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1、中国协和医科大学 细胞生物学历年考博真题2002年协和医大细胞生物学博士试题1、细胞连接包括几种类型，及其各自的特点动物细胞的细胞连接按其功能分三大类：紧密连接、锚定连接和通讯连接。紧密连接的主要作用是封闭相邻细胞间的接缝，防止溶液中的分子沿细胞间隙渗入体内，从而保证了机体内环境的相对稳定；特点是通过跨膜蛋白相连。锚定连接通过细胞的骨架系统将细胞或细胞与基质相连成一个坚挺、有序的细胞群体，使细胞间、细胞与基质间具有抵抗机械张力的牢固粘合。参与锚定连接的骨架系统可分两种不同形式，与中间纤维相连的锚定连接主要包括桥粒和半桥粒；与肌动蛋白纤维相连的锚定连接主要包括粘合带与粘合斑。间隙连接是动物细胞间
2、最普遍的细胞连接，是在相互接触的细胞之间建立的有孔道的、由连接蛋白形成的亲水性跨膜通道，允许无机离子、第二信使及水溶性小分子量的代谢物质从中通过，从而沟通细胞达到代谢与功能的统一。2、核纤层的形态结构，及其同中间纤维的共同点 核纤层纤维的直径为10nm左右，纵横排列整齐，呈正交状编织成网络，分布于内层核膜与染色质之间。一般认为核纤层结构整体观呈一球状或笼状网络，切面观 呈片层结构。在分裂期细胞，核纤层解体，以单体形式存在于胞质中。核纤层是位于细胞核内层核膜下的纤维蛋白片层或纤维网络，核纤层由1至3种核纤层蛋白多肽组成。核纤层与中间纤维有许多共同点：(1)两者均形成10nm纤维；(2)两者均能抵
3、抗高盐和非离子去垢剂的抽提；(3)某些抗中间纤维蛋白的抗体能与核纤层发生交叉反应，说明中间纤维蛋白与核纤层蛋白分子存 在相同的抗原决定簇(Osborn Weber， 1987)；(4)两者在结构上有密切联系，核纤层成为核骨架与中间纤维之间的桥梁3、泛素降解蛋白的途径 4、核糖体中蛋白组分同RNA的功能 rRNA具有肽酰转移酶的活性；为tRNA提供结合位点(A位点、P位点和E位点)；为多种蛋白质合成因子提供结合位点；在蛋白质合成起始时参与同mRNA选择性地结合以及在肽链的延伸中与mRNA结合；核糖体大小亚单位的结合、校正阅读(proofreading)、无意义链或框架漂移的校正、以及抗菌素的作用
4、等都与rRNA有关。 5、一群细胞死亡，试举三个以上证据，证明它们是调亡而非坏死（不能超过400字，否则扣分2003年博士研究生入学考试试题细胞生物学试题（本人怀疑是生化题）一、名词解释（1-5每题2分，6-9每题2.5分，共20分）1、互补 现在使用的许多载体都带有一个E.coli DNA的短区段，其中含有-半乳糖苷酶的-肽基因（lacZ）的调控序列和头146个氨基酸的编码信息。这个编码区中插入了一个MCS，它并不破坏 读框，但是可使少数几个氨基酸插入到-半乳糖苷酶的氨基端而不影响功能，这种载体适用于编码-半乳糖苷酶C端部分序列的宿主细胞，虽然宿主和质粒编码 的片段各自都没有酶活性，但它们可
5、融为一体，形成具有酶活性的蛋白，从而实现互补。2、RT-PCR 3、亲和层析 亲和层析是一种吸附层析，抗原（或抗体）和相应的抗体（或抗原）发生特异性结合，而这种结合在一定的条件下又是可逆的。所以将抗原（或抗体）固相化后，就可以使存在液相中的相应抗体（或抗原）选择性地结合在固相载体上，借以与液相中的其他蛋白质分开，达到分离提纯的目的。4、偏爱密码子 5、同工酶 （isoenzyme）是指催化的化学反应相同，酶蛋白的分子结构、理化性质乃至免疫学性质不同的一组酶。这类酶存在于生物的同一种属或同一个体的不同组 织、甚至同一组织或细胞中。翻译并且解释名词6、chromatin chromosome 7、
