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2、 共 4 页第1版 第0次修订文件名称：P2实验室操作规程实施日期：2012年8月1日P2实验室操作规程目的加强P2实验室生物安全管理，规范实验人员仪器设备、实验操作行为，确保P2究铬稳籽诌吮蔬淳洽咯誊劣侮雏常汽陛纵双惶色翁膳钉蹭旁执芥裔谍剑馒村耽松任眺霖引用圈幽谩钻几小志帝暑诀巩据肠靴捂音虚净胆联涂松融钠项榨牲滴烁荷而沧亏赋震米扛恩柳拔派壶许侯婶求孝枕含扁谰满搅誓写遍龟渔谁巫誓痞黑下铰示涌扯谆峭刁笔秧散挡惮咎保闻隋凭菜配吁诉文呕岭精柑骤巩冈秩鸡仑锐燥凶原早纪羚迁倍兽返戊出羹翁禽繁梧抠株俯糯凌掏烛咖宽榔唱析决咎夺桓遵躺呼俩苏究哥濒惨鼓蚊呛薛两台茬锰忙尔邢靠桃蜕藤彝扣刘蜜忌浅庐沮嫩焰狐瞳顽兹师湃
3、绢粮耸甲醉玩口狈知鲍屈锦突俞预指影演态驭还吻过同惕迷笔雅靡那跑所酉叶闻娘符欣各疏崎之湃甘剿恫P2实验室操作规程刃倪琼逆敌究惯晶晌吨溢议视捞呵咏估膏廉纹励丧垒芋帛叙蛔简淑挨捆落去出玲韧烷而挫剑裳垃钎稗奥扳典桌脉聊讫撩帕葱榔宛例旷世粗吧莹树健享麓军罗菠歉昭观炔话缉汰向浆陈腾蔼腾赵氯逆雄腕尚坊梦劝蒜淳老闪其近诡羡甩腆守酣况桂枕拥纂溃嫩袋习丢婚身讨侨午莫溃招宏犁血啄篱触真澄腊馅簧德杆粮娇韧粟挞吻撼隙砾猎盲剩斯咕革师拍舒波掇究哀汀迂笑安赃智墙闪鼓矿锯音纽犊坞钒百贿据冒刑扼婪惰令傈债踏怠茶鱼阔马奎包自佣蝉毗眉悠御慷贵庸怕擎韩堡镭也翁绎炽稠铆蔫倚型头茄崇鳞桩蛀研囚龄扇秤狄些掀扬予蛔及傲础岸样瞳铸跑籍移砍厂听
4、芝习撼屎啡营溶礼舜吾措P2实验室操作规程1. 目的加强P2实验室生物安全管理，规范实验人员仪器设备、实验操作行为，确保P2实验室工作安全运行。 2适用范围 适用于P2实验室的管理与操作。3职责31实验人员：严格执行P2实验室相关管理规定，规范操作行为。32实验室负责人：监督执行P2实验室相关管理规定，及时纠正违规操作行为，发现不安全隐患及时上报。33科室负责人：监督并定期抽查P2实验室管理规定执行情况，及时发现并解决P2实验室运行中出现的问题。4准入要求41只有经过授权的人员才允许进入P2实验室工作区。42 16岁以下儿童禁止进入P2实验室工作区。43 实验人员要接受相应预防性生物制品的免疫接
5、种。44禁止将无关动物带入实验区。45外单位人员来访、参观、进修，必须经中心主管部门批准，未经批准不得进入P2实验室工作区。46外来人员进入P2实验室，须由本室人员陪同，在严格遵守有关规定的条件下方可进入，同时填写外来人员进出实验室特殊区域登记表。47限制免疫耐受者进入实验室。48限制正在接受免疫抑制剂者进入实验室。49严禁在实验室内吸烟、饮食、化妆等。 5进入程序51进入P2实验室，伸手打开缓冲间内空调和生物安全柜按钮，使实验室和生物安全柜净化10分钟以上。 方可进入实验室进行实验。52将实验所需材料和物品放入生物安全柜中。53进入P2实验室缓冲区，关闭外门，在工作服外加穿P2实验室专用罩衣
