黄芪中总黄酮的含量测定方法

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1、Scutellariae班级 08级 2班专业药学姓名崔立靖同组人陆晓娅关雪李娟张栋材摘要目的:黄芩中总黄酮含量的测定。方法:采用紫外分光光度法测定黄芩中总黄酮的含量。结果:黄芩中总黄酮含量是 0.034mg/ml。Abstract Objective :To determine the content of total flavonoids in Radix Scutellariae.Methods :Ultraviolet spectrophotometry was used to To determine the content of total flavonoids content.R

2、esuIts :Total flavonoids content of Radix Scutellariae reached 0.034mg/ml关键词黄芩;总黄酮;紫外分光光度法Key WorldRadix Scutellariae; Total flavonoids ; uv-spectrophotometry目录摘要 1Abstract 关.键. 1词 1 KeyWorld 目1录 21绪论 . . 32黄芩中总黄酮含量测 . 仪.器.与试剂 . 实验仪器 . 实验药品 . 试验方法 . 6 2.2.总1黄酮成分提取 . 6 2.2.定2量实验总黄酮的含量测定 . 6 2.2.2.线1性

3、关系考察 . 2.2.2.提2取物含量的测定 . 方法学检验 . 7 2.3.精1密度实验 . 7 2.3.稳2定性考察 . 7 2.4黄芩根及粉末的显微图像 . 黄.芩.根.的.显.微.图像 . 2.4.2黄芩粉末的纤维图像 . 3参考文献 . 1绪论【英文名】 Radix Scutellariae【别名】山茶根、黄芩茶、土金茶根【来源】本品为唇形科植物黄苓Scutellaria baicalensis G干燥根。春、 秋二季采挖,除去须根及泥沙,晒后撞去粗皮,晒干。产于河北、辽宁、陕西、山东、 内蒙古、黑龙江等地。【植物特征】多年生草本,高 3070厘米。主根粗壮,略呈圆锥形,棕褐色。茎

4、四棱形,基部多分枝。单叶对生;具短柄;叶片披针形,全线。总状花序项生,花偏生于 花序一边;花唇形,蓝紫色。小坚果近球形,黑褐色,包围于宿萼中。花期 710月,果 期 810月。【制法】黄苓片除去杂质,置沸水中煮 10分钟,取出,闷透,切薄片,干燥;或蒸半小时,取出, 切薄片,干燥（注意避免曝晒。本品为类圆形或不规则形薄片,外表皮黄棕色至棕褐 色,切面黄棕色或黄绿色,具放射状纹理。酒黄苓取黄苓片,照酒炙法炒干。本品为类圆形或不规则形薄片,外表皮棕褐色, 切面黄棕色,呈放射状纹理,略带焦斑,中心部分有的呈棕色。【性状】本品呈圆锥形，扭曲，长8 25cm直径1 3cm。表面棕黄色或深黄色， 有稀疏的

5、疣状细根痕,上部较粗糙,有扭曲的纵皱或不规则的网纹,下部有顺纹和细 皱。质硬而脆，易折断，断面黄色，中间红棕色;老根中心枯朽状或中空，呈暗棕色或棕 黑色。气微，味苦。【显微特征】横切面木栓层为数层至 20余层扁平细胞组成,其中散在嗜细 胞。木栓组织外缘多破裂。皮层狭窄,散在纤维及石细胞。韧皮部较宽广,有多数纤 维与石细胞,石细胞多分布于外侧,纤维单个散在或数个成群,多分布于内侧;形成层 环状明显;木质部导管单个散在或数个成群,周围有木纤维束;木射线较宽。老根中 央有一至多个同心状的木栓组织环。薄壁细胞中还淀粉粒。【粉末特征】粉末深黄色。韧皮纤维微黄色，梭形，两端尖或斜尖，长 51200（271

6、 um,直径933um,壁木化，孔沟明显。石细胞淡黄色,类方形、类圆 形、椭圆形或纺锤形，直径2448um,长约85（160 um壁厚至24um。网纹及具 缘纹孔导管多见。木纤维细长,壁稍厚，具斜纹孔或具缘纹孔。另可见淀粉粒、木 栓细胞。黄芩根横切】拿甌部諜空则牠【化学成分】含多种黄酮类化合物，主要为黄苓甙（baicalir黄苓素（baicalein , 汉黄苓甙（wogonoside 汉黄苓素（wogonin , 甲氧基黄苓素，甲氧基去甲基汉黄苓 素，黄苓黄酮I,黄苓黄酮II。【鉴别】取粉末1g加甲醇20ml超声处理20分钟， 滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取黄苓

7、对照药材1g ,同法制成对照药材溶液。再取黄苓苷对照品，加甲醇制成每1ml含lmg的溶液，作 为对照品溶液。照薄层色谱法（附录VI B试验,吸取上述三种溶液各5“1分别点于 同一以含4%醋酸钠的羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以醋酸乙 酯 -丁酮 -甲酸 -水（5 :3: 1 :为1展开剂，预平衡 30分钟，展开，取出，晾干，喷以 1%三氯化 铁乙醇溶液。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点; 在与对照品色谱相应的位置上，显一相同的暗绿色斑点。【含量测定】照高效液相色谱法（附录V D测定。色谱条件与系统适用性试验用十八烷基 硅烷键合硅胶为填充剂;甲醇-水-磷

