标 准 操 作 程 序STANDARD OPERATING PROCEDURE题目：药典分析措施验证（USP）Title：VALIDATION OF COMPENDIAL PROCEDURES文献编号：SOP.NO：QC-6606-00部门： 质量部起草人日期部门审视日期QA审核日期批准人日期执行日期分发部门质量部、质量研究部、QC警告：有关责任部门和负责人务必于执行之日前完毕本程序的培训变 更 记 载文献编号/版本变 更 内 容执行日期SOP.NO：QC-6606-001、目的：建立药典分析措施验证(USP)原则操作规程2、范畴：药典分析措施验证(USP)3、责任者：质量研究部、QC化验员4、程序：[原则来源]USP37<1225>药典分析措施验证用于评价药物质量的检查措施应符合一定规定根据联邦食品、药物、化妆品第501条的规定，在美国药典（USP）和国家处方集(NF)的正文检查措施和规定为法定原则按照现行药物生产管理规范有关条文[21 CFR 211.194(a)]规定，用于评价药物与否符合既定原则规定的分析措施应具有一定精确性和可靠性按照该规定[21 CFR 211.194(a)(2)]，USP和NF分析措施使用者不必验证措施的精确性和可靠性，但要确认在实际使用条件下的合用性。
考虑到USP和NF原则法定地位这一基本状况，因此，药典品种新措施或修订措施得建议，应由充足实验室数据支持，以阐明措施有效本指引通则内容尽量与三方国际协调会（ICH）有关在欧盟、日本和美国注册申报资料规定中与分析措施部分有关的分析措施验证和措施学文本一致药典申报新的或修订的分析措施得药典申报，应报送充足的资料，以便美国药典委员会专家理事会及其专家委员会对建议的措施进行审评多数状况下，审评内容一般为评价论述的分析措施与否清晰完整，需要建立该措施的结论，以及措施验证文本措施类型不同，申报规定也许不同，一般涉及下列内容：理由 写明需要本措施的理由、用途以及与其她措施比较的长处修订的措施应写明现行药典措施的局限性以及建议措施得长处建议的分析措施 应完整具体地写明建议的分析措施，以便她人依法操作文字应涉及所有重要的操作参数和有关事项以及明确的实验成果计算公式数据元素 本部分规定提供具体、完整的分析措施验证文献，文献应涉及实验数据及各合用的分析措施运营特性计算成果运营特性在下文中论述验证分析措施验证是通过实验室研究证明该分析措施的运营特性符合其分析应用规定的过程表1中列出了本文分析措施验证需考虑的典型分析运营特性。
由于对术语有不同的理解和用法，本通则如下部分涉及各运营特性的定义以及衡量特性的措施描述定义与“测定成果”有关分析措施的论述应写清该措施得测定成果是什么ISO5725-1和3534-1指出，“测定成果是用特定测定措施得到的特性值分析措施应规定进行一次还是多次单独测定，作为测定成果报告的平均值，或其她合适函数（如，中位数或原则偏差）也许规定做原则校正，如气体体积校正到原则温度和压力时的体积因此测定成果可以是数个观测值的计算成果简朴实验时，测定成果就是观测值自身”测定成果是用于与原则规定限度比较的最后报告值，但偶有例外物理性质测定措施验证也许涉及化学计量模型措施验证中用到的典型分析特性可用于基于化学计量模型的措施表1 分析措施验证用典型分析特性精确度精密度专属性检测限定量限线性范畴耐用性用代表性样品进行分析措施验证时，应考虑工艺条件和物料差别的影响下列状况下，药典分析措施应进行再验证：报送USP的修订分析措施；或将已有通用措施用于新产品或新物料制成的产品（见下文措施所需数据元素部分）国际协调会（ICH）有关文本建议下列状况下需在验证：原料药合成工艺变化；药物制剂组方变化；分析措施变化通则<1225>提供适于大多数药典分析措施得验证规定信息。
