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1、Folch法提取脂质1. 组织称重。2. 剪碎组织，按照1g组织加入20ml溶剂比例加入氯仿和甲醇（2：1 ）混合溶液。混匀15-20m in后1 500一2000 r/mi门离心5min 收集溶液.3. 溶液加入0.2体积的水（20m丨溶液加4ml水）或0。9%NaCl溶液 清洗，涡旋几秒钟，以2 000rpm离心10m in得到两相液面。吸取 上清液，用于分析检测神经节苷脂类或小的极性分子。如果有必要 （为移除标记分子），用甲醇和水（1: 1）清洗两相液交界面1至2 次，注意不要冲洗到下层液体内。4. 收集的下层液即氯仿层含有脂质，用N2吹干氯仿即得脂质。文献采用正相液相色谱法和大气压化学
2、电离质谱分析测定神经酰胺 时说按Fol ch法，以氯仿和甲醇（2:1,1： 1,1： 2）三个不同比例来 提取脂质，每种混合溶液提取2 小时.Bligh和Dyer的方法（也是我们之前用的方法）1. 皮肤组织称重，胰酶37C消化1h,用镊子分离表皮和真皮，弃 去真皮。2. 剪碎表皮组织，加入 3.75ml 氯仿和甲醇（1：2）混合溶液。匀浆 15mi n.加氯仿1o25m丨，混匀30s。再加水1。25 m丨，混匀 3 0s。3. 1500r/min离心1 5min,吸取下层氯仿层，收集在棕色小瓶中， 锋挥干溶剂，即得总脂质。注：本次试验For ch法取两只正常组的雌雄鼠制备两个样，B&D法也 是取两只正常组的雌雄鼠制备两个样。预先准备好需要的溶剂、移液 管、棕色小瓶和离心管（离心管最好用玻璃的）。