8、酸（47:53:。0 2为流动相;检测波长为 280nm 。 理论板数按黄苓苷峰计算应不低于 2500。对照品溶液的制备精密称取在603减压干燥4小时的黄苓苷对照品适量，加甲 醇制成每1ml含60“g的溶液,即得。供试品溶液的制备取本品中粉约0 3g同时另取本品粉末测定水分（附录IX H第一法精密称定，加70%乙醇40ml加热回流3小时，放冷，滤过，滤液置100ml量 瓶中，用少量 70%乙醇分次洗涤容器和残渣，洗液滤入同一量瓶中，加70%乙醇至刻度，摇匀。精密量取1ml,置10ml量 瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶 液各10”，l注入液相色谱仪，测定，

9、即得。本品按干燥品计算，含黄苓苷 （C21H18O11 ）不得少于9 0%。【理化鉴别】1取粉末1 g加乙醇10 ml温 浸15分钟，滤过，取滤液1 ml加醋酸铅试液厂3滴，生成桔黄色沉淀；另取滤液1 ml，加镁粉少量与盐酸 厂4滴，显红色.2.薄层层析样品液:取粉末1 g加乙醚 40 ml于索氏提取器中回流至无色，浓缩至2 5 ml,供试.对照品液:取黄苓素和汉 黄苓素配成溶液作为对照溶液.展开：0.5 N草酸硅胶G板（硅胶G+0.5 N草酸溶 液铺板），以氯仿甲醇（10： 1）展开17 cm显色于365 nm紫外灯下观察，供 试品在与标准品的相同位置有相同的暗灰棕色荧光斑点.成分分析研究进

10、展:略【药理作用】1抗菌、抗病毒、抗真菌:煎剂对多种球菌、杆菌、耐药的金黄色葡 萄球菌、流感病毒、皮肤真菌有抑制作用 2.解热:煎剂及黄芩甙对实验性发热的 家兔有解热作用 3.降压、利尿作用:黄芩甙给麻醉狗注射,有明显的降压和利尿 作用 4.抗炎、抗过敏:黄芩甙与黄芩素动物试验能抑制过敏性炎症渗出,降低毛 细血管通透性，有抗组织胺与抗乙酰胆碱作用。【类药比较】1）枯苓：子苓黄苓 分枯芩与子芩。枯芩为生长年久的宿根，中空而枯，体轻主浮，善清上焦肺火， 主治肺热咳嗽痰黄。子苓为生长年少的子根，体实而坚，质重主降，善泻大肠湿 热，主治湿热泻痢腹痛。 2）黄苓：续断黄苓与续断均有安胎之功，用治胎动不

11、安。 5黄苓药性寒凉，清热泻火，安胎，用治胎热所致的胎动不安。续断药性微 温，补肝肾，安胎，用治肝肾不足所致的胎动不安。 2 2.1仪器与试剂 2.1.1实验仪 器黄苓中总黄酮含量测超声波清洗器、紫外可见分光光度计、分析天平、 100ml 容量瓶、25ml容量瓶、5ml移液管、1ml移液管、6支试管、1个试管架、洗耳球 2.1.2实验药品 70%乙醇、5%亚硝酸钠、10%硝酸铝、4%氢氧化钠、芦丁标准品、 黄苓 2.2试验方法 2.2.1总黄酮成分提取取黄苓，粉碎。精密称取黄苓粉末约 1 ，g 放置100 ml容量瓶中，加90ml 70%乙醇，超声波提取约50min用70%乙醇稀释 至刻度，得

12、样品液。 2.2.2定量实验总黄酮的含量测定 2.2.2.线1性关系考察分别精 密吸取芦丁对照液（0.1 mg/m） 0.0（、1.0（、2.0（、3.0（、4.0（、5.00 m于试管 中，70%乙醇稀释至5ml,用再分别加入5%亚硝酸钠溶液0.3 ml摇匀，静置6 min;再加10%硝酸铝溶液0.3 ml摇匀，静置6 min再加4%氢氧化钠溶液4.00 ml,最后加70%乙醇0.4ml摇匀，静置12 min以试剂作空白，于510 nm处测 吸光度。以吸光度值A为纵坐标，芦丁浓度C （mg/ml ）为横坐标，进行线性回 归，得回归方程A=0.0832C+0.0004,r=0.9999标准曲线

13、见下图对照品标准曲线 0.06 C（mg/ml 0.04 0.02 0 0 0.2 0.4 0.6 y = 0.0832x + 0.0004 A 0.8 62.2.2 提取物含量的测定精密吸取样品液2.00 m于试管中，按标准曲线的制 备操作测定吸光度,根据回归方程计算样品中总黄酮的含量。 2.3方法学检验 2.3.1精密度实验取黄苓样品液,重复测定吸光度 6次,计算其相对标准偏差,结 果RSD为0.19%本实验精密度良好。2.3.稳定性考察精密吸取黄苓对照品溶 液，与 0 10, 20, 30, 40, 50, 60min 测定吸光度值，RSD 为 0.92%(n=6), 表明对照品溶液在60min内基本稳定。【2】2.4黄苓根及粉末的显微图像2.4.黄 芩根的显微图像 2.4.2黄芩粉末的纤维图像 7韧皮纤维石细胞导管木栓细胞淀粉粒木纤维 3 【1】参考文献国家药典委 员会，中华人民共和国药典2010版(第一部)S北京：化学工业出版社， 2005：211-212.【2】李云鹏,黄云,魏春娥.紫外分光光度法测定黄苓中总黄酮含 量J河北中医药学报，2007, 22 (1): 36-37收稿日期：2011-6-16 8