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1、检验科微生物室SOP文件检验科微生物实验室作业指导书细菌室工作守则文件编号：LABSOPJX001细菌室工作守则1.每日工作前用紫外线照射实验室半小时以上。2.入室前应穿工作服，并做好实验前的各项准备工作。3.实验室内应保持肃静，不准吸烟、吃东西及用手触摸面部。尽量减少室内活动，以免引起风动，无关人员禁入。4.非必要物品禁止带入实验室，必要资料和书籍带入后，应远离操作台。5.做好标本的登记、编号及试验记录。未发出报告前，请勿丢弃标本。6.标本处理及各项试验应在操作间进行，接种环用完后应立即火焰灭菌，沾菌吸管、玻片等用后应浸泡在消毒液内。7.实验时手部污染，应立即用过氧乙酸消毒或浸于3%来苏儿溶
2、液中5-10分，再用肥皂洗手并冲洗干净；如误入口内，应立即吐出，并用1:1000高锰酸钾溶液或3%双氧水漱口，根据实际情况服用有关药物。8.实验过程中，如污染了实验台或地面，应用3%来苏儿覆盖其上半小时，然后清洗；如污染工作服，应立即脱下，高压灭菌。9.若出现着火情况，应沉着处理，切勿慌张，立即关闭电闸，积极灭火。易燃物品（如酒精、二甲苯、乙醚和丙酮等）必须远离火源，妥善保存。10.工作结束时检查电器、酒精灯等是否关闭，观察记录培养箱、冰箱温度及工作情况，用浸有消毒液的抹布将操作台擦拭干净，并将试剂、用具等放回原处，清理台面，未污染的废弃物扔进污物桶，有菌废弃物应送高压灭菌后处理。11.离室前
3、工作人员应将双手用消毒液消毒，并用肥皂和清水洗净。12.爱护仪器设备，经常清洁，注意防尘和防潮。作业指导书细菌室消毒隔离措施文件编号：LABSOPJX002细菌室消毒隔离措施1.每天工作前用消毒液消毒工作台，上班前、下班后开紫外灯（最少半小时）进行空气消毒。2.非必要品禁止带入实验室，必要资料和书籍带入后，应远离操作台。3.使用后的载玻片、盖片、平皿、试管等用消毒液浸泡，经煮沸后清洗或丢弃。4.试验后的血液标本用消毒液浸泡后煮沸消毒，所有用于试验的反应板、吸头等用消毒液浸泡（至少24小时以上）后清洗或丢弃。5.所有微生物培养物（细菌、支原体、真菌等培养物），不管标本阳性或阴性均用消毒液浸泡后，
4、经煮沸消毒，才能清洗或丢弃。6.取材、最好采用一次性工具，不能采用一次性工具者，每次取材前均应彻底消毒。7.用于浸泡各种器械如刮菌刀、持物钳、镊子等的消毒液要定期更换。8.不慎发生临床标本或培养物污染工作台，不要立即用水冲洗，应先用纸巾、布等敷料加上消毒液（如5%石炭酸、3%来苏儿等）消毒30分钟以上，然后再清洗。如污染工作服，应立即脱下，高压灭菌。9.实验时手部污染，应立即用肥皂洗手并冲洗干净，再外用消毒药水，如误入口内，应立即吐出，并用1:1000高锰酸钾溶液或3%双氧水漱口，必要时根据实际情况服用有关药物。作业指导书微生物实验室安全与防护文件编号：LABSOPJX003在工作区内禁止饮食
5、，吸烟和存放食物及使用化妆品。实验室里应保持整洁，不存放与工作无关的杂物。工作台每天至少用消毒剂清洁一次，在溢渗传染物后要立即消毒、清洗；进入无菌室必须穿工作服，戴口罩、帽子。在各种操作进程中均应尽量避免或减少气溶胶产生。实验工作区禁止无关人员出入，尤其要严禁儿童进入。工作人员在处理传染性物质或动物之后，以及在离开实验室时要洗手。凡发生溢漏事故或接触传染性物质后，均应立即报告实验室监督员或实验室主任，并做好书面记录及采取相应措施。结核杆菌的培养及标本涂片务必在生物安全柜里操作。9.有涉及感染性材料的操作应在生物安全柜中进行，如结核杆菌培养、感染性组织等。10.工作人员在进入实验室工作区前，应在