6、nuclear matrix 用核酸酶与高盐溶液对细胞核进行处理，将DNA、组蛋白和RNA抽提后，残留纤维蛋白的网状结构。8、gene cluster 指基因家族中的各成员紧密成簇排列成大串的重复单位，定于染色体的的特殊区域。他 们属于同一个祖先的基因扩增产物。也有一些基因家族的成员在染色体上排列并不紧密，中间还含有一些无关序列。但总体是分布在染色体上相对集中的区域。9、transformation二、填空（每空1分，共15分）3、协和生物化学系主任吴宪(1893-1959)对我国的科学事业贡献巨大。4、科学家1928年格里非斯（PGriffith）首次证明DNA是遗传物质,该证明实验是肺炎双
7、球菌感染小家鼠的实验。5、能够进行可逆磷酸化的氨基酸是(3个)Ser、Thr_。6、维持DNA双螺旋的力是碱基堆积力和氢键。8、真核细胞核糖体大亚基的18S rRNA与原核细胞16S rRNA 同源。9、Plindromatic sequence 又叫-,定义是:-。三、判断并改错（每题2.5分，共5分）1、细菌的操纵基因总在启动子的后面。2、乳酸操纵子模型中,阻遏蛋白与RNA聚合酶结合阻止启动子启动。四、简答（每题5分，共20分）1、CAMP激活蛋白激酶的分子机制?2、核酸和蛋白质分子为什么具有方向性? 核酸链具有方向性，有两个末端分别是5末端与3末端。5 末端含磷酸基团，3末端含羟基。核酸
8、链内的前一个核苷酸的3羟基和下一个核苷酸的5磷酸形成3,5磷酸二酯键，故核酸中的核苷酸被称为核苷酸残基。3、紫外线造成皮肤细胞DNA何种损伤?如何修复?4、使肽键形成的酶叫什么名字?其化学本质是什么?存在于细胞的什么位置?五 论述（每题20分，共40分）1、何谓限制性内切酶的星活性?影响因素是什么? 所谓星活性又称Star活性。是指由于反应条件不同而产生的切断与识别位点相似但不完全相同的序列。 导致星号活性的因素： 1.较高的甘油浓度（5% v/v）； 2.酶与底物DNA比例过高（不同的酶情况不同，通常为100 U/g）； 3.低盐浓度（pH 8.0）5.存在有机溶剂（如DMSO、乙醇(9)、
9、乙烯乙二醇、二甲基乙酰胺、二甲基甲酰胺、sulphalane等）6.用其他二价离子替代镁离子（如Mn2+，Cu2+，Co2+，Zn2+等） 抑制星号活性的方法： 1.尽量用较少的酶进行完全消化反应。这样可以避免过度消化以及过高的甘油浓度。2.尽量避免有机溶剂（如制备DNA时引入的乙醇）的污染。3.将离子浓度提高到100-150 mM（若酶活性不受离子强度影响）。4.将反应缓冲液的pH值降到7.0。5.二价离子用Mg2+。2、已知一个蛋白质的全长CDNA,设计一个实验步骤从CDNA开始提纯此蛋白。2004年协和考博细胞生物学试卷名解（不全）1.芽孢 细胞质高度浓缩脱水所形成的一种抗逆性很强的球形
10、或椭圆形的休眠体。二、问答（不全） 1.细胞核线粒体,高尔基体的分离 2.述NO的信号通路 3.怎样分离细胞骨架，MAR的生理功能 matrinassociation region(MAR) 核骨架结合序列5.肿瘤发生是一个多基因多步骤的过程,从癌基因和抑癌基因方面用简单的示意图说明肿瘤的发生机制一、名词解释（每题5分，共20分）1、米伦反应（Mliion reaction）：蛋白质溶液中加入米伦试剂（亚硝酸汞、硝酸汞及硝酸的混合液），蛋白质首先沉淀，加热则变为红色沉淀，此反应为酪氨酸的酚核所特有的 反应，因此含有酪氨酸的蛋白质均呈米伦反应。2、核内基质 3、核定位信号4、星体 形体微管二、判
