动物学专业毕业论文 [精品论文] 重组杆状病毒介导的人组织激肽释放酶在昆虫细胞中的表达关键词：杆状病毒 昆虫细胞 重组蛋白 人组织激肽释放酶 生物活性 检测试剂摘要：昆虫杆状病毒表达系统是应用广泛的外源蛋白表达系统该系统利用杆状病毒多角体蛋白基因的强启动子，不仅重组蛋白的产量高，而且具有真核细胞的蛋白质翻译后修饰加工机制，重组蛋白的生物活性较强 本研究用高保真PCR，从已被证明能在真核细胞中正确表达的重组载体中扩增人组织激肽释放酶cDNA，引入适当的酶切位点和组氨酸纯化标签后，与杆状病毒转移载体pFastBacl连接，用获得的重组载体pFastBac-KLK1转化含穿梭载体Bacmid的DH10Bac大肠杆菌，筛选获得了重组质粒Bacmid-KIK1；再将Bacmid-KLK1转染Sf9昆虫细胞，获得了重组杆状病毒；经3次传代后经间接免疫荧光检测证明，重组病毒感染的昆虫细胞中为重组人组织激肽释放酶表达阳性，经western blot检测证明表达产物的分子量为预期的35kDa，大部分存在于胞浆内这些研究结果为人组织激肽释放酶检测试剂的研制和开发利用奠定了基础正文内容 昆虫杆状病毒表达系统是应用广泛的外源蛋白表达系统。
该系统利用杆状病毒多角体蛋白基因的强启动子，不仅重组蛋白的产量高，而且具有真核细胞的蛋白质翻译后修饰加工机制，重组蛋白的生物活性较强 本研究用高保真PCR，从已被证明能在真核细胞中正确表达的重组载体中扩增人组织激肽释放酶cDNA，引入适当的酶切位点和组氨酸纯化标签后，与杆状病毒转移载体pFastBacl连接，用获得的重组载体pFastBac-KLK1转化含穿梭载体Bacmid的DH10Bac大肠杆菌，筛选获得了重组质粒Bacmid-KIK1；再将Bacmid-KLK1转染Sf9昆虫细胞，获得了重组杆状病毒；经3次传代后经间接免疫荧光检测证明，重组病毒感染的昆虫细胞中为重组人组织激肽释放酶表达阳性，经western blot检测证明表达产物的分子量为预期的35kDa，大部分存在于胞浆内这些研究结果为人组织激肽释放酶检测试剂的研制和开发利用奠定了基础昆虫杆状病毒表达系统是应用广泛的外源蛋白表达系统该系统利用杆状病毒多角体蛋白基因的强启动子，不仅重组蛋白的产量高，而且具有真核细胞的蛋白质翻译后修饰加工机制，重组蛋白的生物活性较强 本研究用高保真PCR，从已被证明能在真核细胞中正确表达的重组载体中扩增人组织激肽释放酶cDNA，引入适当的酶切位点和组氨酸纯化标签后，与杆状病毒转移载体pFastBacl连接，用获得的重组载体pFastBac-KLK1转化含穿梭载体Bacmid的DH10Bac大肠杆菌，筛选获得了重组质粒Bacmid-KIK1；再将Bacmid-KLK1转染Sf9昆虫细胞，获得了重组杆状病毒；经3次传代后经间接免疫荧光检测证明，重组病毒感染的昆虫细胞中为重组人组织激肽释放酶表达阳性，经western blot检测证明表达产物的分子量为预期的35kDa，大部分存在于胞浆内。