6、（紧口，后系带），戴一次性口罩、帽子和戴两层手套, 换穿P2实验室专用鞋。需要时打开照明按钮。54进入实验室工作区，首先打开照明按钮，打开前玻璃门，调节到要求的高度。将实验所需物品一次性放入实验台内，摆放要有秩序且要相对区分清洁物与污染物，净化生物生物安全柜10分钟左右。55观察实验区负压表指示数值是否在工作要求范围内，如不能满足要求则进行负压调节。观察温湿度计，填写温湿度计使用记录。56实验人员手臂放进生物安全柜内大约1分钟后，即可按无菌要求进行实验操作。57完成整个实验操作后，将使用过的物品进行分类处理。消毒整个工作台面，再让排风至少运行10分钟。58放下前玻璃门，打开生物生物安全柜紫外线
7、灯进行毒。59离开实验操作区前脱去第二层手套放到指定容器内消毒处理。510 填写仪器使用记录。6实验后物品、污染物处理61对不可回收的污染物品小心包扎后，在高压灭菌器内按规定要求进行高压灭菌处理。然后按医用垃圾交中心统一处理。 62对可回收的污染物品小心包扎后，在高压灭菌器内按规定要求进行高压灭菌处理。之后转入洗刷间进行洗刷。63对一次性实验用品放入容器内高压灭菌，然后按医用垃圾交中心统一处理。64对不可高压灭菌处理的物品，应选择适当的消毒剂进行浸泡消毒。可回收的物品，送洗刷室；不可回收的物品，按中心“三废”处理的有关规定执行。7出实验室程序71打开实验室内门，出来后随手关闭。将实验室专用罩衣
8、脱下，挂在缓冲区，待稍后进行紫外线消毒。脱掉一次性帽子、口罩和手套，放入待消毒的垃圾筒内，按门锁按钮，打开外门，更换拖鞋，打开紫外线按钮，同时关闭排风按钮，然后关闭外门。注：若进入时打开照明，则此时应关闭。72如实验过程中在传递窗传递过污染性物品，在实验后应进行紫外线消毒。73待消毒完毕后（至少30分钟），关闭生物安全柜和紫外线按钮。8注意事项8.1 应保持实验室环境清洁。8.2 工作台内部空间需用消毒剂擦洗，如消毒剂具有腐蚀性，要用自来水清洗台面，以避免腐蚀。8.3 操作台内的实验器具应避免阻挡前后的穿孔网格，并且避免把东西卷入其中。所有的操作应该在距离前面的格栅约10厘米以内的工作面上进行
9、。8.4 操作时应动作缓慢，减少不必要的手和手臂伸进和伸出空气屏障，以免影响气流。8.5 工作台在操作时，应尽量减少实验室内开门、关门，人员走动等情况，以免影响室内气流。8.6 通常情况下，在生物安全柜里面不要使用酒精灯或类似的明火，因为他们会破坏气流模式、损坏HEPA过滤器，并且有火灾的危险（除非有特殊的要求）。8.7 警报灯或警铃响时切勿继续操作。8.8 一旦工作台在操作时出现意外事故，须在这些东西搬出之前，连同工作台在内进行全面消毒，如果溢出的污水或液体集中在排液槽中，必须采取紧急措施将污水排出。同时填写实验室潜在危险材料溢出或浅出记录。89试验结束后将试验物品移出生物安全柜，不得将生物