11、断（每题1分，共10分）一种周期蛋白与一种CDK相作用。三、填空（每空1分，共20分）1、线虫发育过程中有1090个细胞,其中凋亡了131个细胞，有14个基因与凋亡相关、ced-3和ced-4那两个基因于凋亡密切相关, ced-3基因抑制凋亡。2、电境包埋剂有那四个特点高倍放大不显示本身结构、聚合时不发生明显的收缩、有良好的机械性，鲤鱼切片、易被电子穿透。3、MAR核骨架结合序列有那四个特点富含AT、富含DNA解旋元件、富含重复序列、含有转录因子结合位点。4、G蛋白_亚基和_GDP_结合时,G蛋白无活性5、过氧化物酶体,有两种酶,一种以FAD为辅基,产生H2O2、另一种是过氧化氢酶酶,分解H2
12、O2生成水和氧气。6、根据着丝粒的位置，染色体可分那四种中着丝粒染色体、亚中着丝粒染色体、亚端着丝粒染色体、端着丝粒染色体。四、问答题（每题10分，共50分）1、简述ATP合成酶合成ATP的过程。2、叙述信号肽的结构及作用。3、亲核蛋白如何入核的?4、如何用抗体对特异抗原进行定位,定性?5、P53与凋亡的关系。2005年攻读博士研究生入学考试细胞生物学试题（回忆型）一、填空：（每题2分，共20分）1、龟的性别决定受温度的影响低温雄性高温雌性。2、核孔复合体有四部分：孔环颗粒、周边颗粒、中央颗粒和无定形物质组成3、细胞生长分化因子都包括 ， ， ， ， ，细胞生长分化因子又称 。4、目前推测R蛋
13、白的功能有三个对rRNA折叠成有功能的三维结构是十分重要的、在蛋白质合成过程中，核糖体的空间构象发生一系列的变化，某些r蛋白质队核糖体起“微调”作用、rRNA和r蛋白质共同行使核糖体上的结合位点和催化作用中心。5、酪氨酸信号通路的受体有两个 ， 。9、溶酶体的标志酶酸性磷酸酶。其膜蛋白通过膜蛋白高度糖基化方式防止自身被水解。二、判断（每题1分，共10分）1、核小体蛋白与DNA的结合是有选择性的。2、吞噬泡的形成需要网格蛋白。3、线粒体的分裂方式 酵母和撅类主要是通过内缩。三、名词解释（每题2分，共20分）1、亚线粒体小泡 用超声波把线粒体破碎，线粒体内膜碎片可形成颗粒朝外的小膜泡。2、隐蔽mR
14、NA 一般情况下，存在于未受精卵细胞中并不用以翻译蛋白质，为早期蛋白质合成提供模板， 在卵细胞中与抑制蛋白质结合而失去活性的mRNA。3、死亡酶 即apopain催化poly（ADP-ribose）Polymerase（PARP），即聚（ADP-核糖）聚合酶的裂解执，行着与线虫中的ced3相同的功能，导致细胞的凋亡。4、易位子 位于内质网上的与新合成的多肽进入内质网有关的蛋白复合物，其本质是一种通道蛋白。5、核仁相随染色质 分为两部分，一部分位于核仁周围，成为核仁周染色质，即异染色质；一部分位于核仁内，为常染色质，即核仁组织区，是rDNA所在的位置。6、传代培养 将培养细胞从培养器中取出，把一
15、部分移至新的培养器中再进行培养，这种培养方式称为传代培养。7、第二信史四、简答（每题10分，共50分）1、什么是细胞工程 并举两例说明之。 以细胞为对象，应用生命科学理论，借助工程学原理与技术，有目的地利用或改造生物遗传特性，以获得特定的细胞、组织产品或新型物种的一门综合性科学技术。 细胞融合技术和细胞杂合技术、单克隆技术2、高尔基体的结构和功能。 高尔基体是由数个扁平囊泡堆在一起形成的高度有极性的细胞器。常分布于内质网与细胞膜之间，呈弓形或半球形，凸出的一面对着内质网称为形成面 （forming face）或顺面（cis face）。凹进的一面对着质膜称为成熟面（mature face）或反面（trans face）。顺面和反面都有一些或大或小的运输小泡，在具有极性的细胞中，高尔基体常大量分布于分泌端的细胞质中。高尔基体的主要功能将内质网合成的蛋白质进行加工、分类、与包装，然后分门别类地送到细胞特