这些研究结果为人组织激肽释放酶检测试剂的研制和开发利用奠定了基础昆虫杆状病毒表达系统是应用广泛的外源蛋白表达系统该系统利用杆状病毒多角体蛋白基因的强启动子，不仅重组蛋白的产量高，而且具有真核细胞的蛋白质翻译后修饰加工机制，重组蛋白的生物活性较强 本研究用高保真PCR，从已被证明能在真核细胞中正确表达的重组载体中扩增人组织激肽释放酶cDNA，引入适当的酶切位点和组氨酸纯化标签后，与杆状病毒转移载体pFastBacl连接，用获得的重组载体pFastBac-KLK1转化含穿梭载体Bacmid的DH10Bac大肠杆菌，筛选获得了重组质粒Bacmid-KIK1；再将Bacmid-KLK1转染Sf9昆虫细胞，获得了重组杆状病毒；经3次传代后经间接免疫荧光检测证明，重组病毒感染的昆虫细胞中为重组人组织激肽释放酶表达阳性，经western blot检测证明表达产物的分子量为预期的35kDa，大部分存在于胞浆内这些研究结果为人组织激肽释放酶检测试剂的研制和开发利用奠定了基础昆虫杆状病毒表达系统是应用广泛的外源蛋白表达系统该系统利用杆状病毒多角体蛋白基因的强启动子，不仅重组蛋白的产量高，而且具有真核细胞的蛋白质翻译后修饰加工机制，重组蛋白的生物活性较强。
本研究用高保真PCR，从已被证明能在真核细胞中正确表达的重组载体中扩增人组织激肽释放酶cDNA，引入适当的酶切位点和组氨酸纯化标签后，与杆状病毒转移载体pFastBacl连接，用获得的重组载体pFastBac-KLK1转化含穿梭载体Bacmid的DH10Bac大肠杆菌，筛选获得了重组质粒Bacmid-KIK1；再将Bacmid-KLK1转染Sf9昆虫细胞，获得了重组杆状病毒；经3次传代后经间接免疫荧光检测证明，重组病毒感染的昆虫细胞中为重组人组织激肽释放酶表达阳性，经western blot检测证明表达产物的分子量为预期的35kDa，大部分存在于胞浆内这些研究结果为人组织激肽释放酶检测试剂的研制和开发利用奠定了基础昆虫杆状病毒表达系统是应用广泛的外源蛋白表达系统该系统利用杆状病毒多角体蛋白基因的强启动子，不仅重组蛋白的产量高，而且具有真核细胞的蛋白质翻译后修饰加工机制，重组蛋白的生物活性较强 本研究用高保真PCR，从已被证明能在真核细胞中正确表达的重组载体中扩增人组织激肽释放酶cDNA，引入适当的酶切位点和组氨酸纯化标签后，与杆状病毒转移载体pFastBacl连接，用获得的重组载体pFastBac-KLK1转化含穿梭载体Bacmid的DH10Bac大肠杆菌，筛选获得了重组质粒Bacmid-KIK1；再将Bacmid-KLK1转染Sf9昆虫细胞，获得了重组杆状病毒；经3次传代后经间接免疫荧光检测证明，重组病毒感染的昆虫细胞中为重组人组织激肽释放酶表达阳性，经western blot检测证明表达产物的分子量为预期的35kDa，大部分存在于胞浆内。
这些研究结果为人组织激肽释放酶检测试剂的研制和开发利用奠定了基础昆虫杆状病毒表达系统是应用广泛的外源蛋白表达系统该系统利用杆状病毒多角体蛋白基因的强启动子，不仅重组蛋白的产量高，而且具有真核细胞的蛋白质翻译后修饰加工机制，重组蛋白的生物活性较强 本研究用高保真PCR，从已被证明能在真核细胞中正确表达的重组载体中扩增人组织激肽释放酶cDNA，引入适当的酶切位点和组氨酸纯化标签后，与杆状病毒转移载体pFastBacl连接，用获得的重组载体pFastBac-KLK1转化含穿梭载体Bacmid的DH10Bac大肠杆菌，筛选获得了重组质粒Bacmid-KIK1；再将Bacmid-KLK1转染Sf9昆虫细胞，获得了重组杆状病毒；经3次传代后经间接免疫荧光检测证明，重组病毒感染的昆虫细胞中为重组人组织激肽释放酶表达阳性，经western blot检测证明表达产物的分子量为预期的35kDa，大部分存在于胞浆内这些研究结果为人组织激肽释放酶检测试剂的研制和开发利用奠定了基础昆虫杆状病毒表达系统是应用广泛的外源蛋白表达系统该系统利用杆状病毒多角体蛋白基因的强启动子，不仅重组蛋白的产量高，而且具有真核细胞的蛋白质翻译后修饰加工机制，重组蛋白的生物活性较强。
