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1、细胞电融合仪?ECM2001安装 / 操作手册目录1 检查清点货物及安装2 技术规格3 操作细则4 产生杂交瘤的实验方法5 服务及保修6 附录：电穿孔技术在转基因及动物克隆中的应用第一节检查清点货物及安装1.拆封包装：ECM 2001 细胞电融合仪采用纸箱包装，收到货物后，请检查包装完好程度，如果有任何损伤请速与我公司联系。请小心地拆开包装，将仪器及附件取出，并依据合同清点货物内容及数量，如果有任何外观损伤或者货物与合同有差异，请速与我公司联系。请保留包装箱，以便满足将来一旦要运送该仪器的需求。2.电源：该仪器采用 220V 电源，请确认您的电源为稳定的220V。 如果电源不稳定的话，有可能对
2、仪器造成严重损害！请确认您的电源严格接地，我们提供给您的电源线为三芯带地线电源。请不要改动该三芯电源线结构，否则有可能对仪器造成严重伤害！3. 安装：如果确认仪器包装无问题，且与合同相符，则可以进行安装。请将仪器安装在一个干燥，水平，常温环境中。尽量避免灰尘和化学药品对仪器的损害。仪器与其他物品的距离不少于15 厘米，以保证仪器冷却的需求。将电源线等附件拆包装，待用，依据后续章节继续操作。第二节技术规格1. 外观尺寸：宽： 17高： 11长： 17.5 2.重量：47 磅3.电气规格：电源： 220V，单相，7A 耐熔保险交流：频率固定在 1MHZ电压：0 75 V （从零到峰值）脉冲时间：
3、099 秒直流：高电压模式（HV）电压：10 3000 V（峰值）脉冲时间： 199 毫秒低电压模式（LV）电压：10 500V（峰值）脉冲时间： 199 毫秒0.01 0.99毫秒脉冲次数： 1 994. 前面板控制介绍：编号名称功能1SET AC VOLTAGE此旋钮用于设置交流电压（0-75V ）。调整的数值显示在左侧的显示屏上。2AC DURATION SECONDS此按钮用于设置自动模式下交流电被激活时间的长度。时间用“ +”和“ - ”按钮设置，最大到99 秒。3POST FUSION AC SECONDS此按钮用于设置自动模式下脉冲施加后作用的时间。最大到 9 秒，使融合后的细胞
4、聚集在一起。4SELECT THE MODE此旋钮用于选择电穿孔模式：HV高压模式（ 10-3000伏 /1-99 微秒）；LV 低压模式（ 10-500伏 /0.01-0.99毫秒）；LV 低压模式（ 50-500伏 /1-99 毫秒）。5 PULSE LENGTH6 SET VOLTAGE7 NUMBER OF PULSES8 WAIT9 AUTOMATIC START10 REMOTE11 NUMBER OF REPEATS12 MANUAL START13 PRINT SETTINGS1. 注意事项：一旦模式选择好，相应的指示灯就会亮起。此按钮用于控制电穿孔 / 电融合方形脉冲的脉冲长
5、度，设定选择用 Lower(+) 和 Upper(-) 按键 。此旋钮用于调节脉冲电压。HV高压模式下，电压显示单位为千伏，设定范围为10-3000 伏； LV 低压模式下，设定范围为10-500 伏。顺时针旋转电压增加，逆时针旋转电压减小此按钮用于设定脉冲个数（1-99 ）。“ +”和“ - “按钮用来选择所需脉冲个数。每向融合池发送一个脉冲，黄灯就会亮一下，同时发出一声嘟嘟声当仪器运行到一个循环结束时，出于安全原因放掉电容器中的所有电荷，此灯会亮。当此灯亮起的时候，绝对不能操作主机。按一下并释放此按钮，可根据预先设定的电压、脉冲长度、脉冲个数激发一个排列和电穿孔循环。此接口用于连接远程控制
6、盒，可以远距离操作主机。此按钮用于设定重复循环次数，最多可达9 次。此双位置按钮允许手动控制ECM2001，第一次按下按钮，仪器开始工作，灯亮表示电压持续施加。第二次按出按钮，灯熄灭时，电融合电压被送到融合池上。此按钮用来打印排列设置和电融合/ 电穿孔参数。如果使用 Enhancer 400 的话，请使用Enhancer 400上的该功能按钮。第三节操作细则请严格按照下述操作细则对ECM 2001 进行操作。在没有连接打印机的情况下，严禁按“PRINT SETTINGS”按钮！否则仪器将会锁死。如果打开仪器电源的时候，发现“MANUAL START”按钮处于亮灯状态，请马上关闭电源！2.程序或