药典分析措施验证可按照表1中列出的部分或所有分析特性，以及表2中分析措施分类进行有的药典分析措施验证规定超过通则<1225>的特性则可按各有关措施通则规定的分析验证特性或特殊验证规定进行分析运营特性精确度定义 分析措施得精确度系指该措施所得测试成果与真值的接近限度分析措施的精确度应在一定范畴内测定[有关术语：通则<1225>和ICH Q2中精确度定义为不偏离限度（真实度）但在国际计量学词汇[International Vocabulary of Metrology(VIM)]和国际原则组织[the International Organization for Standardization(ISO)]的文献中，“精确度”有不同的意思ISO精确度的定义把不偏离限度（真实度）与精密度的概念合在一起]测定 对于原料药含量测定，用分析措施测定已知纯度的供试品（如对照品），或用被验证措施测定成果与其她已知精确度的措施测定成果进行比较，测得精确度对于制剂中药物的含量测定，用分析措施测定制剂成分混合物中按照措施范畴加入的已知量被测物，测得精确度如不能获得所有制剂成分，可向制剂中加入已知量被测物（加样法）进行测定，或用被验证措施测定成果与其她已知精确度的措施测定成果进行比较。
对于杂质定量分析，原料药或制剂中加入已知量杂质，测得精确度如不也许得到某些杂质或降解产物，可以将测定成果与另一措施测得成果进行比对如没有其她措施，可比较杂质和被测物质的响应值，即等量杂质和被测物响应值比值（相对响应因子），如果已知该比值，可用于计算杂质含量精确度为样品中被测物已知加入量含量测定的百分回收率，或平均值与可接受真值的偏差，同步报告置信区间ICH有关文献建议在规定范畴至少3个浓度至少测定9次的成果拟定精确度（即3个浓度，每个浓度反复测定3次）精确度的拟定可以用不同措施，涉及在含量测定范畴内测定被测物回收率（百分回收率），或测定估计浓度与真实浓度的线性关系建议记录判断原则为斜率的置信区间应在约1.0区间内，或斜率应接近1.0在验证文献中均应规定区间或接近限度的定义判断原则取决于含量测定措施和变异以及成果不建议在斜率为1.0时用零假设检查没有记录意义地拟定判断原则物理性质测定措施的精确度可通过原则物质分析拟定，或根据具体状况对上述措施得合用性进行具体分析来拟定精密度定义 分析措施的精密度系指均匀样品多次取样用该分析措施测定各成果的一致限度分析措施的精密度常用一系列测定成果的原则偏差或相对原则偏差（变异系数）表达。
精密度衡量在正常操作条件下分析措施的重现性和反复性反复性系指不同实验室用该分析措施测定，如协同研究中间精密度（也称耐用性）为实验室内差别，即在同一实验室在不同日期，或用不同分析人员，或用不同设备用该分析措施进行测定反复性系指在一种实验室由一种分析人员用相似设备在短时间内用该分析措施进行测定测定 分析措施的精密度是对足够份数的一种均匀样品进行测定，以便计算原则偏差或相对原则偏差（变异系数）记录有效的估计数本测定为各份样品从样品制备得到最后成果进行的所有分析过程ICH有关文献建议在规定范畴至少3个浓度至少测定9次的成果拟定精确度（即3个浓度，每个浓度反复测定3次），或用100%测试浓度至少6次测定成果专属性定义 ICH定义专属性在杂质、降解产物以及辅料存在下分析措施能精确拟定被测物质存在的能力如果缺少专属性，可用其她分析措施弥补[注：国际专业权威机构（IUPSC,AOAC-I）采用“选择性”这个术语，对选择性极高的分析措施保存“专属性”这个术语]对于下面讨论的分析措施，以上定义具有如下含义：鉴别实验：鉴定被分析物特性纯度检查：采用的所有分析措施能给出被测物质中杂质的精确含量（如有关物质检查、重金属限度检查、有机挥发性杂质检查）。
