真菌的形态学检查-直接镜检与细菌相比,真菌在致病性、传染性、传播途径及环境污染等方面有所不同， 因此在做真菌学实验时要特别注意以下事项：1．因为孢子具有空气散播等特性，所以真菌的检验操作应在生物安全柜中 进行特别是粗球孢子菌、组织胞浆菌、皮炎芽生菌、新生隐球菌等的分离培养 和鉴定操作必须在生物安全柜中进行2．每天工作前后应对工作区域进行消毒3．不可直接嗅闻培养基上培养物产生的气味以免造成孢子散播感染4.不可对组织胞浆菌、球孢子菌进行玻片培养，因为其抱子可在空气中散 播真菌的检验方法包括标本直接镜检、染色镜检、分离培养、生化反应及免疫 学试验等其中以标本直接镜检和分离培养最为重要，其形态学检查主要是直接 镜检和染色镜检一、直接镜检直接镜检就是从人(或动物)体内采取标本，制片，不需染色处理，置于显微 镜下直接观察直接镜检对真菌病的诊断较细菌更为重要镜检若发现有真菌菌 丝或抱子存在时可初步判定为真菌感染但此方法大多不能确定真菌种类如直 接镜检阴性，也不可轻易否定真菌感染的可能性，有时需反复检查或做其他方法 检查才可确诊具体操作如下：1．标本制备将少量标本置于载玻片上，加一滴标本处理液，覆盖盖玻片， 如为毛发或皮屑等标本，可稍加温，但勿煮沸，压紧盖玻片，驱除气泡并吸去周 围溢液后镜检。
也可以用透明胶带直接贴于取材部位，数分钟后揭下，充分展平 后直接贴置于加有标本处理液的载玻片上在制片时根据不同的标本，滴加不同 的标本处理液，以便使真菌菌丝和抱子结构更加清晰地显示出来常用的标本处 理液有：(1) KOH溶液：由于KOH溶液可促进角质蛋白的溶解，所以本液适于致密、 不透明标本的检查，如毛发、指甲及鳞屑等根据标本的质地不同，可选用不同 的浓度，如皮屑可用10%，毛发可用20%，必要时可在10%的KOH溶液中加入 终浓度为 40％的二甲基亚砜，以进一步促进角质的溶解若标本需较长时间保 存，可在10％的 KOH 溶液中加入10％甘油，使一般标本保存数周至数月2) 生理盐水：若观察真菌的出芽现象，可用生理盐水代替KOH溶液将标 本置于载玻片上，加生理盐水和盖玻片，在盖玻片四周用凡士林封固，防止水分 蒸发，35°C培养3〜4小时后观察出芽现象此外，脓汁、尿及粪便等标本，可 滴加少量生理盐水后直接镜检3) 水合氯醛-苯酚-乳酸封固液：将水合氯醛20g，纯苯酚10g,纯乳酸10ml, 混合后加温溶解即可此液消化力较强，只限于不透明标本的检查2.显微镜检查先用低倍镜(在弱光下)观察有无菌丝或抱子，再用高倍镜检 查其特征。
显微镜下可观察到真菌的菌 丝和抱子(图2. 1)由于真菌的折光性比细菌强，故在较暗的光线下能加以区别因此观察时注 意收缩光圈，降低光线亮度，保持在暗视野下进行。