本研究用高保真PCR，从已被证明能在真核细胞中正确表达的重组载体中扩增人组织激肽释放酶cDNA，引入适当的酶切位点和组氨酸纯化标签后，与杆状病毒转移载体pFastBacl连接，用获得的重组载体pFastBac-KLK1转化含穿梭载体Bacmid的DH10Bac大肠杆菌，筛选获得了重组质粒Bacmid-KIK1；再将Bacmid-KLK1转染Sf9昆虫细胞，获得了重组杆状病毒；经3次传代后经间接免疫荧光检测证明，重组病毒感染的昆虫细胞中为重组人组织激肽释放酶表达阳性，经western blot检测证明表达产物的分子量为预期的35kDa，大部分存在于胞浆内这些研究结果为人组织激肽释放酶检测试剂的研制和开发利用奠定了基础昆虫杆状病毒表达系统是应用广泛的外源蛋白表达系统该系统利用杆状病毒多角体蛋白基因的强启动子，不仅重组蛋白的产量高，而且具有真核细胞的蛋白质翻译后修饰加工机制，重组蛋白的生物活性较强 本研究用高保真PCR，从已被证明能在真核细胞中正确表达的重组载体中扩增人组织激肽释放酶cDNA，引入适当的酶切位点和组氨酸纯化标签后，与杆状病毒转移载体pFastBacl连接，用获得的重组载体pFastBac-KLK1转化含穿梭载体Bacmid的DH10Bac大肠杆菌，筛选获得了重组质粒Bacmid-KIK1；再将Bacmid-KLK1转染Sf9昆虫细胞，获得了重组杆状病毒；经3次传代后经间接免疫荧光检测证明，重组病毒感染的昆虫细胞中为重组人组织激肽释放酶表达阳性，经western blot检测证明表达产物的分子量为预期的35kDa，大部分存在于胞浆内。
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本研究用高保真PCR，从已被证明能在真核细胞中正确表达的重组载体中扩增人组织激肽释放酶cDNA，引入适当的酶切位点和组氨酸纯化标签后，与杆状病毒转移载体pFastBacl连接，用获得的重组载体pFastBac-KLK1转化含穿梭载体Bacmid的DH10Bac大肠杆菌，筛选获得了重组质粒Bacmid-KIK1；再将Bacmid-KLK1转染Sf9昆虫细胞，获得了重组杆状病毒；经3次传代后经间接免疫荧光检测证明，重组病毒感染的昆虫细胞中为重组人组织激肽释放酶表达阳性，经western blot检测证明表达产物的分子量为预期的35kDa，大部分存在于胞浆内这些研究结果为人组织激肽释放酶检测试剂的研制和开发利用奠定了基础《《《特别提醒》》》：正文内容由PDF文件转码生成，如您电脑未有相应转换码，则无法显示正文内容，请您下载相应软件，下载地址为 如还不能显示，可以联系我q q 1627550258 ，提供原格式文档 " 垐垯櫃换烫梯葺铑?endstreamendobj2x滌?`U'閩AZ箾FTP鈦X飼?狛]P?燚\?琯嫼b?袍*﹁甒?]颙嫯'??4)=r宵?i?]j彺帖B3锝檡骹>笪yLrQ#?0鯖l壛枒l壛枒l壛枒l壛枒l壛枒l壛枒l壛枒l壛枒l壛枒l壛枒l壛枒l壛>渓?@擗#?"?#€綫G刿#K芿${`?⒊7.耟?~??Wa癳$[Fb癳$[Fb。