6、专用的更衣室（或缓冲间）穿着背开式工作服或其它防护服。工作完毕后必须脱下工作服，不得穿工作服离开实验室。可再次使用的工作服必须先消毒后清洗。11.工作时必须戴手套（两副为宜）。一次性手套必须先消毒后丢弃。12.在实验室中必须配备有效的消毒剂、眼部清洗剂或生理盐水，且易于取用。可配备应急药品。作业指导书细菌室内质控制度文件编号：LABSOPJX004每位工作人员必须加强质控意识，以质量控制工作为核心，认真做好各项质控试验和记录。加强质量控制和专业理论知识的学习，规范操作，正确分析处理结果。一旦发现失控，及时采取相应措施，纠正失控结果。每批自配或购置的培养基、生化鉴定等试剂必须用标准菌株ATCC2
7、7853、ATCC25923、ATCC25922质控。合格方可使用，并作好记录。每周进行药敏试验质量控制。对每批微量药敏板、培养基、药敏纸片必须用ATCC27853、ATCC25923、ATCC25922菌株进行质控，并做好记录，出现问题及时分析，采用相应措施。每天观察培养箱、CO2培养箱、冰箱的温度，并做好记录。无菌间每周监测一次，三氧机、紫外线消毒灭菌情况，并做好记录。每三个月用ATCC27853、ATCC25923、ATCC25922菌株对全自动微生物分析仪进行鉴定和药敏质量控制。认真讨论、分析每次参加卫生部室间质评结果。总结经验教训。作业指导书临床微生物及实验室的医院感染管理文件编号：
8、LABSOPJX005检验科医院感染管理应达到以下要求:工作人员必须穿工作服,戴工作帽,必要时穿隔离衣，胶鞋，戴口罩,手套。使用合格的一次性检验用品,用后进行无害化处理。严格执行无菌技术操作规程,静脉采血必须一人一针一管一巾一带;微量采血应做到一人一针一管一片;对每位病人操作前洗手或手消毒。无菌物品如棉签,棉球,纱布等及其容器应在有效期内使用,开启后使用时间不得超过24小时.使用后的废弃物品,应及时进行无害化处理,不得随意丢弃。各种器具应及时消毒,清洗;各种废弃标本应分类处理(焚烧,入污水池,消毒或灭菌)。报告单应消毒后发放。检验人员结束操作后应及时洗手,毛巾专用,每天消毒。保持室内清洁卫生.
9、每天对空气,各种物表及地面进行常规消毒.在进行各种检验时,应避免污染;在进行特殊传染病检验后,应及时进行消毒,遇有场地,工作服或体表污染时应及时处理,防止扩散,并视污染情况向上级报告。菌种、毒种按传染病防治法进行管理。实验室的医院感染管理参照检验科的管理要求.实验动物应严格管理,防止逃逸或造成人与实验室动物的交叉感染;实验后的动物必须焚化进行无害化处理。作业指导书细菌室操作技术规范文件编号：LABSOPJX006细菌鉴定和药敏试验操作按全国临床检验操作规程。负责鉴定及签发报告的主管技术人员应通晓诊断细菌学的全面知识。从事细菌专业技术人员，应了解医院监测知识，掌握其检测方法，定期统计分析医院感染
10、细菌分布，耐药变迁，并将其结果反馈临床。细菌室工作人员均应具备细菌传染、消毒、灭菌知识。细菌专业人员不断更新知识，了解细菌学检验新进展。定期或随时与临床联系，主动参与病例讨论了解病情及治疗情况，达到细菌检验与临床的密切联系。每天发出的微生物报告应认真复审，分析报告、评价报告。工作人员加强有菌观念，无菌操作。当工作环境被细菌污染，必须立即消毒处理，报告主管人员，采取必要措施。10工作人员被细菌培养物污染应消毒处理，必要时给予药物治疗，并向主管负责人报告，采取特殊措施。作业指导书无菌间规章制度文件编号：LABSOPJX007每一个工作人员必须树立无菌观念，严格进行无菌操作。在无菌室内必须戴帽子、口