7、步骤（操作过程）高电压警告： 为了实际操作和安全的原因，在手动或自动操作模式中，ECM 2001 在施加交流电场或直流脉冲的过程中，请不要接触任何电缆或电极连接处，当需要连接或拆下电缆时，要检查系统不在操作中或处于备用状态。Automatic自动操作模式：1.连接 Chamber（融合池）和位于 ECM 2001 背面的输出插口。2.如果使用打印机的话，把打印机电源电缆插到ECM 2001 背面的打印电源接口上 (J4) 。3.如果使用打印机的话，用串口线缆将打印机连接到ECM 2001 背面的打印机输入口上。4.如果使用 Enhancer 400（示波器）的话，将Enhancer 400的电
8、源线插在市电上。5.如果使用 Enhancer 400（示波器）的话，先用电缆将Enhancer 400 的输入插口与 ECM6.2001 背面的输出插口连接，然后用电缆把融合池连接在Enhancer 400 上的输出插口上。7.把 ECM 2001 的电源线插到合适的电源插座上（220 伏）。8. 打开 ECM 2001 背面上的电源开关。9.设定所需的 AC Voltage (1)即交流电压。10.设定所需的 AC Duration Seconds (2)即交流持续时间。11.选择 HV或 LV 模式 (4) 。12.设定 DC Pulse Length (5)即直流脉冲长度。13.设定
9、DC Voltage(6)即直流电压。14.设定 Number of Pulses (7)即脉冲个数。15.设定 Post-Fusion AC Seconds (3)即融合后交流时间到所需的脉冲长度。16. 把细胞悬液 / 试剂倒入 BTX Chamber（融合池）中。17. 检查所有的设置。18. 按下 Automatic Start(9)即自动按钮，ECM 2001 发出一声嘟嘟声，把预先设置的所有参数送到Chamber（融合池）上。19. 仅对电穿孔来讲，设置AC Voltage (1)、AC Duration (2)和 Post-Fusion AC (3)为零，其余步骤不变。Manua
10、l 手动操作模式：1 其余步骤同1-11 ，按一下Manual Start(12)即手动按钮，手动模式中，ACDuration (2)镜下观察Start(12)即交流持续时间按钮不再起作用，持续施加交流电场。在显微Chamber 中细胞，当细胞相互接近成二聚体时，再次按一下即手动按钮，结束交流场。ECM 2001 发送电穿孔脉冲。Manual注意：交流电压的值不能在指示器上调节。3. 仪器设置：与打印机的连接方式：1.将 ECM 2001 的电源线插在市电插线板上。（220 伏）2.把打印机电源电缆插到ECM 2001 背面的打印电源接口上 (J4) 。3. 用串口线缆将打印机（ 501 型）
11、连接到 ECM 2001 背面的打印机输入口上。4.使用 5343 型连接电缆或者 464 型连接电缆（适用于Microslide 450， 450-1 ， 450-2 ，5.450-3 ）或者 465 型连接电缆（适用于 Microslide453， 453-10）连接 ECM2001 与6.Microslides,将连接电缆插入到 ECM2001 背面的输出插口中。630B 安全操作池或7. 者其他电极针的连接与此类似。与 Enhancer 400 的连接方式：1. 仔细阅读 Enhancer 400 的使用手册。2.将 ECM 2001 的电源线插在市电插线板上。（220 伏）3.将 E
12、nhancer 400 的电源线插在市电插线板上。（220伏）4.将红 / 黑高电压电缆两端分别依照颜色插入ECM 2001 的相对应的输出和 Enhancer5. 400 的相对应的输入插口中。6. 连接电击设备。（参见与打印机连接的第四步）4. 操作：自动操作1. 打开 ECM 2001 背面的电源开关。2. 设置所需的交流脉冲时间（2）。3. 选择高压模式（ HV）或低压模式（ LV）（ 4）。4. 设置直流脉冲长度（ 5）。5. 设置直流电压（ 6）。6. 设置直流脉冲个数（ 7）。7. 设置融合后所需的交流脉冲时间（3）。8. 把细胞悬浮液 / 试剂倒入 BTX Chamber 中。9. 检查所有的设置。10. 按一下自动按钮（ 9）会发出一声嘟嘟声， ECM 2001 输送设置的所有参数到融合槽中。11.对于电穿孔，设置 AC Voltage (1)、 AC Duration (2)和 Post-Fusion AC (3)为零，其余步骤不变。手动操作：1.其余步骤同自动操作中的1-9 步。2.按一下
