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1、2BV是2倍柱体积的意思硅胶：硅胶层析法的分离原理是根据物质在硅胶上的吸附力不同而得到分离，其中有微孔，对不同化合物的吸附能力不同，然后选用适当的洗脱剂进行洗脱从而达到分离。大孔吸附树脂：是近代发展起来的一类有机高聚物吸附剂，不同类型大孔吸附树脂均能从极稀水溶液中富集微量亲水性酚类衍生物，且易洗脱，吸附作用随吸附物质的结构不同而有所不同。反相硅胶柱层析：其本质就是将硅胶装进色柱子里，然后进样品溶液，然后再进洗脱剂，从而达到分离。所谓反相是指用非极性固定相和极性流动相组成的色谱体系。聚酰胺：是一类纤维树脂，分子链上的重复结构单元是酰胺基的聚合物。其原理是根据“氢键吸附”，即当所分离化合物的结构与
2、聚酰胺形成氢键的能力越强时，其吸附也就越强，也就越难洗脱。其用途比较广，基本上各种类型化合物都能使用。SephadexLH-20:葡聚糖凝胶柱层析，其主要用于分离黄酮类化合物。在分离有利黄酮时，其分离方式为吸附分离；在分离大分子干类化合物时，其分离机理为尺寸排阻法分离又叫分子筛，也就是说分子量越大的被洗脱得越快，越先流出。硅胶是极性的对酸碱稳定。大孔吸附树脂是吸附性和分子筛性原理相结合的分子材料吸附性是由于范德华引力或产生氢键的结果，分子筛性是由于其本身多孔性结构所决定的。大孔树脂是一类不含交换基团且有大孔结构的高分子吸附树脂，具有良好的大孔网状结构和较大的比表面积，可以通过物理吸附从水溶液中
3、有选择地吸附有机物即非极性或极性较弱的物质，具有物理化学稳定性高、比表面积大、吸附容量大、选择性好、吸附速度快、解吸条件温和、再生处理方便、使用周期长、宜于构成闭路循环、节省费用等诸多优点。树脂吸附作用是依靠它和被吸附的分子（吸附质）之间的范德华引力，通过它巨大的比表面进行物理吸附而工作，使有机化合物根据有吸附力及其分子量大小可以经一定溶剂洗脱分开而达到分离、纯化、除杂、浓缩等不同目的。硅胶柱的分离原理是根据物质在硅胶上的吸附力不同而得到分离，一般情况下极性较大的物质易被硅胶吸附，极性较弱的物质不易被硅胶吸附，整个层析过程即是吸附、解吸、再吸附、再解吸过程。其中有微孔，对不同化合物的吸附能力不
4、同，然后选用适当的洗脱剂进行洗脱从而达到分离。1两种填料的吸附解吸附的方式不一样，分离原理不一样。一般来说，硅胶指的是正相硅胶，采用的流动相一般是从小极性梯度洗脱到大极性进行分离分段纯化；而树脂是反相的，一般采用醇水洗脱，从大极性的水梯度洗脱到醇进行分离分段。2. 当拿到一个药材的提取物的时候，一般是用溶剂萃取法或者大孔树脂来分段处理的，分段以后再利用硅胶柱层析进行分离纯化。所以一般来说树脂是用来分段的，硅胶是进一步分离纯化用的。3. 对于柱子的选择，这个要根据实际操作情况，一般情况树脂柱是敞口的，硅胶柱是小口的，可以接储液瓶。剂萃取一般顺序是从小极性溶剂萃取到大极性，例如：石油醚T乙酸乙酯T
5、正丁醇这样的萃取路线，在接下来硅胶分离的时候，石油醚段应该就用小于等于石油醚极性的溶剂开始洗脱梯度变化至较大极性的溶剂如乙酸乙酯，常用的系统有石油醚-乙酸乙酯，正己烷-乙酸乙酯，石油醚-丙酮等，具体情况可以先点板做个预实验；另外乙酸乙酯段和石油醚差不多但是需要洗脱到更大极性至甲醇，正丁醇段的物质极性较大，基本上都含糖和蛋白等，所以可以先用树脂柱水洗脱脱去糖等大极性物质，在用反相硅胶等填料分离纯化。在最开始的时候用大孔树脂目的是除去样品中的杂质，这也是过柱子前的预处理过程。因为硅胶柱比较容易堵塞。如果样品想继续往下分那么需要过柱子了（也就是想得到纯品）。至于优缺点很明显啊前者用时比较短，而且价格
6、很便宜，操作容易些。后者正好相反。而且操作的要求更精细更精确。粗分用硅胶是常规方法，用大孔的话主要就是出去大量的多糖等大极性的东西吧，优点就是不会怎么吸附。用时的话个人觉得硅胶柱现在也很快的，我们的大柱一般5天内就冲完了，大孔的话是乙醇水系统，旋蒸的时候比较费力极性小用大孔易形成死吸附，极性大时采用大孔，但浓缩是不如硅胶柱的氯仿甲醇来的快一般是先用大孔的，可以减少硅胶柱的上样量要依据分离的物质成分而定，有时大孔好，有时硅胶好看你分的成分而定，如果是极性大且需要除糖的可用大孔，如果极性小，就用硅胶硅胶对大极性样品的吸附比较严重，用打孔树脂多一些一般情况下如果你的组分极性不是很大的话选择硅胶，如果
7、极性大就选择大孔树脂，因为比较便宜，但是如果你的组分根据薄层检测聚酰胺的分离效果明显好的话，就用聚酰胺你说的未知组分，难道不能做一下成分预试验吗？如果预测的成分是生物碱类，那么选用中性或碱性氧化铝比较好；如果是皂苷类或中小极性成分，硅胶或大孔树脂均可；如果是含酚羟基或者说是黄铜类成分，用聚酰胺即可。但是如果是鞣质类成分，绝对不能用聚酰胺，因为会形成不可逆吸附。硅胶柱应用较为广泛,可以用于大多中药成分的分离;聚酰胺柱是以氢键作用为主,主要用于酚类、醌类如黄酮类、蒽醌类及鞣质类等成分的分离;大孔树脂是通过物理吸附有选择性地吸附有机物质而达到分离目的的,适用于分离水溶性的物质硅胶柱的分离可以调控的因素很多可以用比例不同的极性溶剂进行洗脱；用大孔树脂我没有尝试过总觉得可能对分离中草药的复杂成份会好一些，对一些很简单的有机小分子没有必要用大孔树脂聚酰胺与硅胶对极性大的有机物吸附强大孔树脂主要用于水溶性成分的分离纯化，尤其是大分子的亲水性成分如多糖、皂苷、黄酮、生物碱、三萜类化合物
