漂洗干净(一般在两次以上),除去叶片上残留的NaOH溶液。4、刷:将叶片置于培养皿背部,加少量的水,把牙刷打斜(与水平面大约成45度角),顺叶脉轻轻地刷净地肉(敲打时不时用水洗掉打下地叶肉)。刷时注意:只向一个方向刷(绝对不能来回刷),

5、以免将叶脉刷坏。刷时先从背面开始,刷净背面再刷正面,主叶脉边沿处可用垂直敲打法。5、漂白:将刷洗干净的叶脉放入用20%的双氧水(或漂白粉10克溶于1L水中制成漂白液备用)溶液中片刻,待叶脉标本基本变白后取出用清水漂洗干净。6、染色绘图:将普通染布用的染料用温水调和加热制成染色液,然后将已漂白的叶脉标本放入浸泡3-4分钟或用玻璃棒滴管等沾取染色液涂抹到叶脉标本上,制成单色或彩色的叶脉标本,也可以在叶脉上绘图。7、烘干压制:将染色后的叶脉标本平铺于培养皿背部,放于105C烘箱5分钟左右,取出夹于书本中压干,即成色彩绚丽的叶脉标本。8、粘贴、过胶:晾干后,可用纸粘住,过胶保存。五、注意事项1、必须选

6、择叶脉坚韧、清晰、完整的叶片。2、在碱液煮制过程中,要根据植物的种类、叶片厚薄、碱液浓度大小、碱性强弱等条件决定煮制时间。叶片较薄、碱液浓度大(用NaOH或KOH等强碱),煮制时间要短一些。相反,叶片较厚、碱液浓度小(用Na2CO3),煮制时间要常一些。3、为保证在实验中既能较容易拍打掉叶肉,又不至于煮的太烂,实验时要根据叶片厚度进行观察。当煮至叶肉较易去掉时,要及时移开火焰或熄火,再借助于烧杯中的余热保持几分钟,就会达到容易去掉叶肉的程度。如移开火焰或熄火时,叶肉已经很容易去掉了,要及时将叶片从烧杯中取出,洗净后备用。用碱液煮过已经清洗的叶片,如叶肉扔不易去掉,要放入碱液中再煮一会,直到叶肉容易去掉为止。但要防止过火。若煮的时间较长,主脉易裂开,难以制成完整的叶脉标本。

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