含量测定：给出对的成果，样品中被分析物含量或效价的精确成果测定 定性分析（鉴别实验）措施应能显示辨别也许存在的构造十分有关的化合物的能力用品有被分析物质的阳性反映（与已知对照品对照）加上不含被测物质样品的阴性反映进行确证，并确证阳性反映不是与被分析物构造相似或十分有关的物质产生的杂质分析措施，向原料药或制剂中加入适量杂质，应能显示这些杂质的测定成果具有一定精确度和精密度含量测定分析措施，其专属性应能显示该分析措施不受杂质或辅料存在的影响实际做法可向原料药或制剂中加入适量杂质或辅料，拟定测定成果不受这些外来物质的影响如果杂质或降解产物得不到，可将具有杂质或降解产物的样品测定成果与用另一确证了的措施测定成果比较（如药典措施，或其她经验证了的措施)，以阐明其专属性应涉及对贮存在相应苛刻条件下的样品测定比较（如：光、热、湿度、酸或碱水解、以及氧化)含量测定分析措施，应比较这些成果；色潜纯度检查应比较杂质的检出状况.ICH有关文献阐明，当使用色谱分析措施时，验证资料中应附代表性色谱图，以显示其选择性好坏，应标明每个色谱个峰峰纯度检查（如用二极管阵列或质谱法检测）可用于显示被测定物色谱峰仅为一种成分。
用波谱法的定性定量测定措施验证，应参照有关通法，如近红外光谱法、拉曼光谱法、X射线粉末衍射法等检测限定义 检测限是限度检查的特性检测限系指在规定实验条件下样品中被分析物能被检出的最低量，不一定规定定量因此，限度检查只要阐明被分析物的量髙于或低于一定限度检测限一般以样品中被分析物的浓度表达（如百分浓度，十亿分之几)测定 非仪器分析措施，一般用已知浓度被分析物的样品进行分析，求得该被分析物能被可靠检出的最低浓度仪器分析措施，可用与非仪器分析措施相似措施求得检测限分析措施推荐作为药典措施时，不必要测定实际的检测限事实上，用含高于和低于规定检测浓度的已知浓度被分析物样品求得的检测限是非常低的例如，规定检查浓度为0.1%的杂质，应表白，用本法能可靠地检出该浓度的杂质具有基线噪音的仪器分析措施，ICH有关文献论述了一种常用措施，即将含已知低浓度被分析物样品测得的信号与空白样品信号比较可以拟定可靠检出被分析物的最低浓度 一般可接受的信噪比为2：1或3：1其她措施如按照原则曲线的斜率和响应值的原则偏差计算检测限的无论用那种措施，必须用接近检测限或制备成检测限浓度的数个样品，对检测限进行最后验证定量限定义 定量限是样品基质中低浓度化合物定量测定的特性，如原料药中的杂质和最后药物制剂中的降解产物。
定量限系指在规定实验条件下样品中被分析物能被测定的最低量，且具有可接受的精密度和精确度定量限一般以样品中被分析物的浓度表达（如百分浓度，十亿分之几)测定 非仪器分析措施，一般用已知浓度被分析物的样品进行分析，求得该被分析物能被测定且具有可接受精确度和精密度的最低浓度仪器分析措施，可用与非仪器分析措施相似措施求得定量限分析措施推荐作为药典措施时，不必要测定实际的定量限事实上，用含高于和低于规定定量浓度的已知浓度被分析物样品求得的定量限是非常低的例如，规定测定被分析物的浓度为每片0.lmg,应表白，用本法能可靠地定量测定该浓度的被分析物具有基线噪音的仪器分析措施，ICH有关文献论述了一种常用措施，即将含已知低浓度被分析物样品测得的信号与空白样品信号比较可以拟定可靠测定被分析物的最低浓度一般可接受的信噪比为10：1其她措施如按照原则曲线的斜率和响应值的原则偏差计算定量限的无论用那种措施，必须用接近定量限或制备成定量限浓度的数个样品，对定量限进行最后验证。