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1、NDM-1 实验室诊断产 NDM-1 细菌的实验室诊断包括筛查、表型确认以及分子确证实验三个步 骤。1、表型筛查试验：在细菌药物敏感性测定中，以美洛培南或亚胺培南纸片 法（K-B法）或最低抑菌浓度（MIC）测定法对肠杆菌科细菌产酶情况进行初步 筛查，如果达到以下标准，应怀疑细菌产碳青霉烯酶，需要进行性表型确认。厄 他培南特异性较低，不推荐用于筛选试验。a）K-B法：美洛培南（10g纸片）抑菌圈直径W23mm或亚胺培南（10g 纸片）抑菌圈直径W21mm时，需要进行表型确认。b）最低抑菌浓度（MIC）测定法：美洛培南MIC0.5mg/L时，需要进行表 型确认；对大肠埃希菌、克雷伯菌属、沙门菌属和
2、肠杆菌属，亚胺培南 MIC2mg/L时，可进行表型确认试验。2、表型确证试验：采用亚胺培南EDTA复合纸片或E试条，进行KB法药 敏试验或MIC测定，如果复合纸片比单药纸片的抑菌圈直径增大值5mm，或 单药与复合制剂的MIC比值三8时，判定产金属p -内酰胺酶，需用分子生物学 技术进行酶型确认。3、酶型分子确证试验：采用NDM-1的基因特异引物进行PCR扩增及产物 测序，确定菌株是否携带 NDM-1 基因。在 NDM-1 实验室诊断中，需要注意质量控制，推荐美洛培南作为表型筛 选与确证用抗菌药物，各医院实验室可进行PCR扩增初步确定细菌产酶情况， 对阳性结果须加以复核，同时菌株送有条件参考实验室进一步检测确定。（以上内容，由浙江大学医学院附属一院的肖永红教授提供）