11、罩，进行无菌操作。每天早上8：008：30用紫外线消毒或在凌晨4-6点用多功能机消毒2小时，每月检查一次紫外灯的无菌效果。无菌室内各种废弃物品必须煮沸消毒。实验完毕后，用含氯制剂1000mg/L消毒桌面、地面。作业指导书菌（毒种）管理办法文件编号：LABSOPJX0081.菌种保管应有专人负责，保存于冰箱中，房门专人加锁，确保菌种安全。保管人员变动时，必须严格交接手续。2、菌种应有严格的登记，包括形态，分离日期，鉴定日期，签发者，主要鉴定性能（包括形态、染色、抗原结构、动物致病力等），并注明使用、转移、销毁情况及原因。3、各种菌种应按规定时间接种，一般在接种三次后作一次全面的鉴定，注意菌种有无
12、污染及变异，如发现变异时，应及时更换。4、菌种保存范围及向外单位转移，应按国家卫生部规定执行。5、所有存在菌种应具备清单。作业指导书细菌室仪器维护保养及质控措施文件编号：LABSOPJX009细菌室仪器维护保养及质控措施一、BacT/Alert120、BACTEC9050血培养仪的维护、保养和质控措施1.每天上班开始工作前和下班离开前要检查仪器的工作状态是否正常，仪器培养箱温度的报告里外是否一致。2.每天用中性的清洁液将仪器表面擦拭干净3.每天先做质控。4.一个月至少做一次全程定标。5.仪器检测数据每周星期六做备份。6.仪器每一个月做一次彻底的清洁保养，包括清洁外壳、瓶孔、滤网等7.仪器每年请
13、工程师做一次检定工作。二、Vitek-32、BD凤凰全自动细菌鉴定和药敏分析仪的维护、保养和质控措施1.每天上班开始工作前和下班离开前要检查仪器的工作状态是否正常。2.每天用中性的清洁液将仪器表面擦拭干净3.购买的新批号的试剂都必须先做质控，质控合格后才能用于临床检测。4.仪器检测数据每周星期六做备份。5.仪器每一个月做一次彻底的清洁保养，包括清洁外壳、卡片架、滤网等6.仪器每年请工程师做一次检定工作。作业指导书标准菌株保存及使用文件编号：LABSOPJX0010标准菌株保存及使用概述：标准菌株是细菌室室内质控工作必不可少的、重要的生物资源，我室的标准菌株主要来自省临检中心的发放和从卫生部临检
14、中心以及国家菌种保存中心购买所得，为了让标准菌株能够得到合理的应用，特制定以下规定。1.对每批购买的标准菌株要做好登记，包括菌种的菌名、编号、购买时间、保存地点、记录人等2.每次使用标准品都应作好使用记录，包括标准品的名称、编号、使用时间等。3.购买的标准品初次使用时，应大量增殖，然后分装在含10-15%甘油的胰蛋白胨肉汤中，-20以下保存。4.新的标准菌株复苏最多不得超过三次，如超过三次将不在视为标准菌株使用。5.标准菌株保存管一经溶化使用后，不得再次冻存。作业指导书细菌室内务管理规定文件编号：LABSOPJX011细菌室内务管理规定1.细菌室岗位分工与职责管理规定1.1概述鉴于细菌室工作琐
15、碎烦杂且千头万绪，为了使细菌室的工作能够保质保量地顺利完成，特将细菌室暂定为两个岗位，以明确工作范围、增强责任心、便于日常工作的完成。当然由于细菌室不同岗位工作量的随机性较大，故我室要求大家发扬既分工，又协作的精神，共同完成细菌室工作。1.2岗位职责各岗位工作人员要求严格按照作业指导书进行操作，高质量的完成本岗位工作，如遇到问题须提出经讨论解决。1.3岗位分工岗位：完成细菌培养标本（号菌培养除外）的结果观察处理及报告发放。岗位：完成仪器的维护、保养和质控工作等。2.细菌室记录内容明细2.1环境条件室内温度、湿度，每天一次，上午记录。2.2恒温设备2.3孵箱、普通冰箱，每天一次，上午记录。2.3分析仪器常规每日保养一次，发现问题随时详细记录；质控按要求测试完毕后，及时手工记录，2.4标本与结果不合格标本记录、危急值报告记录、结果记录。2.5岗位记录（附表：细菌室岗位记录表）2.6其它记录，如交班记录等。3.细菌室室内环境条件控制范围温度1828，湿度2080。
