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1、克瘤丸体外对人肺癌细胞株A549的抑制作用研究 目的研究中药复方克瘤丸3种提取方法的提取物体外对人肺癌细胞株A549抑制作用，探讨克瘤丸剂型改革的方向。方法采用MTT法测定克瘤丸3种提取方法的提取物对人肺癌细胞株A549增殖的抑制作用。结果克瘤丸组合提取法取得的提取物抑制率明显高于其他两种提取方法；当药物浓度为5 mg/ml时，对肺癌细胞有明显的抑制作用；克瘤丸对肺癌细胞株增殖的抑制呈一定的时间和浓度的依赖性，随着时间和浓度的增加逐渐增强。结论克瘤丸体外具有显著抑制人肺癌细胞株A549的作用，组合提取法有望成为今后剂型改革的研究方向。克瘤丸； 提取方法； 人肺癌细胞株A549Abstract：
2、ObjectiveTo compare the inhibitory influence among three distill methods of KeLiu pill on the proliferation of human lung cancer cell line A549 and to research the best form of medication. MethodsKeLiu pill was extracted by three methods, and the effects of three extracts on human lung cancer cell l
3、ine A549 were observed by MTT assay. ResultsThe inhibitory rate of KeLiu pill extracted by integrated extracted method was the best, and it had remarkable inhibitory effect on human lung cancer cell line A549 at the concentration of 5-10mg/ml. In addition, the inhibition of KeLiu pill on proliferati
4、on of cell growth was in time-depended manner to some degree and the effect was enhanced with time. ConclusionKeLiu pillhas remarkable effect influence on human lung cancer cell line A549 in vitro. Integrated extracted methodis valuable form of medication.Key words：KeLiupill;Distill method;Human lun
5、g cancer cell line A549 我科在学习历代中医文献，结合多年临床经验和反复临床实践的基础上，围绕肺癌的病机特点，提出了“祛瘀解毒，扶正抗癌”的治疗大法，创研出治疗晚期非小细胞肺癌具有较好疗效的克瘤丸制剂（苏药制字 Z04000531）。克瘤丸用于临床已有7年之久，临床实践证明，克瘤丸具有一定的稳定瘤体、抑制肿瘤生长的效果，与化疗合用具有提高疾病控制率的作用1，2。实验研究显示克瘤丸对动物移植性肿瘤有明显的抑制作用3和免疫提高作用4。鉴于克瘤丸在临床抑癌、抗转移中所显示的良好效果，本实验将通过克瘤丸对人肿瘤细胞的生长抑制作用的实验研究，从体外的研究中验证克瘤丸的抗肿瘤作用。由
6、于克瘤丸的剂型为丸剂，制作方法为研末，水泛为丸，每天15 g的剂量，需服用3瓶盖，有些病人不易接受，本实验试图进行改进剂型的摸索以期找到合适的浓缩剂型。1材料1.1实验细胞株人肺腺癌A549细胞株由本实验室常规培养，生长于含10%小牛血清的RPMI1640完全培养液中，37恒温，5%CO2，饱和湿度培养箱中生长。取对数生长期细胞用于实验。1.2试剂RPMI1640培养液(GIBCO公司产品)；MTT(sigma公司产品，以生理盐水配制成5 mg/ml浓度)；二甲基亚砜（DMSO，上海凌峰公司产品，分析纯）。1.3克瘤丸购自江苏省中医院药房，批号20041201。2方法2.1克瘤丸不同提取物的制
7、备2.1.1样品组合提取法，取200 g粗粉CO2超临界萃取后，药渣醇提（70乙醇）后合并提取液，微波真空干燥，即为样品I的浸膏（4.39 g粗粉/g）。2.1.2样品半仿生提取法，取200 g粗粉加pH为1酸水提取再加pH为8碱水提取，合并提取液，浓缩成稠膏后微波真空干燥(5.13 g粗粉/g)。2.1.3样品水提法，取200 g粗粉加水提取滤过，浓缩成浸膏，再微波真空干燥（3.9 g粗粉/g）。称取适量各样品，蒸馏水配置至1 g/ml（相当于生药）。灭菌备用。配药：将上药用完全培养液于实验前稀释后得5种终浓度： 20，10，5，2.5，1.25 mg/ml供实验用。以上药物均实验前新鲜配用。