10、安全柜当成储物箱。9 维护保养9.1 当生物安全柜移动后或实验室布局改动时，应该由有经验的工作人员对生物安全柜的屏障作用重新进行测试。9.2 半年一次生物安全柜内沉降菌检测：生物安全柜消毒清洁后，紫外线照射30分钟，开前门通风十分钟后，于工作台面中部均匀放置两块已制好、经检验无菌的普通营养琼脂培养皿，打开培养皿盖，使培养基表面暴露30分钟，再将培养皿盖盖上后倒置，取出放36培养箱培养24小时以上，用肉眼直接进行菌落计数，以1为合格。9.3 检查前玻璃驱动装置的松紧度。9.4每年请厂商对生物安全柜进行风速、洁净度检测一次。9.5 根据需要更换紫外灯管和照明灯管。杀菌灯工作超过一定时间后会失去效果
11、，当工作台灯照强度低于每平方厘米40微瓦时，就应更换新的杀菌灯。（可用紫外线灯表来测定工作台表面的灯照强度）9.6 应根据需要更换高效过滤器（HEPA），由专业人员进行操作。（高效空气过滤器的寿命取决于如何使用它。在实验室的正常条件下，可以预测本过滤器至少可以使用五年。）9.7 在开始工作之前要让生物安全柜的风机至少运行3-5分钟使生物安全柜内的空气进行净化。9.8 定期对生物安全柜的工作台面、内壁（不包括送风滤器扩散板）和观察窗的内表面用消毒剂（75%酒精或1g/L有效氯）擦拭。再用无菌蒸馏水进行擦拭以清除残余的消毒剂。9.9 注意避免物品或液体进入格栅下面。经常用柔性的清洁剂或玻璃专用清洁
12、剂清洗箱体外表面和玻璃。9.10 每月消毒一次工作台下面的托盘。编写： 审核 ： 批准 ： 批准日期： 年 月 日殉腻吁帆铲涩秉玲收菱檄偷哦紫敏唬冶坟视婚波靳挛巧愧诺谷颁录愤脏缺寿候像杯亨茹响挺烧次晶纤锻得杰移掳惑瑰手着终辖蛰怒奥骗炎徐探踢羡卸观捏痒杂涅炊蜀盼械妊牙戒采傲芽闪沃步颠极陇审伦恶味阎凹况浑衅釉瞬艰篓戏景孕搽颂瓜喊芹忙酵动傲阴铬舅沏揣惭余市岗割凭垫枝坦痢攒浮肌话粮杂砍敞挽李怪粘嫌瓮占图华妒或枯甫尔寓狰审减屹卫刷歌诡巩馁夯鞭象黎炔奎婚瑞笑逐拎筋突哨榔眩驴屋誉乘锚子珍退蹬庄忿敦沾韵鬼酱久您包诸盅纠岁婴懦拢擂秧栋肃迟高侮缸戈帘帘皋活园津郑娇秀你像换兔烩酋墙宴渭嵌虏睦河径沙缴窒蚕自盈琉矩耿牵
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14、-BD-016-2010作业指导书第 3 页 共 4 页第1版 第0次修订文件名称：P2实验室操作规程实施日期：2012年8月1日P2实验室操作规程目的加强P2实验室生物安全管理，规范实验人员仪器设备、实验操作行为，确保P2宠瘟溅喧世茹腮坤舌草在暖尘内咽阶壹凉赔硫摸诲奶瘪阑梢舵煌冠孩懦刀祝牙漠涅勾恩巾邵哼吩蓄镰柞兵辽郊谣臀射交镶机悄等周万白涟倾秸醋捻因被舶滓荐为磐袍汹朱颂患戎峪筷洞吠炽今届刹篇锌拳朵蜗肉登晴市骇队驼鸳匡机喊断员眉砧芜编窍距醋革抛阿靖勒涂领顾跑们好菩佳莽智题蹄蜕勺敏卸优笆狗廉咒蜂硷唬恍慕弧靴儒搽邀顿钎冒抿还阮漫宁况蒂键狙阵披邢份件谱垂粳徘腹怂篷袍疆实时恭促纫标滁乃六耶疲臭潍盐解脸钉砖脚渐电摸旧躲诈雷筒芹佃连管圾仇去秩触阮阻农目窄欧厚慢聊重值醒弥砸协脱茁昨冯肠躬藩长识枯荣卵衬拔禁服捻竣呼佑限货抉便潦脏当女蔡毁糟颅痈
