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1、AMSudl晋x样本测试前稀释倍数空白管吸光度-测定管吸光度空白管吸光度x 80 x样本测试前稀释倍数淀粉酶（AMS）测定试剂盒说明书（碘-淀粉比色法）一、原理：淀粉酶能水解淀粉生成葡萄糖、麦芽糖及糊精，在底物浓度已知并且过量的情况 下，家人碘液与未水解的淀粉结合生成蓝色复合物，根据蓝色的深浅可推算出水解 的淀粉量，从而计算出AMS的活力。二、试剂组成与配制：（100T）1、0.4mg/ml底物缓冲液：60ml X1瓶，4C冰箱保存6个月。2、0.1mol/L碘贮备液：7mlX1瓶，4C避光保存6个月。0.01mol/L碘应用液的配制：将碘贮备液：蒸馏水=1:9稀释，现用现配4C避光 保存。三
2、、操作表：测定管（u管）空白管（0管）底物缓冲液（ml） 37C预温5分钟0.50.5待测样本（ml）0.1混匀，37C水浴，准确反应7.5分钟碘应用液（ml）0.50.5蒸馏水（ml）3.03.1混匀，660nm波长，1cm光径，蒸馏水调零，测各管吸光度。*注：不同样本批量测试前需要做预实验，确定最佳取样浓度，将 （空白OD-测定OD控制在0050150之间）四、计算：1、单位定义：100ml血清（浆）中的AMS,在37C与底物作用30分钟，水解10mg 淀粉为1个单位。2、公式：空白管吸光度-测定管吸光度0.4 x 0.530分钟xxx空白管吸光度107.5分钟（此公式适用于测定血清中淀粉
3、酶）血清淀粉酶的含量测定一、实验准备：1、实验器材：移液枪 CLOOTOOOul、10100ul、10005000ul、220ul）、5mlEP 管、0.5mlEP 管、比色皿、100ml烧杯、漩涡仪、水浴箱，分光光度计、计时器。2、实验药品：NaCl、蒸馏水、0.4mg/ml底物缓冲液、0.1mol/L碘贮备液。二、实验步骤：1、0.01mol/L碘应用液的配制：将碘贮备液：蒸馏水=1:9稀释，现用现配4C避光保存。2、生理盐水的配置：称取9gNaCl置100ml烧杯，加入100ml蒸馏水，溶解即得。3、样品最佳取样浓度摸索：取待测血清用生理盐水稀释成不同比例（2倍、4倍、8倍、16倍、32
4、倍、64倍、 128倍、256倍等倍数进行稀释），取0.1ml进行检测。取两个5mlEP管，标记为空白、血清所稀释的倍数，分别加入底物缓冲液0.5ml， 其中带有倍数的EP管加入相应的稀释好的血清0.1ml,于漩涡仪上混匀，同时放入37C 水浴箱反应7.5分钟，取出后各加入0.5ml 0.01mol/L碘应用液，空白管加入3.1ml蒸馏 水，带有倍数的EP管加入3.1ml蒸馏水，混匀，蒸馏水调零，迅速于660nm波长测定 吸光度，控制空白OD-测定OD在0.050.150之间。4、样品测定：将所需测定样品按摸索确定的倍数稀释，同法测定吸光度，记录数据。5、数据处理：按给定公式计算待测血清淀粉酶含量。注：加入碘应用液后不能长时间放置，否则碘见光分解后影响测定结果
